INFLUENCIA DEL TIEMPO DE CRIOCONSERVACIÓN YTEMPERATURA DE DESCONGELACIÓN DE DOSIS SEMINALES PORCINAS HETEROSPÉRMICAS CON BAJA CALIDAD(INFLUENCE OF CRYOSTORAGE TIME AND THAWING TEMPERATURE ON AGED PORCINE HETEROSPERMIC SEMINAL DOSES)

Gosálvez L.F.

Description

Resumen
En este trabajo se ha estudiado cómo influyen la crioconservación y la temperatura de descongelación sobre la calidad seminal, utilizando un total de 15 muestras heterospérmicas. Para la congelación se siguió la metodología de Westendorf. Los mejores resultados en este trabajo se obtienen a los tres días de almacenamiento, empleando una temperatura de descongelación de 42°C, y aunque la temperatura de 50°C ofrece unos resultados ligeramente inferiores a la anterior, la diferencia no es estadísticamente significativa.
Abstract
In this work has been studied how the cryopreservation and the thawing temperature affect the seminal quality. A total of 15 heterospermic seminal doses were used, and later frozen following Westendorf's methodology. Best results were obtained by three storage days, employing a thawing temperature of 42°C. Although temperature of 50°C displays some slightly inferior results than the previous, the difference is not statistically significant.

Sujets

• Verraco
• Criobiología
• Espermatozoide
• Acrosoma
• Wild boar
• Cryobiology
• Spermatozoon
• Acrosome

Informations

• Publié par: erevistas
• Publié le: 01 janvier 2003
• Nombre de lectures: 8
• Langue: Español

Extrait

NOTA BREVE
INFLUENCIA DEL TIEMPO DE CRIOCONSERVACIÓN Y
TEMPERATURA DE DESCONGELACIÓN DE DOSIS SEMINALES
PORCINAS HETEROSPÉRMICAS CON BAJA CALIDAD
INFLUENCE OF CRYOSTORAGE TIME AND THAWING TEMPERATURE ON AGED
PORCINE HETEROSPERMIC SEMINAL DOSES
1 2 1 1Gosálvez, L.F., A. Vidal , J. Valdelvira y D. Babot
1Departamento de Producción Animal. Universidad de Lleida. Av. Rovira Roure, 177. 25198 Lleida. España.
E mail: [e-mail]
2Diputación de Lleida. C/ Carme, 26. 25007 Lleida. España
PALABRAS CLAVE ADICIONALES ADDITIONAL KEYWORDS
Verraco. Criobiología. Espermatozoide. Acrosoma. Boar. Cryobiology. Spermatozoa. Acrosome.
RESUMEN
En este trabajo se ha estudiado cómo influ slightly inferior results than the previous, the
yen la crioconservación y la temperatura de difference is not statistically significant.
descongelación sobre la calidad seminal, utili
zando un total de 15 muestras heterospérmicas.
Para la congelación se siguió la metodología de INTRODUCCIÓN
Westendorf. Los mejores resultados en este
trabajo se obtienen a los tres días de almacena Uno de los puntos críticos en el
miento, empleando una temperatura de descon proceso de la congelación es la tem
gelación de 42°C, y aunque la temperatura de peratura de descongelación (Eriksson
50°C ofrece unos resultados ligeramente inferio y Rodríguez Martínez, 2000), aunque
res a la anterior, la diferencia no es estadística también se debe tener en cuenta la
mente significativa. influencia del tiempo de criocon
servación (Valdelvira et al. , 2001) y la
fuerte influencia del individuo (Schilling
SUMMARY
et al., 1986). Así, una vía de trabajo
para disminuir esta influencia es la de
In this work has been studied how the
utilizar dosis heterospérmicas, que ofre
cryopreservation and the thawing temperature
cen buenos resultados en dosis refri
affect the seminal quality. A total of 15
geradas (Hammit et al., 1989).heterospermic seminal doses were used, and
El ánimo del presente estudio halater frozen following Westendorf's methodology.
sido determinar la influencia del tiem Best results were obtained by three storage
po de crioconservación y de la tem days, employing a thawing temperature of 42°C.
Although temperature of 50°C displays some peratura de descongelación sobre do
Arch. Zootec. 52: 81 84. 2003.GOSÁLVEZ, VIDAL, VALDELVIRA Y BABOT
sis heterospérmicas. Además, quería días, empleándose tres temperaturas y
mos estudiar la respuesta a la congela tres tiempos distintos de descongela
ción de dosis comerciales de I.A., bajoción: 22°C y 40 seg, 42°C y 20 seg y
condiciones extremas, para discutir la 50°C y 10 seg. Se estudiaron variables
metodología de funcionamiento de de movilidad (p.100 de formas activas)
nuestro laboratorio, con miras a poder y morfología del acrosoma (acrosomas
trabajar en serie. Lo que nos ha condu normales o NAR, acrosomas lesiona
cido a trabajar con dosis relativamente dos, espermatozoides que lo están per
viejas y algo alteradas en el momento diendo y espermatozoides sin acroso
de iniciar el proceso de congelación. ma), según Pursel et al. (1972).
El estudio estadístico se ha realiza
do mediante el procedimiento glm del
MATERIAL Y MÉTODOS programa estadístico SAS, con un
modelo de efectos fijos.
Se han estudiado un total de 15
dosis heterospérmicas de 80 ml, pro
cedentes de machos de cerdo blanco RESULTADOS Y DISCUSIÓN
adultos alojados en un centro de I.A.
Las dosis se mantuvieron a 15°C, y a En la tabla I se observa que la
las 24 horas de su elaboración mostra mayor movilidad total, en valores me
ban unos valores medios de movilidad dios, se produce a temperaturas de
total y de NAR de 80 p.100 y 72 p.100, descongelación de 42°C (28,8 p.100
respectivamente, valores un poco ba ±1,2) aunque sin diferencias significa
jos según Martín et al. (1996). tivas respecto a la de 50°C (26,7
Tras el periodo de estabilización p.100±1,1) por lo que ésta también
(24h), se observaba movilidad, calidad
del movimiento y concentración. A
continuación se procedía a la centrifu Tabla I. Valores medios de movilidad
gación a 1500 r.p.m. (250g) durante 10(p.100) de cada nivel de los factores: tiem
minutos, eliminando el sobrenadante y po de conservación y temperatura de des
quedando un sedimento de células (2,5 congelación (media ± SEM). (Average values
ml), al cual se le agregaban 2,5 ml delof motility (percent) related with the studied
primer crioprotector yema de huevo +variables, deep freezing storage time and thawing
lactosa. Tras esto, la temperatura de temperature (average±SEM)).
las muestras se reducía de 15°C a 5°C
días 22°C 42°C 50°Cen 1,5 horas y se les añadían 5 ml del
segundo crioprotector lactosa + yema
3 24,0±2,5 31,3±2,9 29,3±2,6 28,2±1,6de huevo + glicerol (4p.100) + OEP(1
10 23,3±2,3 25,3±3,0 26,0±2,1 24,8±1,4p.100) (Westendorf et al. , 1975). Las
30 24,0±2,1 27,3±1,5 26,0±1,6 25,8±1,0
muestras se envasaban en pajuelas
e d d24,1±1,1 28,8±1,2 26,7±1,1
plásticas de 0,5 ml, que se congelaban
en vapores de nitrógeno
Medias globales seguidas de letras distintas son
Las muestras se descongelaron en
estadísticamente diferentes, d, e, f, (p<0,01).
tres grupos, a los 3, a los 10 y a los 30
Archivos de zootecnia vol. 52, núm. 197, p. 82.CRIOCONSERVACIÓN Y CALIDAD SEMINAL
et al. (1987) encuentran que el tiempo
Tabla II. Valores medios de NAR de cada
de almacenamiento no afecta a la ca
nivel de los factores: tiempo de conserva
lidad seminal.
ción y temperatura de descongelación
En la tabla II vemos como el ma
(media±SEM). (Average values of NAR related
yor NAR se obtiene para las tempera
with the studied variables, deep freezing storage
turas de descongelación de 42°C y
time and thawing temperature (average±SEM)).
50°C, (p>0,05). Aparece como peor
temperatura de descongelación la de
días 22°C 42°C 50°C
22°C, con unos valores medios de NAR
d de (31,3 p.100±1,2) inferiores a los3 32,4±2,5 39,3±2,5 39,2±2,3 37,0±1,4
e hallados con las otras dos temperatu 10 28,5±2,5 32,0±2,2 31,7±2,2 30,7±1,3
e30 30,5±1,8 31,5±1,6 32,3±1,6 31,4±0,9 ras (p<0,01). Resultados que se ase
e d d31,3±1,2 36,2±1,2 36,2±1,2 mejan a los obtenidos por Ibrahim y
Kovacs (1982). La relación entre NAR
Medias globales seguidas de letras distintas son y tiempo de almacenamiento es similar
estadísticamente diferentes, d, e, f, (p<0,01). a la hallada para la movilidad,
obteniéndose para el día tres de alma
cenamiento el mejor NAR, con un va
podría ser aceptada como válida. lor de (37,0 p.100±1,4). No se aprecian
Córdova et al. , (1999), descongelando diferencias estadísticas respecto a los
a 42°C pajuelas de 0,5 ml, obtuvo re 10 y 30 días (30,7 p.100±1,3 vs 31,4
sultados superiores a los nuestros, pero p.100±0,9), sin embargo estas diferen
utilizando semen con mejor calidad ini cias sí que aparecen al comparar los
cial. Por otra parte la temperatura de días 3 y 10 (p<0,01) y los días 3 y 30
55°C es usada con éxito por Thilmant,(p<0,01). Estos resultados parecen in
(1998) en este tipo de pajuelas. De dicar que la mayor cantidad de lesio
nuestros resultados se descarta la tem nes acrosomales se producen en los 10
peratura de 22°C por sus bajos valoresprimeros días de almacenamiento,
de movilidad (24,1 p.100±1,1). Los au momento a partir del cual la cantidad
tores recomiendan altas velocidades de espermatozoides que se lesiona es
de descongelación para obtener la menor. Esto puede ser debido a que en
mejor calidad seminal (Eriksson y ese período la crioconservación daña a
Rodríguez Martínez, 2000), afirmación los espermatozoides más sensibles al
que difiere de lo hallado por nosotros, choque térmico, que han sido previa
encontrando los mejores resultados a mente lesionados durante el proceso
una velocidad intermedia. En cuanto a de bajada de temperatura previo a la
la relación entre movilidad y tiempo decongelación, y que a partir del día 10
almacenamiento, la mejor movilidad se sólo se mantienen intactos los esper
obtiene para el día 3 de almacenamien matozoides más aptos para ser conge
to (28,2 p.100±1,6). La tendencia ob lados.
servada es que a medida que aumenta En suma, los valores medios resul
el tiempo de almacenamiento disminu tantes de la congelación han sido muy
ye la movilidad aunque sin significa bajos, posiblemente a causa de la es
ción estadística. Sin embargo, Almlid pecial metodología utilizada, ya que la
Archivos de zootecnia vol. 52, núm. 197, p. 83.G