Ministère de l'Education Nationale

Estelle Festor

Description

Niveau: Supérieur

• mémoire

Ministère de l'Education Nationale Ecole Pratique des Hautes Etudes Section Sciences de la Vie et de la Terre Mémoire Présenté par Estelle FESTOR POUR L'OBTENTION DU DIPLÔME DE L'ECOLE PRATIQUE DES HAUTES ETUDES TITRE : ETUDE DES PROCESSUS DE CHIMIORÉSISTANCE DÉVELOPPÉS PAR LES CELLULES CANCÉREUSES COLIQUES HUMAINES : CARACTÉRISATION D'UN NOUVEAU GÈNE, REG IV. Soutenu le 2 Octobre 2001 DEVANT LE JURY COMPOSÉ DE : Mme Geneviève CORDIER PRESIDENTE MR Jean CHAMBAZ (jean.chambaz-u505@ bhdc.jussieu.fr) RAPPORTEUR MME Nicole PORCHET EXAMINATEUR MME Thécla LESUFFLEUR () EXAMINATEUR LABORATOIRE EPHE DE PHARMACOLOGIE CELLULAIRE ET MOLÉCULAIRE DIRECTEUR : PR J. CHAMBAZ 15, Rue de l'Ecole de Médecine 75006 PARIS Résumé Les cancers colorectaux, deuxième cause de mortalité par cancer en France, présentent un fort potentiel de résistance aux agents anti-cancéreux. En comparant par la technique de differential display l'expression des gènes dans des cellules tumorales coliques résistantes aux agents anticancéreux par rapport aux cellules sensibles, il a été identifié plusieurs gènes d'intérêt potentiellement impliqués dans des voies de chimiorésistance de ces cellules. L'objectif de mon travail a été de caractériser l'un de ces gènes fortement sur-exprimé dans ces cellules tumorales coliques résistantes.

• colique


• syndromes de prédisposition héréditaire


• cancer colorectal


• famille


• gène suppresseur de tumeur apc


• maladies prédisposant au cancer colorectal


• tcf de gènes


• cellule épithéliale


• laboratoire ephe de pharmacologie cellulaire


• migration de la cellule épithéliale

Sujets

• Mémoire
• Colique
• Cancer du côlon

Informations

• Publié par: chaeh
• Publié le: 01 octobre 2001
• Nombre de lectures: 41
• Langue: Français

Extrait

Mémoire

Présenté par

Estelle FESTOR

Ministère de l'Education Nationale   Ecole Pratique des Hautes Etudes Section Sciences de la Vie et de la Terre         POUR   L 'O BTENTION   DU D IPLÔME   DE   L 'E COLE P RATIQUE   DES H AUTES E TUDES   T ITRE : E TUDE   DES P ROCESSUS DE C INCSÉTSAOREMIHI D ÉVELOPPÉS   PAR   LES C ELLULES C ANCÉREUSES C OLIQUES H UMAINES : C ÉRCTRAANIOATIS   D ' UN N OUVEAU G ÈNE ,R EG IV.   Soutenu le 2 Octobre 2001   D EVANT   LE J URY   COMPOSÉ   DE : Mme Geneviève C ORDIER  P RESIDENTE M R  Jean C HAMBAZ  R(jean.chambaz-u505@ bhdc.jussieu.fr) APPORTEUR M ME  Nicole P ORCHET  E XAMINATEUR M ME  Thécla L ESUFFLEUR  E ([e-mail]) XAMINATEUR   L ABORATOIRE  EPHE DE  P HARMACOLOGIE  C ERIALULLE   ET M OLÉCULAIRE D EUCTREIR : P R  J. C HAMBAZ 15, Rue de l'Ecole de Médecine 75006 PARIS

  Résumé

   Les cancers colorectaux, deuxième cause de mortalité par cancer en France, présentent un fort potentiel de résistance aux agents anti-cancéreux. En comparant par la technique de differential display l'expression des gènes dans des cellules tumorales coliques résistantes aux agents anticancéreux par rapport aux cellules sensibles, il a été identifié plusieurs gènes d'intérêt potentiellement impliqués dans des voies de chimiorésistance de ces cellules. L'objectif de mon travail a été de caractériser l'un de ces gènes fortement sur-exprimé dans ces cellules tumorales coliques résistantes.  La première étape de cette étude a été de cloner l'ARNm complet de 1142 nucléotides. Le

gène localisé sur le chromosome 1 code une protéine de 18 kDa, très récemment identifiée comme étant Reg IV, une protéine de régénération de type IV dans la famille des protéines Reg. Les séquences nucléotidique et protéique de Reg IV présente une plus forte homologie de séquence avec son homologue chez la Souris qu'avec les trois autres gènes Reg de la famille. Ceci témoigne de l'existence d'un gène ancestral, qui s'est dupliqué et qui a subi des divergences au cours de l'évolution. Nous avons montré que cette protéine Reg IV possédait un peptide signal fonctionnel et un domaine de reconnaissance des carbohydrates calcium dépendant (CRD) de type C-lectine, suggérant un rôle dans l'adhésion cellulaire. Dans les tissus humains sains, l'expression de Reg IV est restreinte à l'intestin (fœtal et adulte) et au côlon et demeure très faible dans l'estomac. A l'aide de lignées cellulaires tumorales coliques différenciées, nous avons montré que l'expression de Reg IV est comparable dans les cellules de phénotype entérocytaire et mucosécréteur et ce, quelque soit leur phase de croissance. Comparativement à la muqueuse juxtatumorale, Reg IV est également sur- exprimé dans 65% des tumeurs colorectales étudiées. Des lignées tumorales d'origine pancréatique, ovarienne et hépatique, traitées ou non avec un agent anti-cancéreux ont été étudiées, mais aucune n'exprime Reg IV. Les résultats obtenus suggèrent que Reg IV pourrait être impliqué dans une voie de résistance via l'adhésion cellulaire ou une déficience en apoptose. Pour aborder l'étude de fonction de la protéine Reg IV, un anticorps à façon dirigé contre un peptide immunogénique de 15 acides aminés de la protéine a été fabriqué, et des transfections cellulaires ont été réalisées : ces outils nous permettront à l'avenir de confirmer le rôle de Reg IV dans la chimiorésistance des cellules tumorales coliques.   Mots clés : cancers colorectaux, 5-FU, Reg IV, chimiorésistance, adhésion.

SListe des abréviations   5-FU 5-Fluorouracile ADN Acide désoxyribonucléique ADNc Acide désoxyribonucléique complémentaire ADNg Acide désoxyribonucléique génomique AF Acide folinique APC Adenomatous polyposis coli ARN Acide ribonucléique ARNm Acide ribonucléique messager BET Bromure d’éthidium BP Boîte de Pétri BSA Sérum albumine bovine Ci Curie ClCs Chlorure de sodium cpm coups par minute CPT-11 Irinotécan DD Differential Display DL 50  létale 50 Dose DMSO Diméthyl sulfoxyde DO Densité optique DOSPA 2,3-dioleyloxy-N-[2(sperminecarboxamido)ethyl]-N,N-dimethyl-1-propanaminium