Identification d'espèces moléculaires de lysophosphatidylcholine présentant des activités adjuvantes en vue d'un développement clinique, Description of single lysophosphatidylcholine species with adjuvant features as candidates for clinical development

Guillaume Bach

Description

Sous la direction de Genevieve Inchauspe, Anne Fournillier, Vincent Lotteau
Thèse soutenue le 22 octobre 2009: Lyon 1
La découverte d’adjuvants de vaccination est en pleine expansion dans un contexte règlementaire de plus en plus strict. L’objectif de ce travail de thèse a été de proposer un adjuvant hautement caractérisé de la famille de la lysophosphatidylcholine (LPC) pour un développement clinique. Il avait été précédemment montré que la LPC d’oeuf de poule présentait des propriétés adjuvantes in vitro et in Vivo. Cependant, il s’agit d’un mélange hétérogène d’espèces moléculaires de LPC peu exploitable en clinique. Nous avons donc cherché à 1/ cribler in vitro 5 différentes espèces moléculaires de LPC ayant des activités adjuvantes, et 2/ évaluer chez la souris l’aptitude des molécules sélectionnées à induire des réponses humorales et cellulaires.Deux candidats, les LPC C16 :0 et C18 :0, induisent in vitro la maturation de cellules dendritiques humaines caractérisée par l’augmentation de l’expression des marqueurs de surface, la production de chimiokines pro-Th1 et l’engagement vers un profil Th1 de lymphocytes T CD4+. Chez la souris, l’injection i. v. des candidats induit une réponse inflammatoire transitoire et modérée au profil Th2 (IL-5, IL-6). De plus, ces espèces induisen une réponse humorale spécifique contre 3 antigènes viraux après injection s. c. ou i. m. (NS3du VHC, HBsAg du VHB et gp120 du VIH), proche de celle obtenue avec l’alun et à des doses faibles supposées non toxiques. Dans ces modèles, en revanche, les LPC individuelles ne semblent pas induire de réponses cellulaires spécifiques.L’ensemble de ces résultats ouvre d’intéressantes perspectives pour l’utilisation des LPC C16 :0 et C18 :0 en tant qu’adjuvants de vaccination de réponses immunitaires humorales.
-Adjuvant
-Lysophosphatidylcholine
-Vaccin
-Hépatite C
-Hépatite B
-Virus de l’immunodéficience acquise
-Développement clinique
The evaluation of new vaccine adjuvants is growing fast in a stringent regulatory environment. The aim of this thesis project was to propose a highly defined adjuvant derived from the lysophosphatidylcholine (LPC) for clinical development. It has been previously shown that an egg-derived LPC has in vitro and in Vivo adjuvant features. However, it is composed of a heterogeneous mixture of molecular species of LPC, thus precluding itsclinical evaluation. Therefore, we decided to 1/ screen in vitro 5 single species of LPC fortheir adjuvant properties, and 2/ evaluate in the mouse model the ability of selected compounds to induce humoral and cellular responses.Two candidates, the C16:0- and C18:0-LPC, induce in vitro maturation of human dendritic cells as defined by an up regulation of the expression of surface markers, production of pro-Th1 chemokines, and engagement of CD4+ T lymphocytes towards a Th1 profile. Inmice, i. v. injection of both candidates triggers a transient and moderate inflammatory response with a Th2 profile (IL-5, IL-6). In addition, these species initiate specific humoral responses against 3 viral antigens following s. c. or i. m. injection (NS3 from HCV, HBsAgfrom HBV and gp120 from HIV), close to what is achieved with alum and at low doses expected to be safe in humans. In these models, however, single LPC do not mediatespecific cellular responses. Over all, these results open interesting perspectives for the single
-Additive
-Vaccine
-Human Immunodeficiency Virus
-Hepatitis C
-Hepatitis B
-Clinical development
-Lysophosphatidylcholines
Source: http://www.theses.fr/2009LYO10181/document

Sujets

• Hépatite C
• Hépatite B

Informations

• Publié par: Thesee
• Nombre de lectures: 42
• Langue: Français
• Poids de l'ouvrage: 3 Mo

Extrait

N° d’ordre 181-2009 Année 2009



THESE DE L‘UNIVERSITE DE LYON

Délivrée par

L’UNIVERSITE CLAUDE BERNARD LYON 1



ECOLE DOCTORALE 340

BIOLOGIE MOLECULAIRE INTEGRATIVE ET CELLULAIRE



DIPLOME DE DOCTORAT

(arrêté du 7 août 2006)



soutenue publiquement le 22 octobre 2009

par

M BACH Guillaume



IDENTIFICATION D'ESPECES MOLECULAIRES DE
LYSOPHOSPHATIDYLCHOLINE PRESENTANT DES ACTIVITES ADJUVANTES EN
VUE D’UN DEVELOPPEMENT CLINIQUE



Directeurs de thèse : Dr INCHAUSPE Geneviève / Dr LOTTEAU Vincent


JURY :
Dr GUY Bruno (Rapporteur)
Dr MARCHE Patrice (Rapporteur)
Dr DELAIR Thierry (Examinateur)
Dr INCHAUSPE Geneviève (Directeur de thèse)
Dr FOURNILLIER Anne (Co-directeur de thèse)
Dr LOTTEAU Vincent (Directeur de thèse)
tel-00583087, version 1 - 4 Apr 2011SOMMAIRE

Abréviations...........................................................................................6
Etude Bibliographique...........................................................................8
I) Le système immunitaire humain : de la reconnaissance des
pathogènes à la protection physiologique .............................................9
A. Le système immunitaire inné..................................................................... 9
1. Reconnaissance .......................................................................................................... 9
a. Les récepteurs de type toll (TLR).................................................................................................................... 10
b. Les récepteurs de type non toll (non TLR)...................................................................................................... 13
c. Le système du complément ............................................................................................................................. 16
2. Développement de l’immunité innée ....................................................................... 17
3. Les cellules tueuses naturelles (Natural Killer, NK)................................................ 18
a. Description ...................................................................................................................................................... 18
b. Activités cytotoxiques des NK ........................................................................................................................ 19
4. Les cellules dendritiques (CD)................................................................................. 21
a. Les populations de cellules dendritiques ......................................................................................................... 21
b. La présentation des antigènes par les CD ........................................................................................................ 22
B. Le système immunitaire adaptatif............................................................25
1. La synapse immunologique...................................................................................... 25
2. Les réponses à médiation cellulaire et humorale ..................................................... 27
a. Développement des lymphocytes T CD4+ ...................................................................................................... 27
b. Développement des lymphocytes T CD8+ ...................................................................................................... 30
c. Développement de la réponse humorale .......................................................................................................... 31
d. Protection physiologique de la réponse humorale ........................................................................................... 33
II) La vaccination..............................................................................35
A. Généralités...............................................................................................35
1. Objectifs de la vaccination ....................................................................................... 35
2. Premières expériences historiques ........................................................................... 37
B. Les différentes classes de vaccins............................................................37
1. Les vaccins vivants atténués .................................................................................... 37
2. Les vaccins inactivés................................................................................................ 39
3. Les vaccins conjugués.............................................................................................. 39
4. Les vaccins vectorisés viraux................................................................................... 40
5. Les vaccins génétiques ............................................................................................. 41
6. Les vaccins sous-unitaires........................................................................................ 42
7. Les vaccins basés sur l’utilisation des cellules dendritiques.................................... 43
C. Un apercu des enjeux en vaccinologie ....................................................43
D. Adjuvantation ..........................................................................................45
1. Définition et besoins actuels .................................................................................... 45
2. Les différentes classes d’adjuvants .......................................................................... 46
E. Les adjuvants présents sur le marché.......................................................48
1. Adjuvants à base d’aluminium................................................................................. 48
2. MF59 ........................................................................................................................ 51
3. Monophosphoryl lipide A (MPLA) et RC529 ......................................................... 53
4. Immunopotentiating reconstituted influenza virosomes (IRIV) .............................. 54
5. Sous-unité B de la toxine cholérique (CTB) ............................................................ 56
F. Les adjuvants en développement clinique ...............................................57
1. Adjuvants à base d’aluminium................................................................................. 57
2. Emulsions................................................................................................................. 57
2
tel-00583087, version 1 - 4 Apr 20113. Ligands des Toll-Like Receptors ............................................................................. 59
4. IRIV.......................................................................................................................... 60
5. Les saponines ........................................................................................................... 61
6. Les cytokines............................................................................................................ 61
7. Les combinaisons d’adjuvants ................................................................................. 63
G. Adjuvants en développement préclinique ...............................................64
III) La réponse de phase aiguë (RPA) ..............................................68
A. Définition.................................................................................................68
B. Changements métaboliques .....................................................................68
C. Protéines majeures de la phase aiguë ......................................................71
1. La protéine C réactive .............................................................................................. 71
a. Caractéristiques ............................................................................................................................................... 71
b. Fonctions......................................................................................................................................................... 71
2. La protéine sérique amyloïde A ............................................................................... 72
D. Les lipoprotéines pendant la réponse de phase aiguë..............................72
1. Description des lipoprotéines ................................................................................... 73
2. Oxydation des liprotéines......................................................................................... 74
a. Mécanisme ...................................................................................................................................................... 74
b. Importance biologique........................................................