Identificación de polimorfismos del gen de la Kappa caseína bovina: Nariño-Colombia (Identification of polymorphisms of the bovine kappa casein gen. Nariño-Colombia)

Carlos

Description

Resumen
Introducción. El uso de tarjetas para la colección, almacenamiento y conservación de sangre no es frecuente en investigaciones de biología molecular, donde se prefiere la recolección y conservación en tubos Vacuntainer con acido etilen-diamino-tetraacético como anticoagulante. Sin embargo, por las condiciones topográficas de la zona de estudio, el uso de metodologías convencionales, con trans-porte refrigerado de las muestras, resulta poco apropiado por las dificultades de acceso a las fincas y las grandes distancias entre hato y hato. Objetivo. Estandarizar la técnica (reacción en cadena de la polimerasapolimorfismos de cadena simple) para la identificación de polimorfismos del gen de la kappa- caseína en ejemplares de las razas Holstein, Normando, Jersey y Pardo Suizo en la cuenca lechera del Trópico Alto de Nariño. Material y métodos. Se tomaron muestras de sangre de 1087 ejemplares, utilizando tarjetas para la recolección, almacenamiento y preservación del tejido
y su posterior análisis en el laboratorio. Resultados. Para obtener productos amplificados de alta calidad fue suficiente un disco de 1.2 mm y un tiempo de separación electroforética de 16 horas a 160V. Conclusión. Esta investigación permite concluir que las tarjetas fueron un medio eficiente, ya que facilitan el transporte y almacenamiento de tejido sanguíneo y evitan el uso de refrigeración para la conservación de la muestra durante períodos largos de tiempo.
Abstract
Introduction. The use of cards to collect, store and conserve blood is not enough in molecular biology research, in which these processes are preferably done with Vacutainer tubes with ethylene diamine tetra-acetic acid as an anti coagulant. However, due to the topography of the zone in which such research takes place, the use of conventional methods, with refrigerated transportation of th samples, is not adequate because of the difficult access conditions in the farms and the long distance between herds. Objective. To standardize the technique (chain reaction of simple chain polymerase-polymorphisms) for the identification of polymorphisms of the kappacasein gen in Holstein, Norman, Jersey and Brown Suiss cattle in the dairy basin of the Nariño´s high tropical zone. Material and methods. Blood samples were taken from 1087 animals, using cards for collecting, storing and keeping the tissues for their analysis in the laboratory. Results. To obtain high quality amplified products, one 1.23 mm disc and an electrophoretic time of 16 hours at 160 V were sufficient. This research work allows to conclude that cards were an efficient mean, because they make transportation and storing of blood tissue easy and avoid the use of refrigeration to keep the

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• Publié par: erevistas
• Publié le: 01 janvier 2009
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Extrait

Artículo original
Identifcación de polimorfsmos del gen
de la Kappa caseína bovina: Nariño-Colombia*
Carlos Eugenio Solarte Portilla**, Carol Yovanna Rosero Galindo***, Heiber Cárdenas Henao***,
William Orlando Burgos Paz****, Johanna Melissa Eraso Cabrera*****, Gema Lucía Zambrano Burbano*****
Resumen Identifcation of polymorphisms of the bovine
kappa casein gen. Nariño-Colombia
Introducción. El uso de tarjetas para la colección,
almacenamiento y conservación de sangre no es Abstract
frecuente en investigaciones de biología molecular,
donde se prefere la recolección y conservación en Introduction. The use of cards to collect, store and
tubos Vacuntainer con acido etilen-diamino-tetra- conserve blood is not enough in molecular biology
acético como anticoagulante. Sin embargo, por las research, in which these processes are preferably
condiciones topográfcas de la zona de estudio, el done with Vacutainer tubes with ethylene diamine
uso de metodologías convencionales, con trans-porte tetra-acetic acid as an anti coagulant. However, due
refrigerado de las muestras, resulta poco apropiado to the topography of the zone in which such research
por las difcultades de acceso a las fncas y las grandes
takes place, the use of conventional methods, with
distancias entre hato y hato. Objetivo. Estandarizar
refrigerated transportation of the samples, is not
la técnica (reacción en cadena de la polimerasa-
adequate because of the diffcult access conditions
polimorfsmos de cadena simple) para la identifcación
in the farms and the long distance between herds.
de polimorfsmos del gen de la kappa- caseína en
Objective. To standardize the technique (chain ejemplares de las razas Holstein, Normando, Jersey y
reaction of simple chain polymerase-polymorphisms) Pardo Suizo en la cuenca lechera del Trópico Alto de
for the identifcation of polymorphisms of the kappa-Nariño. Material y métodos. Se tomaron muestras de
casein gen in Holstein, Norman, Jersey and Brown sangre de 1087 ejemplares, utilizando tarjetas para la
Suiss cattle in the dairy basin of the Nariño´s recolección, almacenamiento y preservación del tejido
high tropical zone. Material and methods. Blood y su posterior análisis en el laboratorio. Resultados.
samples were taken from 1087 animals, using cards Para obtener productos amplifcados de alta calidad
for collecting, storing and keeping the tissues for their fue sufciente un disco de 1.2 mm y un tiempo de
separación electroforética de 16 horas a 160V. analysis in the laboratory. Results. To obtain high
Conclusión. Esta investigación permite concluir que quality amplifed products, one 1.23 mm disc and
las tarjetas fueron un medio efciente, ya que facilitan an electrophoretic time of 16 hours at 160 V were
el transporte y almacenamiento de tejido sanguíneo y suffcient. This research work allows to conclude
evitan el uso de refrigeración para la conservación de that cards were an effcient mean, because they
la muestra durante períodos largos de tiempo. make transportation and storing of blood tissue
easy and avoid the use of refrigeration to keep the
Palabras clave: Gen de la Kappa caseína, DNA, samples during long periods of time.
Holstein, Normando, Jersey, Pardo Suizo.
Key words: Kappa casein gen. DNA. Holstein.
Artículo recibido 17-02 de 2009, última revisión 10-
Norman. Jersey. Brown Suiss.
09 de 2009
* Este artículo hace parte del Proyecto: 048-2/06 “Determinación de las frecuencias alélicas de los genes de la kappa caseína en la
población bovina lechera del Trópico Alto de Nariño”; iniciado en julio de 2006 y fnalizado en diciembre de 2008. El proyecto en mención
hace parte del Programa de Mejoramiento Genético de los bovinos lecheros del Trópico Alto de Nariño. Financiado por el Ministerio de
Agricultura y Desarrollo Rural, CIAT y FEDEGAN.
** Zootecnista. M.Sc. Dr.Sc, Director General, Programa de Mejoramiento Genético Universidad de Nariño, Facultad de Ciencias Pecuarias,
programa de Zootecnia [e-mail].
*** Biologos. M.Sc. Dr.Sc, Asesores moleculares, Programa de Mejoramiento Genético Universidad de Nariño.
**** Zootecnista. Candidato a Maestría en Ciencias Animales, Investigador, Programa de Mejoramiento Genético, Universidad de Nariño,
Docente Corporación Universitaria Lasallista.
***** Estudiantes de Zootecnia, Investigadoras en formación, Programa de Mejoramiento Genético, Universidad de Nariño.
REVISTA LASALLISTA DE INVESTIGACIÓN - Vol. 6 No. 2 39Identifcação de polimorfsmos do gene da do gene da kappa- caseína, em exemplares das
Kappa caseína bovina. Nariño-Colômbia raças Holstein, Normando, Malha e Pardo Suíço
na fonte leiteira do Trópico Alto de Nariño. Material
Resumo e métodos. Tomaram-se mostras de sangue de
1087 exemplares, utilizando cartões para a recolha,
Introdução. O uso de cartões para a coleção, armazenamento e preservação do tecido e sua
armazenamento e conservação de sangue não é posterior análise no laboratório. Resultados. Para
freqüente em investigações de biologia molecular, obter produtos amplifcados de alta qualidade
onde se prefere a recolha e conservação em foi sufciente 1 disco de 1.2 mm e um tempo de
tubos vacutainer com acido etilen-diamino-tetra- separação electroforética de 16 horas a 160V.
acético como anti-coagulante. No entanto, pelas
Conclusão. Esta investigação permite concluir que
condições topográfcas da zona de estudo, o uso
os cartões foram um meio efciente, já que facilitam
de metodologias convencionais, com transporte
o transporte e armazenamento de tecido sanguíneo refrigerado das mostras, resulta pouco apropriado
e evitam o uso de refrigeração para a conservação pelas difculdades de acesso às herdades e as
da mostra durante períodos longos de tempo.grandes distâncias entre produtores e produtores.
Objetivo: Estandarizar a técnica (reação em
Palavras chaves: Gene da Kappa caseína, DNA, corrente da polimerasa-polimorfsmos de corrente
Holstein, Normando, Malha, Pardo Suíço.simples) para a identifcação de polimorfsmos
8-10das en Bos taurus , por su importante papel Introducción
en la industrialización, especialmente en la
producción de queso. Muchos países han modifcado los objetivos
de selección de las características a mejorar
genéticamente, orientándose al incremento Estudios moleculares permiten establecer
de sólidos lácteos, longevidad, resistencia a variantes alélicas involucradas en la expresión
mastitis y mayores tasas de fertilidad (San del gen K-CSN, y relacionadas con la producción
1primitivo Tirados 2001 ). Para alcanzar estos y la calidad de la leche. Este conocimiento
objetivos, se han propuesto estrategias ba- constituye una herramienta de aplicación directa
sadas principalmente en el mejoramiento de en los programas de mejoramiento genético de
caracteres cuantitativos a partir de mediciones 11una población (Chessa et al. 2007 ; Boettcher
fenotípicas realizadas en individuos adultos 12et al. 2004 .
con un progreso genético lento y costoso y
un intervalo generacional prolongado como el La técnica de PCR-SSCP (por sus siglas en
caso de los bovinos. ingles, Polymerase Chain Reaction Single-
Strand Conformation Polymorphism) ha sido
Actualmente, con el uso de herramientas
ampliamente utilizada en la identifcación de
moleculares se han logrado extraordinarios
los polimorfsmos génicos de las caseínas y de avances en el mejoramiento genético de dife-
13otras proteínas (Bonifacio et al. 2001 ). Esta rentes sistemas de producción, por medio
técnica se basa en la migración de moléculas de la estimación de la variabilidad genética a
2 de ADN denaturado a través de geles no través del estudio de polimorfsmos de ADN ,
denaturantes de poliacrilamida, de acuerdo identifcación de secuencias asociadas a ca-
3 con las diferencias presentes en la secuencia racteres productivos , aplicación de tecnolo-
de nucleótidos, de manera que dos fragmentos gías moleculares para la identifcación de loci
de PCR (por sus siglas en ingles, Polymerase asociados a características cuantitativas Iden-
Chain Reaction) diferen por puntos de tifcation of quantitative trait loci por sus siglas
4 mutación que permiten la movilidad diferencial en ingles (QTL) , diagnósticos mole-culares de
5 14enfermedades como mastitis , secuencia de sobre el gel .
genes asociados con la mortalidad embrionaria
6temprana y un énfasis especial en el estudio Para realizar éste análisis, es de vital importancia
de los polimorfsmos de los genes que codifcan contar con una muestra de tejido que permita
7-9las proteínas de la leche . l