Mélatonine Rythme de la Température Corporelle et

De
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Niveau: Supérieur

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i Mélatonine, Rythme de la Température Corporelle et Organisation de l'Hypothalamus et des Noyaux Suprachiasmatiques chez le Dromadaire (Camelus dromedarius) : Démonstration de l'Entraînement de l'Horloge Circadienne par la Photopériode et par la Température Ambiante. Soutenance le 23 novembre 2009 à la Faculté des Sciences-Université Abdelmalek Essaâdi, Tétouan-Maroc, devant la commission d'examen : Pr. Paul Pévet (DR CNRS, UDS, Strasbourg) Directeur de thèse Pr. Mohammed Errami (Professeur à l'UAE, Tétouan) Directeur de thèse Pr. Nouria Lakhdar-Ghazal (Professeur à l'UM5, Rabat) Directeur de thèse Pr. Marie-José Freund-Mercier (Professeur à l'UDS) Rapporteur Pr. Ali Ouarour (Professeur à l'UAE, Tétouan) Rapporteur Pr. Mohamed Ouassat (Professeur à l'IAV, Rabat) Rapporteur Pr. André Calas (Professeur à l'U-Bordeaux 2) Examinateur En vue de l'obtention du titre de DOCTEUR DE L'UNIVERSITE Discipline : Sciences du vivant, Spécialité : Neurosciences Par Khalid EL ALLALI Université Abdelmalek Essaâdi THÈSE Présentée à L'Université Abdelmalek Essaadi Faculté des Sciences, Tétouan, Maroc En cotutelle Avec L'Université de Strasbourg Faculté des Sciences de la Vie En collaboration et avec le soutien de l'Institut Agronomique et Vétérinaire Hassan II, Rabat, Maroc UDS : Université de Strasbourg, France UAE : Université Abdelmalek Essaâdi, Tétouan-Maroc UM5 : Université Mohammed V,

  • membre du collège doctoral

  • conseil précieux

  • laboratoire de neurobiologie des signaux intercellulaires de paris

  • abattoirs de dakhla - abattoirs de souk sebt

  • discussion scientifique


Publié le : dimanche 1 novembre 2009
Lecture(s) : 622
Source : scd-theses.u-strasbg.fr
Nombre de pages : 343
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THÈSE
Présentée à

L’Université Abdelmalek Essaadi Université Abdelmalek Essaâdi Faculté des Sciences, Tétouan, Maroc
En cotutelle
Avec L’Université de Strasbourg
Faculté des Sciences de la Vie
En collaboration et avec le soutien de l’Institut Agronomique
et Vétérinaire Hassan II, Rabat, Maroc






En vue de l’obtention du titre de
DOCTEUR DE L’UNIVERSITE

Discipline : Sciences du vivant, Spécialité : Neurosciences


Par Khalid EL ALLALI


Mélatonine, Rythme de la Température Corporelle et
Organisation de l'Hypothalamus et des Noyaux
Suprachiasmatiques chez le Dromadaire (Camelus dromedarius) :
Démonstration de l'Entraînement de l'Horloge Circadienne par la
Photopériode et par la Température Ambiante.


Soutenance le 23 novembre 2009 à la Faculté des Sciences-Université Abdelmalek
Essaâdi, Tétouan-Maroc, devant la commission d’examen :

Pr. Paul Pévet (DR CNRS, UDS, Strasbourg) Directeur de thèse
Pr. Mohammed Errami (Professeur à l'UAE, Tétouan) Directeuhèse
Pr. Nouria Lakhdar-Ghazal (Professeur à l'UM5, Rabat) Directeur de thèse
Pr. Marie-José Freund-Mercier (Professeur à l'UDS) Rapporteur
Pr. Ali Ouarour (Professeur à l'UAE, Tétouan) Rapporteur
Pr. Mohamed Ouassat (Professeur à l'IAV, Rabat) Rapporteur
Pr. André Calas (Professeur à l'U-Bordeaux 2) Examinateur

UDS : Université de Strasbourg, France
UAE : Université Abdelmalek Essaâdi, Tétouan-Maroc
UM5 : Université Mohammed V, Agdal Ri abat-Maroc
IAV : Institut Agronomique et Vétérinaire Hassan II, Rabat-Maroc
U-Bordeaux 2 : Université Bordeaux 2, France











Khalid El Allali est membre du Collège Doctoral Européen de l’Université
de Strasbourg depuis 2008, promotion ‘’Rosa Parks’’. A ce titre, Il a bénéficié
des supports financiers spécifiques offerts par le Collège et a pu utiliser
les facilités offertes par la structure. En plus de ses activités scientifiques,
il a ainsi pu suivre des exposés spécifiques sur la politique et les priorités
européennes pour le développement, par les meilleurs experts internationaux.

i



































Les travaux présentés dans ce mémoire ont été effectués au sein des laboratoires et institutions
suivantes :
- Département de Neurobiologie des Rythmes de l’Institut de Neurosciences Cellulaire et Intégrative,
Université de Strasbourg, France.
- Laboratoire de Neurobiologie des Signaux Intercellulaires, Université Pierre et Marie Curie Jussieu-
Paris, France.
- Unité d’Anatomie Comparée, Institut Agronomique et Vétérinaire Hassan II, Rabat Maroc,
- Laboratoire de Biologie et Santé, Département de Biologie de la Faculté des Sciences de l’Université
Abdelmalek Essaâdi de Tétouan, Maroc.
- Groupe de Recherche sur les Rythmes Biologiques et Environnement, Faculté des Sciences de Rabat-
Université Mohamed V, Maroc).
Certaines expérimentations animales ont eu lieu dans les organismes suivants :
- Les étables de l’unité de Physiologie Animale, Institut Agronomique et Vétérinaire Hassan II, Rabat
Maroc,
- Station de la recherche sur les camelins, Direction Provinciale de l’Agriculture, Lâayoune-Maroc.
- Centre d’Insémination Artificielle Ain Jamaa, Ministère de l’Agriculture et du Développement Rural.
Les prélèvements des cerveaux de dromadaires ont été effectués avec l’aide et le concours des Services
Vétérinaires civils et militaires des abattoirs suivants :
- Abattoirs de Dakhla
- Abattoirs de Souk sebt Témara
Ce travail de thèse à été financé par :
- Le Projet Recherches en Agronomie et Développement : PRAD 05-10 de 2003-2006 et PRAD 03-07
de 2007 à 2010, soutenu par le Ministère de l’Agriculture au Maroc et le Ministère des Affaires
Etrangères de France.
- Le Projet de Recherche et Formation intégrées, soutenu par l’Institut Agronomique et Vétérinaire
Hassan II de Rabat, Maroc 2003-2006.
- Le Projet Fédérateur de Recherche et Dévidement, PROFERD de 2006-2009.
- La bourse Doctorale de la Coopération technique Belge à Rabat en 2003 et 2007.
i
REMERCIEMENTS
Je tiens à remercier chaleureusement Dr. Mireille Masson-Pévet, Directrice
du laboratoire de Neurobiologie des Rythmes à Strasbourg, de m'avoir accueilli
dans ce laboratoire pendant ces longues années. Son soutien constant, les discussions
scientifiques et le contact humain chaleureux m’ont été d’une grande utilité.
Mes vifs remerciements vont également au Dr. Valérie Simonneaux qui, en prenant
la relève de la direction du laboratoire, m’a aimablement facilité la tâche en m’accueillant
dans ce même laboratoire. Un grand merci pour les discussions scientifiques, l’encadrement
technique durant le travail que nous avons mené ensemble sur l’Aa-nat et pour le contact
humain facile et très chaleureux.

A Mr. LE DOCTEUR PAUL PEVET (DR CNRS, UDS, Strasbourg)
Que dire !!!! Tout a commencé par un simple courriel envoyé en février 2003 portant une
proposition de thématique de recherche pour un éventuel encadrement de thèse.
J’ai accueilli votre accord avec joie et satisfaction de telle sorte que malgré les difficultés
et les entraves qui s’en sont suivies, nous voilà arrivés au bout. Cher Professeur,
comme je vous ai toujours appelé, vous avez toujours su me guider par vos précieux conseils
et m’inculquer le sens de la recherche scientifique. Je voudrais vous exprimer tous mes
sincères remerciements pour vos encouragements incessants et vos conseils précieux.
Merci également, cher Professeur, d’avoir su trouver du temps pour suivre de loin
(de France), mais en réalité de tout près, mes travaux au Maroc, mon encadrement
scientifique et ce malgré vos multiples occupations. Veuillez trouver ici l’expression
de mes sincères remerciements, de ma reconnaissance ainsi que l’expression de toute mon
admiration pour vos qualités professionnelles et humaines et le témoignage de ma très
haute considération.

Je tiens à remercier et à exprimer ma profonde gratitude à ma directrice de thèse,
Pr. Nouria Lakhdar-Ghazal (Professeur { l'UM5, Rabat) pour tout l’effort que vous avez
fourni pour la réalisation de ce travail, pour votre disponibilité et l’aide que vous m’avez
apporté. Vous avez d’abord dirigé et défendu mon travail de DESS, vous m’avez facilité
l’intégration administrative et scientifique au niveau de la Faculté des Sciences de Rabat.
Par la suite vous m’avez donné progressivement des responsabilités (enseignement DESA,
participation aux congrès, travail associatif …), pour cette confiance, votre soutien et pour
vos qualités humaines je vous en sais gré. Merci Nouria !

Au Pr. Mohammed Errami (Professeur à l'UAE, Tétouan), Mon directeur de Thèse
à Tétouan : Vous m’avez accueilli dans votre UFR et laboratoire, merci d’avoir eu confiance
en moi et dans mon travail, vous avez été toujours présent et malgré l’éloignement vous
m’avez toujours aidé et facilité les tâches. Merci pour tout le travail que vous avez fourni
pour la réalisation de cette Thèse. Je tiens également à vous remercier pour vos qualités
humaines et pour votre accueil toujours chaleureux ; merci Si Errami !

Mes vifs remerciements vont aux Pr. Marie-José Freund-Mercier (Professeur à l'UDS),
Pr. Ali Ouarour (Professeur à l'UAE, Tétouan) et Pr. Mohamed Ouassat (Professeur à l'IAV,
Rabat) qui ont eu l’obligeance de s’intéresser { ce travail et de prendre la peine de le juger et
de nous avoir fait l’honneur de siéger parmi cette commission de thèse. Hommage
respectueux.

Pr. André Calas (Professeur à l'U-Bordeaux 2), vous avez d’abord accepté de m’accueillir
dans votre laboratoire de Neurobiologie des Signaux Intercellulaires de l’université Pierre
et Marie Curie de Paris. Monsieur le Professeur, tout ce grand chapitre sur l’hypothalamus
c’est grâce { vous que je l’ai réalisé. Vous m’avez d’abord appris la technique, la paillasse
en immunofluorescence. Vous m’avez appris l’anatomie de l’hypothalamus, l’approche
ii
expérimentale et scientifique pour l’interprétation de mes résultats et malgré les conditions
difficiles parfois rencontrées, vous avez pu me rendre la tache facile par votre présence
continue. Et comment se focaliser sur le technique et le scientifique et oublier vos qualités
humaines, votre soutien, votre accueil toujours chaleureux …. Pour tout cela, pour avoir eu
l’honneur de travailler avec vous et pour avoir accepté de faire partie de ce jury, Veuillez
trouver l’expression de ma sincère gratitude.

En France :
Je pense particulièrement à remercier Dr. André Malan pour ses conseils pédagogiques,
pour sa disponibilité et son aide précieuse en analyse des données et les statistiques.
Nos discussions scientifiques ont été pour moi une source d’inspiration.

Dr. Vivien-Roels, vous avez été la première personne avec qui j’ai travaillé « à la paillasse »
au laboratoire de Strasbourg. Malgré les problèmes de dosage, et ‘’la poisse’’ qui me suivait
nous avons pu réaliser un très bon travail, je vous en sais gré. Malgré votre départ en retraite
vous avez continué à suivre mon travail, à demander de mes nouvelles, pour vos qualités
humaines incomparables, merci Berthe !

Dr. Béatrice Bothorel, Vous êtes associée aux grands chapitres de ce travail, votre
participation a été d’une grande aide, merci pour le dosage, la régression non linéaire,
les corrections…Après le Départ de Berthe j’ai trouvé en vous mon repère dans le nouveau
laboratoire, pour votre énergie et pour les moments que nous avons partagés pendant ce
long parcours je vous réserve une grande estime et un grand Merci Béatrice.

Je tiens également, à remercier Christiane Calgari qui a beaucoup aidé au dosage
de la mélatonine et proteines, d’ailleurs, toujours fait avec bonne humeur, merci Christiane
pour l’aide et ton contact humain chaleureux !

Mes remerciements vont également à Natalia Sinitskaya qui m’a appris le dosage
des protéines, la western-blot et qui en plus a participé activement à mon travail
sur l’Aa-nat.

Je voudrais également remercier Dominique Ciocca de m’avoir initié { la technique
des Ibutton et pour les multiples discussions scientifiques enrichissantes.

Je pense particulièrement { certaines personnes qui, { un moment donné, m’ont aidé et qui
peut être sans le savoir ont participé activement à ce travail par les discussions et le contact
humain que j’ai trouvé auprès d’eux : Un grand merci à Michel Saboureau pour ses conseils
et son soutien, merci Michel. Merci également à Etienne Challet, Jorge Mendoza et Patrick
Vuillez pour les discussions scientifiques et les remarques constructives.

Un grand merci à Johann Egginger, Caroline Parmentier et Hélène Hardin-pouzet pour
leur aide précieuse.

Merci aux anciens doctorants du laboratoire, je pense particulièrement à Mohammed
Lahmam, Zeina Malek, Florent Revel, Laurent Tritschler, Céline Feillet, Laurence
Agez….et Bon courage et bonne chance aux futurs doctorants et là je pense particulièrement
à : Laura, Ouafa, Matei et Jeff….

Merci à Dominique Streicher et Fafa Gheddab, pour votre disponibilité !

Merci enfin à tous les membres du Département de Neurobiologie des Rythmes
à Strasbourg et du Laboratoire de Neurobiologie des Signaux Intercellulaires de Paris
que j’ai peut être omis de citer et qui ont participé de près ou de loin { l’élaboration de ce
travail.
iii


Au Maroc :
Comment ne pas remercier mon Collègue, le Professeur Vétérinaire. Mohamed Rachid
Achaaban, qui m’a pris en main et qui m’a orienté vers la thématique des Rythmes
Biologiques et de la Mélatonine. Vous m’avez surpris par votre endurance sur le terrain tout
le long des expérimentations sur le Dromadaire, les prélèvements sanguins en série…pour
avoir toujours trouvé les solutions aux problèmes techniques et pour avoir participé de près
et très activement à ce travail, merci Rachid !

A Mon collègue Docteur vétérinaire, Mohamed Piro (enseignant-chercheur), vous avez
répondu présent { chaque fois que j’ai fait appel { vous, vous avez participé { la chirurgie
pour l’implantation des Ibuttons. Souvent vous avez fourni le matériel nécessaire et répondu
présent pour les urgences médicales des chamelles… pour votre aide précieuse et vos
qualités humaines, merci Mohamed !

Mes remerciements vont au Docteur Vétérinaire, Mourad El Allouchi, qui sans lui,
une grande partie de cette thèse ne pouvait être réalisé, vous avez su me faire profiter de
votre influence professionnelle dans votre zone d’action, merci pour avoir tout organisé
pour rendre possible tous ces prélèvements d’hypothalamus et de pinéale, ainsi que pour
les premiers essais avec les Ibuttons, pour avoir pu autoriser un abattage de dromadaire la
nuit { l’abattoir municipal et pleins d’actions…..pour votre aide, votre soutien.. Tu as été d’un
grand secours Mourad ! Merci !

Comment ne pas remercier notre jeune stagiaire { l’Unité d’Anatomie Comparée
Docteur Vétérinaire Hanan Bouaouda dont l’aide a été précieuse pour certaines
expérimentations et pour l’organisation du document de la thèse, Merci Hanan Tu as été toi
aussi d’un grand secours!

Je pense particulièrement à certaines personnes qui m’ont beaucoup aidé pour la réalisation
de ce travail de Thèse: Professeurs Vétérinaires, Mohamed oukessou, Ahmed Ouhsine,
Noursaid Tligui, Mohamed Bengoumi…

A la Direction de l’Institut Agronomique et Vétérinaire Hassan II, qui a soutenu ce travail
notamment l’ancien Directeur Pr Fouad Guessous et par la suite l’actuel Directeur,
le Pr. Mohamed Sadiki et { tous les collègues professeurs de la filière vétérinaire de l’IAV
Hassan II qui m’ont apporté de loin ou de près de l’aide, veuillez trouver dans ces quelques
mots ma profonde gratitude.

Grands remerciements aux vétérinaires des services du Ministère d’Agriculture, au niveau
de la DPA de Laayoune et de Dakhla ainsi que pour ceux qui sont aux abattoirs de Témara
et de Rabat et au Centre d’Insémination de Ain Jamaa, mes vifs remerciements également
pour : Mr. Mohcine Hadaoui, Dr.Lahcen Boukbir, Dr. Hakim Chaaibi, Dr. Belakhal,
Dr J. Malik, Dr. Aziz Marhaban…

Mes remerciements vont au personnel de l’Unité d’Anatomie Comparée de l’IAV Hassan II
de Rabat : l’Animalier (chamelier !) Mohamed Essaady et aux techniciens Hassan
Mounakhil et Lahsen Rguig ainsi que pour notre secrétaire Saadia Chichi et notre femme
de ménage Amina Bouguern. Mes remerciements vont également au personnel des services
des projets, de comptabilité et des bons de commandes de l’IAV Hassan II, qui ont assuré
le bon fonctionnement des projets de financement de cette thèse.

Mes remerciements vont à tous ceux qui ont aidé { la réalisation de ce travail et que j’ai
oublié de citer.
iv

LISTE DES PUBLICATIONS
EN RELATION AVEC LE TRAVAIL DE THESE
ARTICLES Publiés Dans Un Journal à Comité De Lecture
K. El Allali, M.R. Achaaban, B. Vivien-Roels, B. Bothorel, N.S. Tligui and P. Pévet (2005).
Seasonal Variations in Nycthemeral Rhythm of Plasma Melatonin in the camel (Camelus
dromedarius). Journal of Pineal Research; 39: 121-128. Erratum J. pineal Res. 2006: 40:194
(voir annexe).
K. El Allali, Sinitskaya Natalia, Bothorel Béatrice, Rachid Achaaban, Pévet Paul, Simonneaux
Valérie (2008). Daily Aa-nat gene expression in the camel (Camelus dromedaries) pineal gland.
Chronobiology International, 25(5): 800–807 (voir annexe).
COMMUNICATIONS ORALES
K. El Allali. Pineal gland, melatonin and adaptation to the photoperiodic environment in the camel
(camelus dromedarius). Communication orale, Workshop on 'Chronobiology in Africa’.
Johansbourg, Republic of South Africa, April 2005.
K. El Allali, M.R. Achaaban, M. Piro, J.-G. Egginger, C. Parmentier, P. Pévet et A. Calas (2006).
Immunohistochemical cartography of different neuropeptides in the hypothalamus of the camel
(Camelus dromedarius). First conference of the International Society of Camelids Research and
Development (ISOCARD) Al-Ain, United Arab Emirates Avril, 16 – 18, 2006.
Achaaban MR., El Allali K., Vivien-Roels B., Bothorel B., Tligui NS. And Pévet P (2006). Seasonal
plasma melatonin profiles in the camel (Camelus dromedarius). The international Scientific
Conference on Camels Qassim city, Kingdom of Saudi Arabia.
POSTERS
K. EL Allali, M.R. Achaaban et P. Pévet. Rythme journalier de la température rectale
chez le dromadaire (Camelus dromedarius). Communivcation écrite au XXéme Edition du Congrès
Vétérinaire Maghrébin. Fès, Mai 2003.
K. El Allali, M.R. Achaâban, B. Vivien-Roels, B. Bothorel et P. Pévet. Variations saisonnières
du rythme nycthéméral des concentrations de mélatonine plasmatique chez le dromadaire
ème
(Camelus dromedarius). 36 Congrès de la Société Francophone de Chronobiologie, Rennes- France,
Mai 2004
K. El Allali, M.R. Achaâban, A. Malan et P. Pévet. Démonstration de la nature endogène
du rythme de la température corporelle chez le dromadaire (Camelus dromedarius).
Communication écrite. Réunion PRAD, ENA Meknes- Mai 2004.
K. El Allali, M.R. Achaaban, M. Piro, J.-G. Egginger, C. Parmentier, P. Pévet et A. Calas.
Cartographie immunohistochimique de neuropeptides dans l’hypothalamus du dromadaire
(Camelus dromedarius). 23ème Congrès Vétérinaire Maghrébin. 14-15 April 2006. Hammamet Tunisie.
K. El Allali, M.R. Achaâban, B. Vivien-Roels, B. Bothorel et P. Pévet. Variations saisonnières
du rythme nycthéméral des concentrations de mélatonine plasmatique chez le dromadaire
ère
(Camelus dromedarius). Communication écrite. 1 Réunion Scientifique du Groupement
de Recherche International de Neurosciences (GDRI) France- Maroc, 29-30 novembre 2007. Rabat
Maroc.
El Allali K, Achaaban M R, Piro M, Bothorel B, Lakhdar-Ghazal N, Errami M, Calas A and Pévet P.
(2009). Histological organization and distribution of neuropeptides in the suprachiasmatic nucleus
of the camel (Camelus dromedarius). XI Congress of the European Biological Rhythms Society
(EBRS), 22-28 Août, Strasbourg, France
v
TABLE DES MATIERES
REMERCIEMENTS ......................................................................................................................................................... ii
LISTE DES PUBLICATIONS ................. …………………………………………………………………………………………………………………………v
TABLE DES MATIERES .................. ………..1
LISTE DES TABLEAUX ......... ………………….6
LISTE DES FIGURES ................. …………....7
LISTE DES ABREVIATIONS ................. ……………………………………………………………………………………………………………………...12
INTRODUCTION ........... …………………………………………………………………………………………………………………….16
I. LES NOYAUX SUPRACHIASMATIQUES DE L’HYPOTHALAMUS : HORLOGE CIRCADIENNE PRINCIPALE ..................... 17
1. Genèse des oscillations circadiennes dans les SCN ................................................................................................ 17
2.Neuroanatomie et fonctionnement des SCN .......... 19
3. La synchronisation à 24 h de l’horloge circadienne 23
3.1. Synchroniseur photique ...................................................................................................................................... 25
3.2.Synchronisateurs non-photiques ......................... 26
4. Les sorties nerveuses et endocrines de l’horloge et la distribution des signaux circadiens ... 28
II. LA GLANDE PINEALE ET LE ROLE SPECIFIQUE DE LA MELATONINE ........................................................................ 32
1.La glande pinéale .................................................................................... 32
2. La Mélatonine ........................................................................................ 33
2.1. Synthèse et production ....................................................................................................................................... 34
2.2.Rôle physiologiques.............. 35
2.2.1. MEL et rythmes circadiens ............................... 36
2.2.2.MEL et rythmes saisonniers .............................................................................................................................. 38
2.3. Sites et mécanismes d’action 39
2.3.1. Récepteurs ....................................................... 39
2.3.2.Autres modes d’action ...................................................................................................................................... 42
III. PARS TUBERALIS, MELATONINE ET REPONSE PHOTOPERIODIQUE ....... 43
1.Morphologie et anatomie fonctionnelle de la Pars Tuberalis .................................................................................. 43
2.Les récepteurs de la Mélatonine dans la Pars Tuberalis .......................... 44
3. La Pars Tuberalis : Horloge ? Circadienne et/ou Saisonnière ? ............. 45
IV. L'HYPOTHALAMUS : ORGANE CIBLE ET ACTEUR DU CONTROLE PHOTOPERIODIQUE .......................................... 46
1.L'Hypothalamus antérieur ....................................................................................................... 48
1.1.Noyau suprachiasmatique .... 48
1.2.Noyau supra-optique ........................................... 48
1.3. Noyau paraventriculaire ...................................................................................................... 50
2. L'Hypothalamus Médiobasal .................................. 52
2.1. Noyau arqué ........................................................................................................................................................ 52
2.2. Noyau ventromédian........... 54
2.3. Noyau dorsomédian ............................................................................................................................................ 54
3. Les autres noyaux et subdivisions de l’hypothalamus ............................................................................................ 56
3.1. Noyaux et Aire préoptiques................................................................. 56
3.2.Noyaux de la subdivision hypothalamique postérieure ....................... 57
OBJET DU TRAVAIL ............................................................................................................. 59
MATERIEL & METHODES .... 65
I.ANIMAUX ................................................................................................. 66
II.ETUDE DU RYTHME DE LA TEMPERATURE CORPORELLE ......................................................................................... 66
1. Capteur électronique de la température : Ibutton . 67
1
1.1.Descriptif .............................................................................................................................................................. 67
1.2.Programmation des capteurs ............................... 67
1.3.Choix du site d'implantation du capteur électronique ......................... 68
1.4.Chirurgie ................................................................................................................................ 68
2.Étable à contrôle photopériodique et thermique ................................... 69
III.DECEREBRATION ET PRELEVEMENTS DES CERVEAUX ............................ 69
IV.PRELEVEMENTS SANGUINS .................................................................................................... 70
V. DOSAGE RADIOIMMUNOLOGIQUE DE LA MELATONINE........................ 70
1.Principe ................................................................... 70
2.Protocole ................................................................................................. 71
3.Validation du dosage chez le Dromadaire ............................................... 72
VI. HYBRIDATION IN SITU ........................................................................................................... 72
1.Principe ................................................................... 72
2.Protocole ................................................................................................. 73
VII.HISTOLOGIE CLASSIQUE ........ 75
1.Principe ................................................................... 75
2.Coloration de Nissl .................................................................................................................................................. 75
3.Technique 75
VIII.IMMUNOFLUORESCENCE ..................................................................................................................................... 77
1.Principe ................................... 77
2.Protocole . 78
2.1.Immunomarquage simple .................................................................................................................................... 78
2.2.Immunomarquage double.... 80
IX.DOSAGE DES PROTEINES PAR LA METHODE LOWRY .............................. 80
X.ANALYSES STATISTIQUES ......................................................................................................................................... 81
RESULTATS ............................................................................................................................................................ 82
Chapitre I : Anatomie de l’hypothalamus et distribution de certains neuropeptides .......................... 83
I. INTRODUCTION ....................................................................................................................................................... 83
II.PROTOCOLE EXPERIMENTAL ................................... 86
III.RESULTATS ............................. 87
1.Hypothalamus préoptique ...................................................................................................... 95
1.1.Description anatomique ....................................... 95
1.1.1.Aires préoptiques .............. 95
1.1.2.Noyaux préoptiques .......................................................................................................... 95
1.1.3.Autres Noyaux ................................................... 95
1.2.Contenu en neurones peptidergiques .................. 96
2.Hypothalamus antérieur ......................................................................................................................................... 99
2.1.Noyaux suprachiasmatiques 99
2.1.1.Description anatomique .... 99
2.1.2.Contenu en neuropeptides ............................................................................................................................. 100
2.2.Noyaux supra-optiques ...................................... 117
2.2.1.Description anatomique .. 117
2.2.2.Contenu neuropeptidergique .......................................................................................................................... 117
2.3.Noyaux paraventriculaires ................................. 126
2.3.1.Description anatomique .. 126
2.3.2.Contenu neuropeptidergique .......................................................................................................................... 127
3.Hypothalamus médiobasal ou tubéral .................. 137
3.1.Noyaux dorsomédians ........................................................................................................................................ 137
3.1.1.Description anatomique .. 137
2
3.1.2.Contenu neuropeptidergique .......................................................................................................................... 138
3.2.Noyaux ventromédians ...................................... 146
3.2.1.Description anatomique .. 146
3.2.2.Contenu neuropeptidergique .......................................................................................................................... 147
3.3.Noyau arqué ....................................................... 155
3.3.1.Description anatomique .................................. 155
3.3.2.Contenu neuropeptidergique .......................................................................................................................... 155
3.4.Noyau tubéral .................................................... 156
3.4.1.Description anatomique .................................. 156
3.4.2.Contenu neuropeptidergique .......................................................................................................................... 157
4.Hypothalamus postérieur ...... 166
4.1.Description anatomique ..................................................................................................................................... 166
4.1.1.Noyau pré-mamillaire dorsal ........................... 166
4.1.2.Noyau pré-mamillaire ventral ......................................................................................................................... 166
4.1.3.Pars caudalis du noyau tubéro-mamillaire ...................................... 166
4.1.4.Pars supra-mamillaire du noyau tubéro-mamillaire ........................ 167
4.1.5.Noyau mamillaire médian ............................................................................................................................... 167
4.1.6.Noyau mamillaire latéral ................................. 167
4.2.Contenu neuropeptidergique ............................. 167
IV.DISCUSSION ......................................................................................................................................................... 171
1.Anatomie ............................................................................................... 171
2.Contenu neuropeptidergique ................................ 175
2.1.Noyaux suprachiasmatiques .............................................................. 175
2.2.Noyaux paraventriculaires ................................................................. 182
2.3.Noyaux supraoptiques ....................................................................... 184
2.4.Hypothalamus médiobasal . 184
2.5.Organisation du système hypothalamo-neurohypophysaire ............................................. 187
2.6.Autres régions hypothalamiques........................................................................................ 190
2.6.1.Hypothalamus préoptique .............................................................. 190
2.6.2.Hypothalamus postérieur ................................ 191
2.6.3.Régions limitrophes de l’hypothalamus .......................................................................... 192
Chapitre II : Variations saisonnières du rythme de la mélatonine chez le Dromadaire ..................... 193
I.PROTOCOLE EXPERIMENTAL .................................................................................................................................. 193
1.Animaux ................................ 194
2.Prélèvements et conditions expérimentales ......... 194
2.1.Étude des variations saisonnières du profil plasmatique de la mélatonine ........................................................ 195
2.2.Étude de l'effet d'un créneau de lumière durant la nuit .................................................... 195
3.Analyses statistiques ............................................................................................................ 197
II.RESULTATS ............................................................................................................................ 198
III.DISCUSSION .......................................................... 204
Chapitre III : Expression journalière du gène Aa-nat dans la glande pinéale du Dromadaire ............ 207
I.PROTOCOLE EXPERIMENTAL .................................................................................................................................. 207
1.Animaux ................................ 207
2.Prélèvement des tissus .......... 208
3.Hybridation in situ ................................................................................................................................................. 208
4.Dosage de la mélatonine dans la glande pinéale... 209
5.Analyse statistique ................ 209
II.RESULTATS ET DISCUSSION ................................................................................................................................... 209

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