Blocage de maturation thymique et aberration des recombinaisons V(D)J : modèle des Leucémies Aigües Lymphoblastiques de la lignée T exprimant les onco-protéines à homéodomaines TLX1 et TLX3, Thymic maturation arrest and V(D)J illegitime recombinaison TLX1 and TLX3 positive Tcell acute Lymphoblastic leucemia model

Saida Dadi

Description

Sous la direction de Pierre Ferrier
Thèse soutenue le 07 avril 2010: Aix Marseille 2
Le blocage du processus de maturation est un élément central de l’oncogenèse des LAL-Tcomme en témoigne la forte corrélation observée entre le stade d’arrêt de maturation et le type d’oncogène dérégulé. Une meilleure compréhension des mécanismes moléculaires responsables de l’arrêt de différenciation est une piste de choix dans la recherche de thérapie« différenciante ». Les LAL-T qui expriment les oncogènes TLX1/HOX11 et TLX3/HOX11L2correspondent à des lymphoblastes T ayant arrêté leur développement au stade cortical « préalphabeta». A ce stade, les thymocytes expriment une chaine TCRβ mais n’expriment pas la protéine TCRα. Une analyse moléculaire du locus TCRα montre que ce dernier n’est pas réarrangé dans ces LAL-T. Notre hypothèse est que les oncoprotéines TLX1 et TLX3bloquent l’expression et le réarrangement du locus TCRα et ainsi sont directement impliqués dans l’arrêt de la différentiation au stade pré-αβ. La mise en route des réarrangements aulocus TCRα est sous le contrôle d’un élément de régulation de la transcription situé en 3’ dulocus : l’enhancer alpha (Eα) dont l’activation nécessite les facteurs de transcription ETS1,RUNX1 et LEF1. Nous avons montré que l’expression de TLX1/3 réprime l’activité transcriptionnelle de l’enhanceosome Eα, que cette répression est dépendante de l’homéodomaine et qu’elle est spécifique et dose dépendante. De plus, nous avons mis en évidence que cette répression exercée par TLX1/3 est possible par une interaction protéine/protéine mise en évidence par Co-IP avec ETS1. Nous avons montré par EMSA que ETS1recrute TLX1/3 au niveau de Eα et confirmé ces résultats in vivo par la technique de ChIP.Par ailleurs, par une approche fonctionnelle de ‘knockdown’, nous avons utilisé des lentivirus contenant des vecteurs shRNAs de TLX1 et TLX3 afin d’éteindre leur expression dans les lignées cellulaires LAL-T qui l’exprime (respectivement ALL-SIL et DND-41). Ces expériences nous ont permis d’observer qu’au sein de ces lignées LAL-T TLX+, la down-régulation des oncogènes TLX1/3 est accompagnée d’une réactivation de l’Eα, traduite par la présence d’expression de transcrits germinaux du TCRα. L’ensemble de nos résultats suggère que TLX1/3 sont impliqués dans l’inhibition du locus TCRα et, par conséquence dans l’arrêt de différenciation observé dans ces leucémies
-Lal-t
-Leucémie
-Tlx1
-Tlx3
-Ets-1
-TCR-alpha
-Lymphopoïèse
Acute lymphoblastic leukemias (ALL) are characterized by multi-step oncogenic processesleading to a cell differentiation arrest. Improved understanding of the underlying molecular mechanisms is a prerequisite for targeted therapeutic approaches. In T lineage ALLs, over expressionof the orphan homeobox factors, TLX1 or TLX3 is associated with a corticalthymic maturation arrest. We demonstrate that both TLX1 and TLX3 proteins interact withETS1, an essential component of the TCRα gene-enhanceosome, resulting in repression ofenhancer activity, blocked TCR-Jα rearrangement, and auto-extinction of clones with a TCRαenhancer driven TLX1-TCRδ chromosomal translocation. Our results identify novel functionsfor homeodomain proteins during T-cell development and imply that TLX1/3 exert an ETS1-dependent block to αβ T-cell maturation in T-ALLs, there fore representing promising targets for differentiation therapy
-T-all
-Tlx1
-Tlx3
-Ets1
-TCRalpha
-Ealpha
-Translocation
-T-lymphopoïesis
Source: http://www.theses.fr/2010AIX22029/document

Sujets

• Leucémie

Informations

• Publié par: Thesee
• Nombre de lectures: 235
• Langue: English
• Poids de l'ouvrage: 6 Mo

Extrait

UNIVERSITE DE LA MEDITERRANEE
AIX-MARSEILLE II

ECOLE DOCTORALE DES SCIENCES DE LA VIE ET DE LA SANTE



THESE

Pour l’obtention du grade de

DOCTEUR DE L’UNIVERSITE DE LA MEDITERRANEE

Spécialité : IMMUNOLOGIE


Présentée et soutenue publiquement par

Saïda DADI

Le 7 avril 2010

Blocage de maturation thymique
et aberration des recombinaisons V(D)J:
modèle des Leucémies Aiguës Lymphoblastiques de
la lignée T exprimant les onco-protéines à
homéodomaine TLX1 et TLX3


JURY :

Mr le Professeur Franck GALLAND Président du jury
Mr le Professeur Jean SOULIER Rapporteur
Mr le Docteur Jean Christophe BORIES Rapporteur
Mr le Docteur Pierre FERRIER Directeur de thèse
Mme le Docteur Dominique PAYET-BORNET Examinateur
Mme le Professeur Elizabeth MACINTYRE Examinateur CITATIONS


Le succès c’est d’aller d’échec en échec sans perdre son enthousiasme.
[Winston Churchill]






C’est ce que nous pensons déjà connaître qui nous empêche souvent d’apprendre.
[Claude Bernard]






L'expérimentateur qui ne sait pas ce qu'il cherche ne comprend pas ce qu'il trouve.
[Claude Bernard]






Est bon tout ce qui accroît la puissance. Est mauvais tout ce qui la diminue. Tout ce qui ne
me tue pas me fortifie. [Nietzsche]

2 REMERCIEMENTS

Je remercie sincèrement le Dr. Pierre Ferrier de m’avoir accueilli dans son
laboratoire, de m’avoir soutenue et d’avoir suivi mes travaux de thèse, tout en me laissant une
grande autonomie de travail et m’attribuant une grande confiance durant ces années.

Je remercie également les membres du jury d’avoir accepté de juger mon travail : Pr.
Jean Soulier et Dr. Jean-Christophe Bories d’être les rapporteurs de ma thèse ainsi que le
Pr. Franck Galland de présider mon jury.

Je tiens spécialement à exprimer toute ma gratitude au Dr. Dominique Payet-Bornet.
Domie, tu as été mon ange gardien. Je ne trouverais jamais les mots pour te dire à quel point
je te suis reconnaissante pour ton encadrement scientifique, pour ce don que tu as eu de me
transmettre ta passion et ton enthousiasme à toutes épreuves. Tu as été un véritable moteur
pour moi, à me remotiver sans cesse. Avec toi, les manips sont simples et ludiques, ce fut un
réel plaisir de travailler à tes côtés. Je souhaite à tous les étudiants de pouvoir être encadré par
une personne comme toi. Merci pour toutes ces discussions tellement enrichissantes, pour ton
sourire légendaire, ta bonne humeur permanente (quel est ton secret ?!) et surtout ta
confiance. Je t’adore Domie, MERCI MERCI MERCI pour tout.

Un grand merci très particulier au Dr.Vahid Asnafi. Tu m’as accueilli au sein du
laboratoire d’hématologie à Necker et tu m’as permis de vivre une sacrée aventure à la fois
scientifique et humaine. Grâce à ton implication personnelle, ce projet en collaboration a pu
se faire. Merci pour ta confiance tout au long de ces années, ces innombrables discussions
tellement enrichissantes pour la petite scientifique que j’étais. Merci pour ton imagination
débordante, ton enthousiasme permanent et ton professionnalisme. J’ai conscience d’avoir été
une privilégiée d’avoir bénéficié au quotidien d’un enseignement d’une qualité
exceptionnelle. Je me sens tellement riche aujourd’hui et c’est grâce à toi. MERCI Vahid pour
tout.

Je tiens à remercier tout particulièrement le Pr. Elizabeth Macintyre de m’avoir
accueilli au sein du laboratoire d’Hématologie de l’hôpital Necker. Merci Elizabeth pour avoir
toujours manifesté beaucoup d’intérêt à mon travail.

Un énorme merci à l’équipe PF, en particulier à Salvatore Spicuglia pour ta
gentillesse, ton aide si précieuse, ta joie de vivre et ton enthousiasme. Un grand merci à
Aleksandra, Marie, Larysa et Vanessa pour votre aide et votre gentillesse. Une mention très
spéciale à Touati et Pierre Cauchy pour votre aide si précieuse, votre gentillesse, et votre
disponibilité. Merci à Jean-Christophe, Fred, Romain, Christophe, Oliv’, Seb, Joaquin et
Don Marc…

Je remercie le personnel du CIML, en particulier Michel Pierres, l’homme aux
doigts de fée pour produire des AcM, Laurent Vanhille pour sa gentillesse, ses
conseils et son aide si précieuse, le service informatique, le personnel des animaleries
et le personnel administratif (en particulier Corinne Bezier-Guigues, merci pour ta
gentillesse et ton efficacité).

Je tiens à remercier particulièrement le labo d’hémato pour toute leur aide en
particulier Patrick, l’immuno (Marie-Claude, Yvette, Françoise, Anne-Sophie, Danielle,
Aurore W, Aurore, Naïma), la BM, la réception, Dominique Esnault, Fatiha et Valérie…
3 Une mention spéciale au Dr. Kheïra Beldjord, merci pour ton soutien, ta gentillesse et tes
précieux conseils. Un grand merci tout particulier à Coco Millien (mon ebayeuse préférée !).
Un énorme merci à mes copains de l’ASAR : Julie Bruneau (ma poule), Raouf (brotha !),
Ludo, Céline, Sandrine, Amélie et Etienne.

Je tiens à remercier Véronique Della-Valle pour ton aide si précieuse. Merci pour ta
gentillesse et ta bonne humeur permanente.

Merci à l’équipe Olivier Hermine, en particulier à Julie Vandekerckhove pour ton
aide si précieuse. Un grand merci à Emmanuelle Six pour tes conseils et ton aide, et au Dr
Sophie Ezine pour votre gentillesse et votre aide.

Je tiens à remercier Alice Carrier pour m’avoir donné envie de faire de la recherche
et de m’avoir encadrée durant les stages de M1 et M2 avec tellement de gentillesse. Merci
pour ton encadrement scientifique et pour la patience dont tu as fait preuve à mon égard.

Merci aux incroyables professeurs d’immunologie qui m’ont permis de découvrir
cette discipline tellement passionnante. Chacun de vos cours était un pur bonheur et
inoubliable. Merci aux Prs. Naquet, Vivier et Galland de m’avoir incité à suivre cette voie.

Un grand merci au Dr. Bertrand Nadel pour ton enthousiasme, la pertinence de tes
réflexions scientifiques et ta gentillesse.

Je crois que les mots n’existent pas Nacer pour te remercier suffisamment. On se suit
depuis 2001 et on ne s’est plus quitté. Tu m’as apporté un soutien hallucinant et tellement
déterminant. Je ne sais pas si j’y serais arrivée sans toi. En tout cas sûrement dans un autre
état. Merci pour tout tout tout mon ami. Quelle chance de t’avoir. Je t’adore.
Ah là là comment te remercier Fez pour tout ce que tu as fait pour moi. Merci à toi et
ma petite Sarah. Je vous aime tellement. Je ne saurais jamais comment vous remercier pour
votre acceuil à la maison, votre soutien, vous êtes des sacrés amis.
Ma petite Anne, je te remercie pour ton soutien. Tu as étais très importante durant ces
dernières années. Malgré la distance, je sais que tu es là et les discussions avec toi m’ont à
chaque fois permises de me remotiver. A nous NYC !!
Merci à Filou pour ta gentillesse extrême, ta patience, ton amitié, ta simplicité. Tu es
l’exemple vivant de ce qu’est la détermination. Bisous mon ami !
Un grand merci à vous Vincent et Carine pour votre soutien et votre amitié. Merci
pour ces délicieuses soirées passées en votre compagnie au cours desquelles on refait le
monde. Pourvu que ça dure !
Nacer, Vincent, Carine, Anne, Fez et Filou, quelle Dream Team !!! Les années
CIML sont inoubliables grâce à vous. Je vous kiffe mes potos !!!

Merci à tous mes amis : Sarra, Anneu, Julie, Ali, Leïla, Aouatef, Samra, Isa, Zouba,
Elyamine, Shérazade, Sofia, Leïla, Ali, Lobna, Noushine, Samir, Olfa G. et Olfa M.,
Rania, Sophie pour votre soutien et vos encouragements, pour tous ces moments de détente
tellement importants pour mon équilibre, pour toutes ces rigolades, toutes ces sorties. Je vous
kiffe mes copains.

Un grand merci à toute l’équipe du Comedy club les frères Debouzze, Delphine,
Harry, PAG, Serge, Laurent, Abdelos, Bams et les comédiens, pour ces moments que j’ai
4 passé à vos cotés. Vous m’avez aidé à me changer la tête et sortir de ma routine dans des
moments quelquefois difficiles. Je vous suis reconnaissante pour cela.

Vavaino, Yemaino, aqaknyewo di la’3maïno. Toi mon cher père et toi ma chère mère
qui êtes tous deux illettrés, vous qui avez émigrés en France