CARACTERIZACIÓN GENÉTICA DE LOS BOVINOS CRIOLLOS DEL URUGUAY. II. ESTUDIO DE SU VARIABILIDAD GENÉTICA (GENETIC CHARACTERIZATION OF URUGUAYAN CREOLE CATTLE. II. STUDY OF ITS GENETIC VARIABILITY)

Postiglioni A.

Description

Resumen
La diversidad genética animal es considerada indispensable para sostener la productividad de la agricultura. La FAO estima que el 30 p.100 de las razas de ganado, corren riesgo de extinción, encontrándose más de la mitad de ellas en países en desarrollo. Antecedentes de estudios genéticos realizados en bovinos Criollos americanos
(Argentina, Colombia, Venezuela, Cuba) permiten hoy, revalorizar esta raza para ser utilizada en la explotación agropecuaria. En el Uruguay, existe una reserva de alrededor de 600 animales que habita en una zona húmeda, de sierras y montes, no alterada, limitada por diferentes barreras geográficas. El aspecto morfológico de estos animales se asemeja al de ciertas poblaciones de bovinos Criollos argentinos, venezolanos, colombianos y, a ciertas razas ibéricas. Con el objetivo de estudiar la estructura genética de esta población, se analizaron 82 muestras de ADN por la metodología PCR/RFLP para las proteínas de la leche k-caseína y b- lactoglobulina, 20 muestras para el microsatélite CYP21 (esteroide 21-hidroxilasa) y 77 animales para hemoglobina mediante electroforesis en gel de almidón. Los índices de endogamia y de heterocigosidad correspondieron a F= 0,02 y
He= 0,487. Las frecuencias genotípicas se distribuyeron de acuerdo a los valores esperados para el equilibrio H.W. El bajo índice de endogamia obtenido en los 4 loci analizados, la relación entre el número de genotipos homocigotos y heterocigotos, el alto polimorfismo que presentó el microsatélite CYP21, así como la variabilidad
observada en la coloración del pelaje, permiten sugerir que, a pesar de ser ésta una reserva aislada geográficamente, ha expresado una variabilidad genética tan importante que justifica su conservación como un recurso genético de animal doméstico.
Abstract
Animal genetic diversity is considered essential to sustain the productivity of agriculture. FAO estimates that 30 percent of livestock breeds are at risk of extinction and more than half of these breeds are found in developing countries. Previous genetic research upon American Creole Cattle (Argentina, Colombia, Venezuela, Cuba)
valuate these breeds, being considered of interest to maintain and enhance livestock production. In Uruguay, limited by different geographic barriers, about 600 bovines inhabit in hard environment in areas that cannot sustain
conventional farming. Aspect of Uruguayan Creole cattle is similar to that observed in certain American and Iberian breeds. Analysis of breed genetic variability involved the utilization of PCR/RFLP technology in 82 DNA samples for milk proteins (k-casein and b-lactoglobulin), amplification of 20 samples for CYP21 microsatellite and the use of protein markers such as haemoglobin in 77 animals. Inbreeding index and expected Heterocigosity considering four loci were F= 0.02 and He= 0.487. Genotypic frequency distribution was in accordance with Hardy-Weinberg equilibrium. Genetic variation estimated, reinforced by the low inbreeding index, strengthen the need of preservation of Uruguayan Creole Cattle as a domestic animal genetic resource.

Sujets

• Hemoglobina
• Hemoglobin

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• Publié par: erevistas
• Publié le: 01 janvier 1998
• Nombre de lectures: 39
• Langue: Español

Extrait

POSTER
CARACTERIZACIÓN GENÉTICA DE LOS BOVINOS CRIOLLOS DEL
URUGUAY. II. ESTUDIO DE SU VARIABILIDAD GENÉTICA
GENETIC CHARACTERIZATION OF URUGUAYAN CREOLE CATTLE.
II. STUDY OF ITS GENETIC VARIABILITY
1 1 1 1 1 2Postiglioni, A., G. Rincón, L. Kelly, M. D'Angelo, R. Gagliardi y D. De Andrés Cara
1Laboratorio de Citogenética de Animales Domésticos. Área Genética. Departamento de Biología Molecular
y Celular. Facultad de Veterinaria. Universidad de la República. A. Lasplaces 1550. C.P. 11600. Montevideo.
Uruguay. Email: [e-mail].
2Unidad Mixta CSIC UCO Marcadores Genéticos Moleculares. Facultad de Veterinaria. Universidad de
Córdoba. España.
PALABRAS CLAVE ADICIONALES ADDITIONAL KEYWORDS
Proteínas de la leche. Polimorfismos en micro Milk proteins. Microsatellite polymorphism.
satélites. Hemoglobina. Haemoglobin.
RESUMEN
La diversidad genética animal es considera muestras de ADN por la metodología PCR/RFLP
da indispensable para sostener la productividad para las proteínas de la leche k- caseína y b-
de la agricultura. La FAO estima que el 30 p.100 lactoglobulina, 20 muestras para el microsatélite
de las razas de ganado, corren riesgo de extin CYP21 (esteroide 21 hidroxilasa) y 77 animales
ción, encontrándose más de la mitad de ellas en para hemoglobina mediante electroforesis en gel
países en desarrollo. Antecedentes de estudios de almidón. Los índices de endogamia y de
genéticos realizados en bovinos Criollos ameri heterocigosidad correspondieron a F= 0,02 y
canos (Argentina, Colombia, Venezuela, Cuba) He= 0,487. Las frecuencias genotípicas se dis
permiten hoy, revalorizar esta raza para ser tribuyeron de acuerdo a los valores esperados
utilizada en la explotación agropecuaria. para el equilibrio H.W. El bajo índice de endogamia
En el Uruguay, existe una reserva de alrede obtenido en los 4 loci analizados, la relación entre
dor de 600 animales que habita en una zona el número de genotipos homocigotos y
húmeda, de sierras y montes, no alterada, limita heterocigotos, el alto polimorfismo que presentó
da por diferentes barreras geográficas. El as el microsatélite CYP21, así como la variabilidad
pecto morfológico de estos animales se asemeja observada en la coloración del pelaje, permiten
al de ciertas poblaciones de bovinos Criollos sugerir que, a pesar de ser ésta una reserva
argentinos, venezolanos, colombianos y, a cier aislada geográficamente, ha expresado una
tas razas ibéricas. variabilidad genética tan importante que justifica
Con el objetivo de estudiar la estructura su conservación como un recurso genético de
genética de esta población, se analizaron 82 animal doméstico.
Arch. Zootec. 47: 225 231. 1998.POSTIGLIONI ET AL.
SUMMARY características observables y medibles:
a) fenotípicas (piel gruesa, coloración
Animal genetic diversity is considered variable de la capa, cuernos en forma
essential to sustain the productivity of agriculture. de lira); b) comportamiento (capaci
FAO estimates that 30 percent of livestock breeds dad de desplazamiento, terneros junto
are at risk of extinction and more than half of a su madre); c) sanidad (ausencia de
these breeds are found in developing countries. distocia, baja mortalidad del ternero)
Previous genetic research upon American Creole (Primo, 1992; Giovambattista, 1995).
Cattle (Argentina, Colombia, Venezuela, Cuba) En la zona sureste del Uruguay,
valuate these breeds, being considered of interest fronteriza con Brasil (Departamento
to maintain and enhance livestock production. de Rocha), existe una reserva de alre
In Uruguay, limited by different geographic dedor de 600 animales que habitan en
barriers, about 600 bovines inhabit in hard
una zona húmeda, de sierras y montes,
environment in areas that cannot sustain
no alterada, limitada por barreras geo
conventional farming. Aspect of Uruguayan
gráficas naturales, cuyo aspecto
Creole cattle is similar to that observed in certain
morfológico se asemeja al de ciertas
American and Iberian breeds.
poblaciones de bovinos Criollos argen
Analysis of breed genetic variability involved
tinos, venezolanos, colombianos y cier
the utilization of PCR/RFLP technology in 82 DNA
tas razas ibéricas. Esta población ha
samples for milk proteins (k- casein and b-
despertado un particular interés para
lactoglobulin), amplification of 20 samples for
estudiar su estructura genética, ya que
CYP21 microsatellite and the use of protein
se ha mantenido aislada alrededor demarkers such as haemoglobin in 77 animals.
50 años, en condiciones de ecosistemaInbreeding index and expected Heterocigosity
similares a las que existían en la Bandaconsidering four loci were F= 0.02 and He=
Oriental (siglo XVI) (Arredondo, 1955).0.487. Genotypic frequency distribution was in
Con el propósito de estudiar laaccordance with Hardy Weinberg equilibrium.
estructura genética de esta población,Genetic variation estimated, reinforced by the
y comparar sus frecuencias alélicaslow inbreeding index, strengthen the need of
con otras poblaciones iberoamerica preservation of Uruguayan Creole Cattle as a
domestic animal genetic resource. nas de características fenotípicas si
milares, se seleccionaron los siguien
tes marcadores genéticos: a) mole
INTRODUCCIÓN culares de tipo I, por corresponder a
genes muy conservados en la evolu
Desde la introducción de razas ibé ción; b) marcadores proteicos, ya de
ricas (variedades andaluza y portu terminados en otras razas compara
guesa) a nuestro continente hasta nues bles; c) marcadores moleculares de
tros días, los bovinos Criollos america tipo II, seleccionados por su alto grado
nos han superado las variaciones de polimorfismo.
climáticas propias de nuestro ecosis
tema, expresando todo su potencial
genético regulado por 4 siglos de se MATERIALES Y MÉTODOS
lección natural. Su alto grado de adap
Se analizó una muestra de bovinostabilidad se cuantifica por una serie de
Archivos de zootecnia vol. 47, núm. 178 179, p. 226.VARIABILIDAD GENÉTICA DE LOS BOVINOS CRIOLLOS DEL URUGUAY
Criollos, caracterizados por la variabi de las amplificaciones con las siguien
lidad en la coloración de su pelaje tes enzimas de restricción: a) 5U de
(bayo, hosco, moro azulejo, rosillo, lobu HinfI para la secuencia de la k- caseí
no, negro manchado, barcino, colora na; b) 5U de HaeIII para la secuencia
do). Se extrajo sangre periférica utili amplificada de la b- lactoglobulina. La
zando EDTA como anticoagulante. Se amplificación por PCR se llevó a cabo
analizaron 77 animales para la hemog en un ciclador térmico (Thermolyne)
lobina (Hb) mediante electroforesis en con la siguiente secuencia: 1 ciclo de 1
gel de almidón. min a 96°C; 35 ciclos de 1 min a 94°C,
Para testar las técnicas moleculares 1 min a 59°C y 1 min a 73°C; 1 ciclo de
se aisló ADN genómico de cada indi 5 min a 73°C. Los productos de ampli
viduo, a partir de sangre entera. Se ficación y los fragmentos de restric
utilizó detergente no iónico, fenol/clo ción se controlaron por electroforesis
roformo, y precipitación con etanol en geles de agarosa al 2,7 p.100 en
(John et al. , 1991), a efectos de fundar TAE 1X, a 95 V, teñidos con bromuro
el banco genómico de esta reserva. La de etidio (0,5μg/ml.), utilizándose como
valoración del ADN se realizó en gelesmarcador de peso molecular el fago
de agarosa (0.8 p.100) utilizando como ØX174 digerido con HindIII.
marcador de peso molecular el fago
ØX174 digerido con la enzima de res MICROSATÉLITE CYP21
tricción Hind III. La cuantificación se Se analizaron 20 muestras amplifi
realizó espectrofotométricamente, cando una región repetida del intrón
ajustándose su concentración en 200ng/ del gen de la esteroide 21 hidroxilasa
μl. Se amplificaron alícuotas de cada (Usha et al., 1995). Ésta corresponde
muestra de ADN por la metodología a un fragmento de 254 300pb. La am
de la reacción en cadena de la polime plificación in vitro se realizó en un
rasa (PCR). Se testaron variaciones volumen total de 20μl conteniendo
alélicas en secuencias de los genes 200ng de ADN, 20pmles de cada ce
que codifican para la k- caseína, y b- bador, 200μM de cada dNTP, 10 p.100
lactoglobulina y para secuencias repe de 10X PCR buffer, 1,25mM de Cl Mg
2
tidas del microsatélite (MS) del gen y 0,5U de Taq DNA polimerasa
esteroide 21 hidroxilasa, CYP21. (GIBCO). La reacción de amplifica
ción se realizó en un ciclador térmico
CASEÍNA Y b- LACTOGLOBULINA (Thermolyne) comprendiendo el si
Se analizaron 82 individuos mediante guiente programa: 1 ciclo de 2 min a
la amplificación de fragmentos de los 97°C, 40 s a 60°C y 45 s a 72°C; 28
genes de la k- caseína y b- lacto ciclos de 45 s a 94°C, 40 s a 60°C y 45
globulina correspondientes a la