ÉTUDES BIOCHIMIQUES ET STRUCTURALES DES GRANDS FACTEURS D'ECHANGE DES PROTÉINES Arfs

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Niveau: Secondaire, Lycée
MINISTERE DE LA JEUNESSE, DE L'EDUCATION NATIONALE ET DE LA RECHERCHE ÉCOLE PRATIQUE DES HAUTES ETUDES Sciences de la Vie et de la Terre MEMOIRE présenté par ALEXANDRA JOUBERT pour l'obtention du diplôme de l'Ecole Pratique des Hautes Etudes ÉTUDES BIOCHIMIQUES ET STRUCTURALES DES GRANDS FACTEURS D'ECHANGE DES PROTÉINES Arfs soutenu le 17/12/2007 devant le jury suivant : Présidente : M. Giraud Guille Examinatrices : S. Cheruel et B. Satiat-Jeunemaître Tutrices scientifiques : J. Cherfils et V.Biou Tutrice pédagogique : S. Demignot Laboratoire : Directeur : J. Chambaz UMRS 872 - Laboratoire de Pharmacologie Cellulaire et Moléculaire de l'EPHE Centre de Recherche des Cordeliers, 15 rue de l'Ecole de Médecine, 75006 Paris Tutrice pédagogique : S. Demignot Laboratoire de : Directeur : J. Cherfils FRE 2930 - Laboratoire d'Enzymologie et Biochimie Structurales, 1 Avenue de la terrasse, 91198 Gif sur Yvette Tutrices scientifiques : J. Cherfils , V.Biou EPHE Banque de Monographies SVT 1

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Publié le 01 décembre 2007
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MINISTERE DE LA JEUNESSE, DE L’EDUCATION NATIONALE ET DE LA RECHERCHE  ÉCOLE PRATIQUE DES HAUTES ETUDES  Sciences de la Vie et de la Terre
MEMOIRE   présenté  par  ALEXANDRA JOUBERT   pour l’obtention du diplôme de l’Ecole Pratique des Hautes Etudes              ÉTUDES BIOCHIMIQUES ET STRUCTURALES DES GRANDS FACTEURS D’ECHANGE DES PROTÉINES Arfs   soutenu le 17/12/2007devant le jury suivant :                Présidente : M. Giraud Guille             Examinatrices :S. Cheruel et B. Satiat-Jeunemaître             Tutrices scientifiques: J. Cherfils et V.Biou             Tutrice pédagogique: S. Demignot   Laboratoire : Directeur :J. Chambaz UMRS 872 - Laboratoire de Pharmacologie Cellulaire et Moléculaire de l’EPHE Centre de Recherche des Cordeliers, 15 rue de l'Ecole de Médecine, 75006 Paris Tutrice pédagogique : S. Demignot sylvie.demignot@crc.jussieu.fr  Laboratoire de : Directeur :J. Cherfils         FRE 2930 - Laboratoire d’Enzymologie et Biochimie Structurales, 1 Avenue de la terrasse, 91198 Gif sur Yvette Tutrices scientifiques : J. Cherfils cherfils@lebs.cnrs-gif.fr,V.Biou biou@lebs.cnrs-gif.fr   
ÉCOLE PRATIQUE DES HAUTES ETUDES SCIENCES DE LA VIE ET DE LA TERRE    ÉTUDES BIOCHIMIQUES ET STRUCTURALES DES GRANDS FACTEURS D’ECHANGE DES PROTÉINES Arfs    ALEXANDRA JOUBERT   17/12/2007    RESUME   Le transport des protéines et membranes entre les différents compartiments de la cellule est régulé entre autres par les petites protéines G de la famille Arf. Les diverses protéines Arfs sont associées à des voies cellulaires spécifiques et se localisent sur des compartiments cellulaires spécifiques. Comme les autres petites protéines G, elles basculent entre une forme inactive liée au GDP et une forme active liée au GTP, et fonctionnent ainsi comme des interrupteurs moléculaires. L’échange du GDP en GTP, responsable de l’activation de la protéine Arf, est catalysé par des facteurs d’échanges. Ces facteurs d’échanges constituent une famille très diversifiée mais ont tous en commun un domaine catalytique responsable de la réaction d’échange : le domaine Sec7. Les familles BIG et GBF des grands facteurs d’échanges ont été peu étudiées. Ils possèdent de nombreux domaines de part et d’autres du domaine catalytique dont les fonctions à l’heure actuelle sont encore méconnues. Mon travail de recherche a porté sur ces deux familles BIG et GBF des grands ArfGEFs. La mise au point d’une stratégie de clonage et d’expression nous a permis de purifier les domaines DCBBIG1, Sec7BIG1, Sec7GBF1 et DCBHUSSec7BIG1 DCB. Nous avons montré que le domaineBIG1 responsable in vitro de la dimérisation est formant un homodimère ou un homotétramère. Les domaines Sec7BIG1 DCBHUSSec7 etBIG1 une présentent activité d’échange spécifique envers les Arfs de classe I et II et aucune activité envers Arf6 et que la bréfeldine A inhibe ce processus d’échange. Les domaines non catalytiques DCB/HUSBIG1 ne semblent pas avoir un rôle sur l’activité catalytique du domaine Sec7BIG1 car en évidence. Les aucune autorégulation n’a pu être mise domaines DCB et HUS n’auraient donc pas de fonction régulatrice dans l’activité d’échange des protéines Arfs. Leur implication se situerait plus dans des fonctions de localisation ou de plateformes d’interaction avec des partenaires cellulaires.     MOTS-CLES : facteurs d’échanges, BIG, GBF, domaines, Arfs TABLE DES MATIÈRES