Propriétés régulatrices des cellules dendritiques humaines traitées par l’acide mycophénolique, Regulatory properties of human dendritic cells treated by mycophenolic acid

Roxane Lemoine

Description

Sous la direction de Hubert Nivet
Thèse soutenue le 15 décembre 2009: Tours
En transplantation d’organes, la réponse immunitaire de l’hôte contre son donneur reste une cause très importante de perte de greffons. Ainsi, un meilleur contrôle de la réponse par induction d’une tolérance spécifique reste une priorité en transplantation humaine. Dans ce travail, nous avons exploré les effets de l’acide mycophénolique (MPA, immunosuppresseur couramment utilisé en transplantation) sur les cellules dendritiques (DC) humaines. Nous avons mis en évidence que le MPA diminue la capacité des DC à activer des lymphocytes T CD8+ cytotoxiques allogéniques en diminuant la synthèse d’interféron gamma dans les DC. Par ailleurs, les DC traitées par MPA sont capables d’induire des lymphocytes T CD4+ régulateurs antigène-spécifiques (iTreg) qui peuvent reprogrammer des DC matures en DC aux propriétés tolérogènes. Enfin, ces iTreg entraînent une réduction de la sécrétion d’IFN-γ par les cellules T CD8+ et une inhibition de leur fonction cytotoxique en réponse à une stimulation allogénique. L’ensemble de ces résultats obtenus in vitro suggèrent que les DC-MPA humaines pourraient être potentiellement utilisés en thérapie cellulaire afin de promouvoir une tolérance d’allogreffe.
-Greffe d'organes
-Cellules dendritiques humaines
-Acide mycophénolique
-Tolérance d'allogreffe
In organ transplantation, host immune response against donor still remains a major cause of graft loss. A better control of allogeneic response through the induction of specific tolerance is a major goal in human transplantation. In this work, we explored the effects of mycophenolic acid (MPA, an immunosuppressive drug currently used in transplantation) on dendritic cell (DC) functions. We demonstrated that MPA inhibits DC ability to induce allogeneic cytotoxic CD8+ T cells through inhibition of interferon gamma synthesis in DC. Moreover, mycophenolic acid-treated dendritic cells (MPA-DC) are able to induce antigen-specific regulatory CD4+ T lymphocytes (iTreg) which can convert fully mature DC into tolerogenic DC. These iTreg decrease the expression of proteins associated with cytotoxic function (perforin and granzymes A and B), reduce IFN-γ production by CD8+ T cells and inhibit their cytotoxic function in response to allogeneic stimulation. These results taken together suggest that human MPA-DC could be use in cellular therapy in order to promote allograft tolerance.
-Organ transplantation
-Dendritic cells
-Mycophenolic acid
-Allograft tolerance
Source: http://www.theses.fr/2009TOUR3138/document

Sujets

• Greffe (médecine)

Informations

• Publié par: Thesee
• Nombre de lectures: 72
• Langue: Français
• Poids de l'ouvrage: 6 Mo

Extrait

UNIVERSITÉ FRANÇOIS - RABELAIS
DE TOURS


ÉCOLE DOCTORALE SANTE, SCIENCES ET TECHNOLOGIES
EA 4245 Cellules dendritiques, Immunomodulation et Greffes

THÈSE présentée par :
Roxane LEMOINE

soutenue le : 15 Décembre 2009


pour obtenir le grade de : Docteur de l’université François-Rabelais de Tours
Discipline/ Spécialité : Sciences de la Vie / Immunologie

PROPRIETES REGULATRICES DES
CELLULES DENDRITIQUES HUMAINES
TRAITEES PAR L’ACIDE
MYCOPHENOLIQUE

THÈSE dirigée par :
Mr NIVET Hubert Professeur / Praticien Hospitalier, HDR, Université François-
Rabelais de Tours

RAPPORTEURS :
Mr COHEN José Directeur de Recherche, HDR, Université Pierre et Marie Curie de
Paris VI
Mr DURRBACH Antoine Professeur / Praticien Hospitalier, HDR, Université Paris-Sud XI


JURY :
Mr BARON Christophe Maître de Conférences, Université François-Rabelais de Tours
Mr COHEN José Directeur de Recherche, Université Pierre et Marie Curie Paris VI
Mme CUTURI Maria-Cristina Directeur de Recherche, Université de Nantes
Mr DURRBACH Antoine Professeur, Université Paris-Sud XI
Mr LEBRANCHU Yvon Professeur, Université François-Rabelais de Tours
Mr NIVET Hubert Professeur, Université François-Rabelais de Tours

A mes parents, à Mathieu

















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Remerciements
Je tiens à saluer ici les personnes qui, de près ou de loin, ont contribué à la
concrétisation de ce travail de thèse.
Tout d’abord, Mr Yvon Lebranchu, je vous remercie de m’avoir accueillie au sein de
votre laboratoire. Merci de m’avoir permis de participer à de nombreux congrès. Je vous
remercie également d’avoir accepté de faire parti de mon jury de thèse.

Mr Hubert Nivet pour avoir été mon directeur de thèse et pour vos conseils toujours
judicieux.

Florence, je tiens à vous remercier sincèrement pour la confiance que vous m’avez
accordée pendant ces années et pour votre soutien lors de l’obtention de mon poste d’ATER.
J’ai ainsi pu terminer ce travail plus sereinement.

Christophe, « mon encadrant non officiel » pour avoir toujours été présent durant ces
trois années de thèse, pour nos discussions parfois interminables, pour m’avoir donnée
l’envie de m’investir dans le métier de chercheur malgré ton pessimisme légendaire !!!

Je remercie vivement le Pr Antoine Durrbach et le Dr José Cohen pour avoir accepté
d’évaluer ce travail de thèse en tant que rapporteur.
Un merci au Dr Maria-Cristina Cuturi pour avoir accepté d’examiner cette thèse.

Merci aux médecins et infirmières de l’EFS Centre Atlantique de Tours ainsi qu’aux
donneurs de sang, à Mr Blondelle et Mme Voileaux pour l’irradiation des cellules.

Une pensée émue à tous ceux qui ont partagé une partie de cette thèse à mes côtés :
- Laurence, un grand merci pour m’avoir appris à différencier les monocytes en cellules
dendritiques, tes conseils toujours avisés et ta disponibilité sans faille.
- Delphine, ce fût un plaisir de travailler avec toi pour ton article. J’espère que j’aurai
l’occasion de te rendre visite à Québec, au pays du grand froid. Je suis vraiment contente que
tu puisses venir assister à ma soutenance de thèse. Merci encore.
- Angélique, Audrey et Caro, merci à vous pour votre bonne humeur perpétuelle, vos
encouragements et nos nombreux fous rires.
- Audrey, l’Aveyronnaise du labo. J’arrive enfin à comprendre ton accent ! Merci pour la
mise au point du CFSE et pour m’avoir fait découvrir l’aligot.
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- Romain, notre délégué en chef. Merci pour les petites soirées improvisées et les
viennoiseries le matin, c’était très sympa. Bon courage pour la fin de ta thèse.
- Sylvie, j’aurai aimé que tu puisses voir l’aboutissement de ce travail.
- Cyrille, je compte sur toi pour mes futures visites dans le service de pédiatrie !!!
- Danièle et Bertille, merci pour la gestion des stocks, le nettoyage des hottes et étuves et les
tâches quotidiennes que vous avez assurées à ma place ces dernières semaines.
- Mariane, merci pour ta bonne humeur et les petits plats typiquement brésiliens. J’espère un
jour avoir l’occasion de te voir danser la samba dans ton beau pays !
- Flo et Olivier, j’ai hâte de vous revoir pour que vous me racontiez votre périple au Pérou.
Merci pour vos nombreux conseils pour la préparation de mon futur mariage.
Aux « nouveaux » que je ne connais pas encore très bien, j’espère que vous vous
épanouirez dans cette équipe et que vous saurez maintenir cette ambiance conviviale qui est
importante pour travailler dans de bonnes conditions.
Merci également à Michelle pour les remboursements « express » des congrès, à
Matthias et Jean-Michel de la néphro.
A tous les membres du service d’enseignement de microbiologie, Agnès, Brigitte,
Agnès, Fabien, Isabelle, Elodie et tous les moniteurs.

Ces remerciements ne peuvent s'achever, sans une pensée pour tous mes amis qui
m’ont permis de décompresser le week-end et de me changer les idées : Aurel, Milou et H,
Gaëlle et Manu, Mika et Stef, Tomtom et Lulu, Gaël, Coluche, Tétine et Jennifer.

Un grand merci à toute ma famille pour leurs encouragements.

A ma petite sœur adorée, Alexia. Tu as toujours été là pour moi surtout ces dernières
semaines qui ont été très éprouvantes pour moi alors merci pour tout.

A mes parents, je vous dédie cette thèse car vous m’avez toujours encouragée et
soutenue dans mes choix. Cette thèse en est l’aboutissement. Votre présence et votre
confiance sans faille sont pour moi les piliers fondateurs de ce que je suis et de ce que je fais.

A mon petit ange…

A Mathieu, pour tout l’amour dont tu m’entoures au quotidien. Tu as toujours été
présent pour moi malgré mon emploi du temps parfois un peu trop chargé à ton goût. Je n’ai
pas de mots assez forts pour te dire ce que je ressens…
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Résumé

En transplantation d’organes, la réponse immunitaire de l’hôte contre son donneur
reste une cause très importante de perte de greffons. Ainsi, un meilleur contrôle de la réponse
allogénique par induction d’une tolérance spécifique reste l’une des priorités en
transplantation humaine.
Dans ce travail, nous avons exploré plus précisément l’immunomodulation des
cellules dendritiques (DC) pour induire une tolérance spécifique in vitro chez l’homme.
Les immunosuppresseurs, initialement développés pour leur action inhibitrice sur les
lymphocytes T, affectent aussi les fonctions des cellules dendritiques. Nous avons ainsi étudié
les propriétés des cellules dendritiques humaines traitées par l’acide mycophénolique (MPA),
métabolite actif du mycophénolate mofétil (MMF). Cet immunosuppresseur diminue la
+
capacité des DC à induire des lymphocytes T CD8 cytotoxiques allogéniques en diminuant la
synthèse d’interféron gamma dans les DC.
De plus, les DC traitées avec du MPA (DC-MPA) sont également capables d’induire
+des lymphocytes T CD4 régulateurs. Ces cellules T régulatrices sont caractérisées par
l’expression des marqueurs CD25, GITR, CTLA-4, CD95 et du facteur de transcription
Foxp3 ainsi que par une sécrétion importante d’IL-10 et de TGF-β. Leur activité suppressive
est dépendante d’un contact cellulaire et est antigène-spécifique.
D’autre part, nous avons mis en évidence que ces lymphocytes T régulateurs induits
+
(iTreg), outre leur action sur des lymphocytes T CD4 , pouvaient également reprogrammer
des DC matures en DC dites semi-matures aux propriétés tolérogènes, suggérant ainsi la
grande plasticité des DC.
Enfin, nos résultats démontrent que les Treg induits par des DC-MPA sont capables de
diminuer l’expression des protéines associées à la fonction cytotoxique telles que la perforine
+ et les granzymes A et B, de réduire la sécrétion d’IFN-γ par les cellules T CD8 et d’inhiber
leur fonction cytotoxique en réponse à une stimulation allogénique.
L’ensemble de ces résultats obtenus in vitro suggèrent que les DC-MPA humaines
pourraient être potentiellement utilisés en thérapie cellulaire afin de promouvoir une tolérance
d’allogreffe.