MINISTÈRE DE L'ENSEIGNEMENT ET DE LA RECHERCHE

Marie Chanal

Description

Niveau: Secondaire, Lycée, Première

• mémoire

MINISTÈRE DE L'ENSEIGNEMENT ET DE LA RECHERCHE ÉCOLE PRATIQUE DES HAUTES ÉTUDES Sciences de la Vie et de la Terre MÉMOIRE présenté par Marie CHANAL Pour l'obtention du diplôme de l'École Pratique des Hautes Études Macrophages/Microglie et formes progressives dans la sclérose en plaques Analyse histologique et moléculaire Soutenu le 1er octobre 2010 devant le jury suivant : Pr Françoise TROUSSE - Président du jury Dr Marie-Thérèse ZABOT - Rapporteur Dr Pascale GIRAUDON - Examinateur Dr Serge NATAF - Examinateur Dr Mireille ROSSEL - Examinateur Mémoire préparé sous la direction de : Dr Serge NATAF () Laboratoire de Neuro-oncologie et Neuro-inflammation, faculté de médecine Laennec INSERM U842 LYON Directeur : Pr Jérôme HONNORAT Et de Dr Mireille ROSSEL () Laboratoire de Biologie Cellulaire Quantitative EPHE MONTPELLIER Directeur : Pr Norbert KOENING

• transmission de l'influx nerveux


• perte axonale diffuse dans la substance blanche d'apparence normale


• perte axonale diffuse


• analyse du transcriptome de macrophages


• microgliales exprimant le marqueur d'activation mhc


• marqueur des macrophages


• cellule présentatrice d'antigènes cx


• cellules gliales

Sujets

• Première
• Mémoire
• Honnorat
• Chanal
• Rossel
• Institut national de la santé et de la recherche médicale

Informations

• Publié par: davaj
• Date de parution: 01 octobre 2010
• Nombre de lectures: 67
• Langue: Français

Extrait

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MINISTÈRE DE LENSEIGNEMENT ET DE LA RECHERCHE  ÉCOLE PRATIQUE DES HAUTES ÉTUDES  Sciences de la Vie et de la Terre  MÉMOIRE   présenté  par  Marie CHANAL   Pour lobtention du diplôme de lÉcole Pratique des Hautes Études   Macro ha es/Micro lie et formes ro ressives dans la sclérose en la ues Analyse histologique et moléculaire

  Soutenu le 1 er octobre 2010 devant le jury suivant :  Pr Françoise TROUSSE- Président du jury Dr Marie-Thérèse ZABOT- Rapporteur Dr Pascale GIRAUDON- Examinateur Dr Serge NATAF- Examinateur Dr Mireille ROSSEL- Examinateur  Mémoire préparé sous la direction de :  Dr Serge [e-mail]) Laboratoire de Neuro-oncologie et Neuro-inflammation, faculté de médecine Laennec INSERM U842 LYON Directeur : Pr Jérôme HONNORAT  Et de  Dr Mireille ROSSEL ([e-mail]) Laboratoire de Biologie Cellulaire Quantitative EPHE MONTPELLIER Directeur : Pr Norbert KOENING

RÉSUMÉ

   La sclérose en plaques (SEP) est une pathologie inflammatoire chronique du système nerveux central (SNC) impliquant des interactions neuro-immunologiques de nature et dintensité variées. Chez les patients atteints dune forme progressive de SEP, la perte axonale diffuse est actuellement considérée comme lélément majeur du handicap neurologique irréversible. Limplication de linflammation diffuse dans le développement de cette perte axonale est fortement suspectée. Néanmoins la responsabilité respective des différentes composantes de limmunité nest pas clairement établie. Dans ce contexte, nous avons émis lhypothèse que chez les patients SEP, une altération globale du lignage myéloïde est responsable de modifications quantitatives et qualitatives des cellules macrphagiques/microgliales et de leurs précurseurs sanguins. Cette hypothèse a été testée en analysant par techniques immunohistologiques des coupes de moelle épinière dérivant de patients SEP puis en étudiant le profil ARN de macrophages dérivés du sang de patients SEP. Nos résultats sont les suivants : i) la perte axonale diffuse dans la substance blanche dapparence normale est corrélée à la densité de cellules macrophagiques/microgliales exprimant le marqueur dactivation MHC classe II dans la substance blanche dapparence normale ii) létude du phénotype des cellules CD68+ (marqueur des macrophages/microglie) montre la co-expression fréquente de la molécule CD34 (marqueur de progéniteurs hématopoiétiques) chez les patients SEP. iii) lanalyse du transcriptome des macrophages dérivant du sang de patients SEP a permis didentifier un profil ARN spécifique. En conclusion, nos résultats suggèrent chez les patients présentant une forme chronique de SEP un dysfonctionnement global du lignage myéloïde accompagne le développement dune perte axonale diffuse. Lorigine et les conséquences de ce dysfonctionnement restent à déterminer.  MOTS-CLES : Sclérose en plaques, macrophages/microglie, moelle épinière, neuro- inflammation, progéniteurs myéloides, CD34.

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II. 

Sommaire   Abréviations  p. 3  Introduction  5 p.  Rappels bibliographiques p. 8   I.    p. 9Les cellules du système nerveux central 1.   Les neurones 9 p. a)   Classification structurale des neurones   9 p. b)   Transmission de linflux nerveux p. 10 2.    p. 11Les cellules gliales a)    p. 11Caractéristiques générales b)    11 p.Les astrocytes c)   Les oligodendrocytes p. 13 3.   La microglie p. 15 a)    15 p.Origine de la microglie b)   Caractéristiques morphologiques et phénotypiques 18 p. c)    p. 21Fonctions de la microglie Les phagocytes mononuclées   23 p. 1.    p.Les macrophages tissulaires résidents 23 a)   Origine p. 24 b)   Fonctions p. 25 c)    25 p.Activation des macrophages 2.    p.Les macrophages du système nerveux central 26 a)    p.Les cellules périvasculaires 26 b)   Les macrophages et les cellules dendritiques associés aux plexus choroïdes et méninges p. 26 La sclérose en plaques p. 29 1.    29Clinique p. a)   Les symptômes neurologiques p. 29 b)    p. 30Lévolution de la SEP 2.    31Épidémiologie p. 3.   Diagnostic   p. 32 4.   Neuropathologie p. 32 a)    33 p.Les lésions démyélinisantes focales b)    34 p.La remyélinisation 5.    p. 34Hypothèses étiologiques a)   Rappels sur le statut immunitaire du SNC p. 35 b)   Hypothèse virale p. 37 c)   Hypothèse immune 37 p. Objectifs de travail p. 39

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III.  

IV. 

p. 41 p. 42 p. 42 p. 42 p. 44 p. 45 p. 45 p. 45 p. 46 p. 47 p. 51 

Matériel et Méthodes  I.   Neuropathologie sur tissu humain 1.   Histochimie 2.   ocstmihimuImhinoe 3.   Analyse quantitative II.   Analyse du transcriptome de macrophages dérivés de patients SEP 1.   Culture de macrophages 2.   Analyse moléculaire a)   Extraction ARN  b)   Vérification par RT et Q-PCR  Résultats  I.   Analyse de linfiltrat macrophagique/microglial dans la moelle épinière de patients SEP p. 52 1.   Relation entre la densité axonale et la réponse macrophagique/microgliale  p. 52 2.   Accumulation de macrophages/microglie dans le tissu nerveux de patients SEP p. 55 II.   à partir de macrophages dérivés de patients SEP sousAnalyse du transcriptome forme progressive p. 57  Discussion et Perspectives p. 65  Références bibliographiques  Annexes

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p. 68