Desarrollo y validación del método de cromatografía líquida de alto rendimiento para la cuantificación de oxitocina en formulación inyectable (Development and validation of high performance liquid chromatography method for quantification of oxytocin in injectable formulation)
12 pages
Español

Découvre YouScribe en t'inscrivant gratuitement

Je m'inscris

Desarrollo y validación del método de cromatografía líquida de alto rendimiento para la cuantificación de oxitocina en formulación inyectable (Development and validation of high performance liquid chromatography method for quantification of oxytocin in injectable formulation)

-

Découvre YouScribe en t'inscrivant gratuitement

Je m'inscris
Obtenez un accès à la bibliothèque pour le consulter en ligne
En savoir plus
12 pages
Español
Obtenez un accès à la bibliothèque pour le consulter en ligne
En savoir plus

Description

Resumen
El método de cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) se ha desarrollado para la inyección de oxitocina, que se basa en el método mencionado en la British Pharmacopoeia (farmacopea británica). Se ha validado el método HPLC, y el informe de validación indica la especificidad, linealidad, precisión y exactitud del método propuesto. El método también ha demostrado ser un indicador de estabilidad.
Abstract
High performance liquid chromatographic method (HPLC) has been developed for Oxytocin Injection, which is based on the method mentioned in British Pharmacopoeia. The HPLC method has been validated and the report of validation indicates the specificity, linearity, precision and accuracy of the proposed method. Also the method has been shown to be stability indicating.

Sujets

Informations

Publié par
Publié le 01 janvier 2005
Nombre de lectures 67
Langue Español

Extrait

DESARROLLO Y VALIDACIÓN DEL MÉTODO DE CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTO RENDIMIENTO... 399
DEVELOPMENT AND VALIDATION OF HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY METHOD ...
Desarrollo y validación del método de
cromatografía líquida de alto rendimiento para
la cuantificación de oxitocina en formulación
inyectable
Development and validation of high performance liquid chromatography
method for quantification of oxytocin in injectable formulation
PATIL JT*, JAIN RS, SHARMA MR, SHAH RR
Mercury Laboratories Ltd, 2/13,Industrial Estate, P.B.No.3001, Gorwa, Baroda-390 016,India.
*****Dirección para correspondencia: Dr.J.T.Patil, R&D Manager, Mercury Laboratories Ltd, 2/13 Gorwa
Industrial Estates, P.B.No.3001, Gorwa, Baroda-390 016, India.
Dirección de correo electrónico: jaideepp_99@yahoo.com
RESUMEN
El método de cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) se ha desarrollado para la inyección de
oxitocina, que se basa en el método mencionado en la British Pharmacopoeia (farmacopea británica). Se
ha validado el método HPLC, y el informe de validación indica la especificidad, linealidad, precisión
y exactitud del método propuesto. El método también ha demostrado ser un indicador de estabilidad.
PALABRAS CLAVE: Oxitocina. HPLC. Validación. Inyección.
ABSTRACT
High performance liquid chromatographic method (HPLC) has been developed for Oxytocin Injection,
which is based on the method mentioned in British Pharmacopoeia. The HPLC method has been validated
and the report of validation indicates the specificity, linearity, precision and accuracy of the proposed
method. Also the method has been shown to be stability indicating.
KEY WORDS: Oxytocin. HPLC. Validation. Injection.
INTRODUCCIÓN INTRODUCTION
La oxitocina es una hormona no peptídica Oxytocin is a nonpeptide hormone (Figure
(Figura 1) que tiene la propiedad de provocar 1) having the property of causing the contrac-
contracciones en la musculatura lisa del útero tion of uterine smooth muscle and of the
y en las células mioepiteliales de la glándula myoepithelial cells within the mammary gland.
mamaria. Se prepara mediante síntesis o se It is prepared by synthesis or obtained from
obtiene del lóbulo posterior de la pituitaria de the posterior lobe of the pituitary of healthy
animales domésticos sanos utilizados como domestic animals used for food by man. Oxyto-
alimento por el hombre. La oxitocina se ad- cin is administered in injectable dosage form
ministra por vía inyectable y con una concen- having strength 5 IU per ml.
tración de 5 UI por ml.
Ars Pharm 2005; 46 (4): 399-410.PATIL JT, JAIN RS, SHARMA MR, SHAH RR.400
FIGURA 1.FIGURA 1.FIGURA FIGURA 1.FIGURA 1. 1. Estructura de la oxitocina.
FIGURE 1.FIGURE 1.FIGURE FIGURE 1.FIGURE 1. 1. Structure of Oxytocin.
Aparece en la farmacopea estadounidense It is listed in the United States Pharmaco-
1 1 2(United States Pharmacopoeia, USP) , en la poeia (USP) , the British Pharmacopoeia (BP)
2 3británica (British Pharmacopoeia, BP) y en la and the Indian Pharmacopoeia (IP) .
3india (Indian Pharmacopoeia, IP) . High performance liquid chromatography
1,2,4-La cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) has been reported for its analysis
6(HPLC) también se ha utilizado para su aná- and also in vivo bioassays method has been
1,2,4-6 3lisis , así como el método de bioensayo in reported .
3vivo . The intention to replace in vivo bioassays
La intención de sustituir los bioensayos in for testing Oxytocin and Oxytocin solutions
vivo para el análisis de oxitocina y soluciones has been published in Pharmeuropa, the fo-
de oxitocina ha sido publicada en Pharmeuro- rum publication of the European Pharmaco-
7pa, la publicación del foro de la comisión de poeia Commission, for comments .
la farmacopea europea (European Pharmaco- The data published by Maxl & Siehr in
7poeia Commission), para su comentario . 1989, which support that the in vivo bioas-
Los datos publicados por Maxl y Siehr en says were more variable in their responses than
1989 defienden que la variabilidad de las the physicochemical tests, and that they are
respuestas de los bioensayos in vivo es supe- less reliable for the standardization of oxyto-
8rior a la de los análisis fisicoquímicos, y que cin .
son menos fiables para la estandarización de The present work deals with development
8la oxitocina . and validation of HPLC method based on the
El presente trabajo consiste en el desarro- method given in the British Pharmacopoeia
llo y la validación del método HPLC basán- for quantification of Oxytocin in injectable
dose en el método de la farmacopea británica formulation with intention to replace the in
para la cuantificación de la oxitocina en for- vivo bioassays method.
mulación inyectable, con la intención de sus-
tituir al método de bioensayo in vivo.
MATERIALS AND METHODS
MATERIALES Y MÉTODOS Instrument Shimadzu HPLC system equip-
ped with pump LC-10 AT vp with 100 µl
Instrumental sistema HPLC Shimadzu equi-loop and UV-Vis Detector-SPD-10Avp
pado con bomba LC-10 AT vp con bucle de Reagents and Chemicals
100 µl y detector UV-Vis SPD-10Avp Orthophosphoric acid (AR grade, S.D.Fine
Reactivos y productos químicos Chem Ltd, India), Acetonitrile (HPLC grade,
Se utilizaron ácido ortofosfórico (calidad S.D.Fine Chem Ltd, India) were used. Water
AR, S.D.Fine Chem Ltd, India) y acetonitrilo for Injection was used throughout the experi-
(grado HPLC, S.D.Fine Chem Ltd, India). Se ment and our in-house commercial Oxytocin
utilizó agua para inyección durante el experi- injection used for study.
mento y en nuestra inyección de oxitocina Preparation of Mobile Phase
Orthophosphoric acidcomercial interna utilizada para el estudio. 0.2%v/v solution of
Preparación de la fase móvil and Acetonitrile were mixed in the ratio of
Se mezcló solución al 0,2% v/v de ácido 83:17v/v, filtered through 0.45 µ membrane
ortofosfórico con acetonitrilo en una propor- filter and degassed.
ción de 83:17 v/v, se filtró a través de una
membrana de 0,45 µ y se desgasificó.
Ars Pharm 2005; 46 (4): 399-410.DESARROLLO Y VALIDACIÓN DEL MÉTODO DE CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTO RENDIMIENTO... 401
DEVELOPMENT AND VALIDATION OF HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY METHOD ...
Condiciones cromatográficas Chromatographic Condition
Cromatógrafo: Sistema Shimadzu HPLC Chromatograph: Shimadzu HPLC System
Columna: Phenomenex, Luna-C18 Column: Phenomenex, Luna-C18
(25cm x 4.6 m), 5µ (25cm x 4.6 m), 5µ
Detector: UV-220 nm Detector: UV-220 nm
Volumen de inyección: 100 µl Injection Volume: 100 µl
Temperatura de la columna: 40 °C Column Temperature: 40°C
Velocidad de flujo: 1 ml/min Flow Rate: 1 ml/min
RESULTADOS Y DISCUSIÓN RESULTS AND DISCUSSION
CROMATOGRAFÍA CHROMATOGRAPHY
La fase móvil resolvió la oxitocina con gran The mobile phase resolved the Oxytocin
eficiencia, con un tiempo de retención infe- very efficiently with retention time lower than
rior a 14 minutos. Los cromatogramas típicos 14 minutes. Typical chromatograms of stan-
de la preparación estándar y de la prepara- dard preparation and sample preparation are
ción de muestra se muestran en la Figura 2 yshown in Figure 2 and Figure 3 respectively.
en la Figura 3 respectivamente.
FIGURA 2. Cromatograma típico de la oxitocina estándar.
FIGURE 2. Typical chromatogram of Standard Oxytocin.
FIGURA 3. FIGURA 3. Cromatograma típico de la muestra de análisis de la inyección de oxitocina.
FIGURE 3. Typical chromatogram of Test Sample of Oxytocin Injection.
Ars Pharm 2005; 46 (4): 399-410.PATIL JT, JAIN RS, SHARMA MR, SHAH RR.402
LINEALIDAD Y RANGO LINEARITY AND RANGE
La linealidad de la respuesta se determinó The linearity of response was determined
preparando soluciones con un contenido de by preparing solution containing 1,2,4,8 & 16
1,2,4,8 y 16 UI/ml de oxitocina e inyectando IU/ml of Oxytocin and injecting each in du-
cada una de ellas por duplicado en un sistema plicate on HPLC system. The mean peak areas
HPLC. Las áreas de pico medias obtenidas se obtained are given in Table 1. From the resul-
indican en la Tabla 1. A partir de la pendiente ts slope, intercept and correlation coefficient
de resultados se calcularon los coeficientes de (r) were calculated. By applying the proposed
interceptación y de correlación (r). Al aplicar method, linearity was obeyed in the concen-
el método propuesto, se siguió la linealidad tration range of 1 IU – 16 IU/ml and correla-
en el rango de concentración de 1 UI – 16 tion coefficient 0.9999 indicates good lineari-
UI/ml, y el coeficiente de correlación 0,9999 ty between concentration and peak area. The
indica una buena linealidad entre la concen- slope value 117483 indicates the sensitivity
tración y é área pico. El valor de la pendiente, of HPLC method.
117483, indica la sensibilidad del método HPLC.
TABLA 1. Resul

  • Univers Univers
  • Ebooks Ebooks
  • Livres audio Livres audio
  • Presse Presse
  • Podcasts Podcasts
  • BD BD
  • Documents Documents