Evaluación genética para resistencia a brucelosis en ganado Criollo Colombiano BON (Genetic evaluation for resistance against to brucellosis Colombian Creole cattle BON)

Martínez R.

Description

Resumen
Se evaluaron 190 bovinos de las razas Blanco Orejinegro (BON), Cebú y los cruces BON x Cebú, Cebú x BON y Holstein x BON, para resistencia a Brucelosis, mediante infección in vitro de macrófagos bovinos con Brucella abortus cepa patógena Cumbal 1. Se encontraron diferencias significativas entre razas para el índice de sobrevivencia bacterial posinfección evaluado a las 24 (SOB 24) y a las 48 horas (SOB 48). El mayor valor fue para la raza Cebú (46,57 ± 14,12) y para el cruce BON x Cebú (34,15 ± 5,49) sin diferencias significativas entre ellas (p>0,05). Hubo diferencias significativas entre la raza cebú con la raza BON (17,87 ± 1,51) y el cruce Cebú x BON (9,14 ± 0,64) (p<0,05)
la tendencia fue similar para la sobrevivencia a las 48 horas. Lo anterior permitió clasificar como resistentes el 39,8 p.100 de los animales evaluados y susceptibles el 60,2 p.100. La raza con mayor porcentaje de resistentes fue la BON (44,63) y el cruce Cebú x BON (60 p.100). Se estimó también la heredabilidad (h2) para las mismas características y se encontró un valor de h2= 0,76 ± 0,17 para SOB 24. El carácter resistencia - susceptibilidad presenta un control genético altamente heredable en la población evaluada y parece existir mayor capacidad de control de la replicación bacterial intrafagosomal en la raza BON, lo que puede utilizarse en programas de mejora para obtener animales resistentes a brucelosis.
Abstract
Were evaluated 190 bovines of the Colombian Creole cattle Blanco Orejinegro (BON), Zebu and their crosses (BON x Zebu, Zebu x BON and Holstein x BON), for resistance to Brucellosis, by means of macrophages in vitro infection with Brucella abortus pathogenic strain (Cumbal 1). Were significant differences between breeds for the bacterial survival index evaluated to 24 (SOB 24) and 48 hours (SOB 48). The greater value was found in Zebu (46.57 ± 14.12) and BON x Zebu (34.15 ± 5.49) breed, without significant differences among them (p>0.05). There were significant differences between the Zebu, BON (17.87 ± 1.51) and Zebu x BON breeds (9.14 ± 0.64) (p<0.05)
the tendency was similar for the bacterial survival index to 48 hours. These results allowed to classify as resistant the 39.8 percent of the evaluated animals and 60.2 percent as susceptible. The breed with greater percentage of resistant animals was BON (44.63) and Zebu x BON (60 percent). It was estimated the heredabilidad (h2) for the same characteristics and was found a value h2= 0.76 ± 0.17 fort SOB 24. The character resistance - susceptibility showed highly inheritable genetic control in the evaluated population and it coult be a greater capacity of intrafagosomal bacterial replication control in the BON breed, characteristic that can be used in improvement programs to obtain resistant animals to Brucellosis.

Sujets

• Enfermedad
• Macrofagos
• Disease
• Macrophage

Informations

• Publié par: erevistas
• Publié le: 01 janvier 2005
• Nombre de lectures: 54
• Langue: Español

Extrait

EVALUACIÓN GENÉTICA PARA RESISTENCIA A BRUCELOSIS EN
GANADO CRIOLLO COLOMBIANO BON
GENETIC EVALUATION FOR RESISTANCE AGAINST BRUCELLOSIS IN COLOMBIAN
CREOLE CATTLE BON
1 1 1 2 2 2 1Martínez R. , R. Toro , F. Montoya , M. Burbano , J. Tobón , J. Gallego y F. Ariza
1Programa Nacional de Recursos Genéticos y Biotecnología Animal. Centro de Investigación CEISA.
Avenida el Dorado Nº 42-42. Bogotá D.C. Colombia. Phone: [phone]; Fax: ext. 1705; e-mail:
[e-mail]
2Grupo Regional Pecuario. Regional 4. C.I. El Nus. San Roque. Antioquia. Phone: [phone]; Fax:
0948556212. Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria. Corpoica Colombia.
ADDITIONAL KEYWORDSPALABRAS CLAVE ADICIONALES
Diseases. Brucella abortus. Macrophages.Enfermedades. Brucella abortus. Macrófagos.
RESUMEN
Se evaluaron 190 bovinos de las razas Blan- SOB 24. El carácter resistencia - susceptibilidad
co Orejinegro (BON), Cebú y los cruces BON x presenta un control genético altamente hereda-
Cebú, Cebú x BON y Holstein x BON, para resis- ble en la población evaluada, y parece existir
tencia a Brucelosis, mediante infección in vitro de mayor capacidad de control de la replicación
macrófagos bovinos con Brucella abortus cepa bacterial intrafagosomal en la raza BON, lo que
patógena Cumbal 1. Se encontraron diferencias puede utilizarse en programas de mejora para
significativas entre razas para el índice de obtener animales resistentes a brucelosis.
sobrevivencia bacterial posinfección evaluado a
las 24 (SOB 24) y a las 48 horas (SOB 48). El
mayor valor fue para la raza Cebú (46,57 ± 14,12) SUMMARY
y para el cruce BON x Cebú (34,15 ± 5,49) sin
diferencias significativas entre ellas (p>0,05). Were evaluated 190 bovines of the Colombian
Hubo diferencias significativas entre la raza Creole cattle Blanco Orejinegro (BON), Zebu and
cebú con la raza BON (17,87 ± 1,51) y el cruce their crosses (BON x Zebu, Zebu x BON and
Cebú x BON (9,14 ± 0,64) (p<0,05); la tendencia Holstein x BON), for resistance to Brucellosis, by
fue similar para la sobrevivencia a las 48 horas. means of macrophages in vitro infection with
Lo anterior permitió clasificar como resistentes el Brucella abortus pathogenic strain (Cumbal 1).
39,8 p.100 de los animales evaluados y suscep- Were significant differences between breeds
tibles el 60,2 p.100. La raza con mayor porcentaje for the bacterial survival index evaluated to 24
de resistentes fue la BON (44,63) y el cruce Cebú (SOB 24) and 48 hours (SOB 48). The greater
x BON (60 p.100). Se estimó también la value was found in Zebu (46.57 ± 14.12) and
2heredabilidad (h ) para las mismas característi- BON x Zebu (34.15 ± 5.49) breed, without
2cas y se encontró un valor de h = 0,76 ± 0,17 para significant differences among them (p>0.05).
Arch. Zootec. 54: 333-340. 2005.
EvaluacionMartinez.p65 333 22/12/2005, 13:25MARTINEZ, TORO, MONTOYA, BURBANO, TOBÓN, GALLEGO Y ARIZA
There were significant differences between the reducirla pueden ser designados como
Zebu, BON (17.87 ± 1.51) and Zebu x BON permisivos.
breeds (9.14 ± 0.64) (p<0.05); the tendency was De otra parte, la resistencia a la
similar for the bacterial survival index to 48 hours. infección con otros patógenos intra-
These results allowed to classify as resistant the celulares como Mycobacterium bovis,
39.8 percent of the evaluated animals and 60.2 Salmonella typhimurium y Leishmania
percent as susceptible. The breed with greater donovani en ratones, está controlada
percentage of resistant animals was BON (44.63) por una proteína del macrófago aso-
and Zebu x BON (60 percent). It was estimated ciada con resistencia natural (Nramp1),
2the heredabilidad (h ) for the same characteristics la cual ejerce su acción sobre la tasa
2and was found a value h = 0.76 ± 0.17 fort SOB de replicación de estos patógenos en
24. The character resistance - susceptibility los macrófagos. Ables et al. (2001)
showed highly inheritable genetic control in the han demostrado que existe gran simi-
evaluated population and it coult be a greater litud entre la función del macrófago del
capacity of intrafagosomal bacterial replication ratón y el de bovino para resistencia a
control in the BON breed, characteristic that can brucelosis (Cambell y Adams 1992,
be used in improvement programs to obtain 1994; Harmon et al., 1989; Price et al.,
resistant animals to Brucellosis. 1990 y Templeton y Adams, 1990).
Se ha reportado que los macrófagos
de bovinos genéticamente resistentes
INTRODUCCIÓN a un desafío in vivo con B. abortus
(cepa 2308), son superiores en su ca-
La brucelosis es una enfermedad pacidad para controlar su multiplica-
contagiosa de los animales, producida ción bacterial intracelular y la de
por una bacteria del genero Brucella, Salmonella Dublín y Mycobacterium
caracterizada por abortos, retención bovis, lo cual también está mediado
de placenta, orquitis y epididimitis. por la proteína Nramp1 (Barthel et al.,
Harmon et al. (1989) infectaron un 2001). En bovinos la resistencia natu-
núcleo de ganado bovino con Brucella ral a B. abortus es heredable y su
abortus y encontraron que el 35 p.100 frecuencia (20 p.100 de los bovinos en
de los animales desarrollaron bajos razas cruzadas) puede ser incremen-
títulos de anticuerpos y la bacteria no tada en una generación de selección;
pudo ser aislada del tracto reproductivo además, el análisis genético de estu-
ni de la glándula mamaria, por lo que dios de apareamiento es consistente
concluyeron que existen animales na- con la teoría de que dos o más genes
turalmente resistentes. controlan el fenotipo de resistencia,
Price et al. (1990), han determina- dentro de los cuales pueden participar
do que los macrófagos (obtenidos de además de Nramp1, algunos genes del
glándula mamaria) que son capaces de complejo mayor de histocompatibilidad
reducir la sobrevivencia intracelular (Templeton et al., citado por Barthel et
de B. abortus hasta menos del 100 al., 2001).
p.100 de la bacteria fagocitada, pue- En el presente trabajo se utilizaron
den ser designados como fenotipo metodologías de infección de macró-
restrictivo y los que no son capaces de fagos con el fin de identificar el posible
Archivos de zootecnia vol. 54, núm. 206-207, p. 334.
EvaluacionMartinez.p65 334 22/12/2005, 13:25RESISTENCIA A BRUCELOSIS
mecanismo de control genético de la rior. El botón fue resuspendido en 15
resistencia natural a la infección con ml de medio RPMI (Sigma Chemical
Brucella abortus en las razas Blanco St. Louis USA) suplementado con 5
Orejinegro, Cebú Brahman y los cru- p.100 de suero autólogo (del mismo
ces BON x Cebú, Cebú x BON y animal), e incubado por 16 horas a
Holstein x BON. 37°C en presencia de 5 p.100 de CO .
2
Los linfocitos fueron removidos me-
diante 3 lavados con 10 ml de medio
MATERIAL Y MÉTODOS RPMI; los macrófagos fueron des-
prendidos por incubación con tripsina
Se utilizaron 140 bovinos de la raza versene (Sigma Chemical St. Louis
Blanco Orejinegro (BON), 20 de la USA) la cual se neutralizó y se retiró
raza Cebú Brahman y 30 animales rápidamente mediante lavado con
cruzados (10 BON x Cebú, 10 Cebú x RPMI suplementado con 5 p.100 de
BON, 10 Holstein x BON). La edad de suero autólogo. Las células fueron
los animales varió entre 1 y 9 años, y centrifugadas, contadas en cámara de
fueron seleccionados teniendo en cuen- Newbauer y diluidas para colocar
ta un diseño de medio hermanos pater- 50000 macrófagos por pozo en 100 ml
nos. Los animales no fueron vacuna- de medio. Luego se incubaron a 37°C
dos contra brucelosis y la serología con 5 p.100 de CO por 16 horas y
2
negativa se confirmó por ELISA. posteriormente se realizó la infección.
La cepa Brucella abortus, varie-
PREPARACIONES CELULARES dad Cumbal 1 fue aislada de un caso de
De cada animal se extrajeron 400 campo y pertenece al banco de
ml de sangre en una bolsa (Baxter), germoplasma de bacterias y virus de
con citrato fosfato dextrosa adenina CORPOICA. Ésta fue mantenida en
como anticoagulante. Esta sangre fue medio selectivo para Brucella (OXOID,
colocada en tubos cónicos de 40 ml los Hampshire Inglaterra), suplementado
cuales se centrifugaron a 1500 g por 20 con 5 p.100 suero de caballo (GIBCO
minutos, para extraer la capa de glóbu- BRL, Maryland USA), 5 p.100 Dex-
los blancos; ésta fue resuspendida en trosa (Sigma Chemical, St. Louis USA)
buffer fosfato salino-citrato (PBSc), y a 37°C en condiciones de micro-
dispensados sobre 20 ml de HISTO- anaerobiosis en un cámara (OXOID,
PAQUE (Sigma Chemical St. Louis Hampshire Inglaterra) por 4 días.
USA) (densidad 1077) y centrifugados A una placa de 96 pozos con 50000
a 1500 g por 20 minutos. Posterior- macrófagos por pozo, se le adiciona-
mente, la capa intermedia que contiene ron 75 ml de mezcla de bacteria
los monocitos y linfocitos fue re