MINISTERE DE L'EDUCATION NATIONALE

Pascale Pescher

Description

Niveau: Supérieur
MINISTERE DE L'EDUCATION NATIONALE ECOLE PRATIQUE DES HAUTES ETUDES Sciences de la Vie et de la Terre MEMOIRE présenté par Pascale Pescher pour l'obtention du diplôme de l'Ecole Pratique des Hautes Etudes TITRE: Réponses immunitaires contre les glycoprotéines Lip et Apa après immunisation de cobayes par le BCG. Essais de protection contre une infection par M. tuberculosis. soutenu le 6 février 2002 devant le jury suivant: Jeannin Jean-François - Président Gluckmann Jean-Claude - Rapporteur Seman Michel - Examinateur Alonso Jean-Michel - Examinateur Marchal Gilles – Examinateur EPHE Banque de Monographies SVT 1

• plasmides codant la molécule


• réponse humorale


• bcg vivant


• plasmide


• lip


• tfms acide


• protéine de choc thermique


• anhydride d'acide dodécanoïque


• apa

Sujets

• Tuberculosis
• Institut Pasteur
• Plasmide

Informations

• Publié par: chaeh
• Publié le: 01 février 2002
• Nombre de lectures: 37
• Langue: Français

Extrait

 

      MINISTERE DE L'EDUCATION NATIONALE     ECOLE PRATIQUE DES HAUTES ETUDES Sciences de la Vie et de la Terre     MEMOIRE     présenté par   Pascale Pescher  

      pour l'obtention du diplôme de l'Ecole Pratique des Hautes Etudes       TITRE: Réponses immunitaires contre les glycoprotéines Lip et Apa après immunisation de cobayes par le BCG. Essais de protection contre une infection parutebM .sosicrlu.         soutenu le 6 février 2002 devant le jury suivant:    Jeannin Jean-François - Président  Gluckmann Jean-Claude Rapporteur   -  Seman Michel - Examinateur  Alonso Jean-Michel - Examinateur Marchal Gilles  Examinateur      

  Laboratoire de l'E.P.H.E. (Sciences de la Vie et de la Terre): Immuno -hématologie Hôpital Saint Antoine 184 rue du faubourg Saint Antoine 75012 Paris Directeur: Gluckmann Jean-Claude [e-mail] Laboratoire de l'Institut Pasteur: Laboratoire de Référence des Mycobactéries 25 rue du Docteur Roux 75015 Paris Directeur: Marchal Gilles [e-mail]                                                                  REPONSES IMMUNITAIRES CONTRE LES GLYCOPROTEINES LIP ET APA APRES IMMUNISATION DE COBAYES PAR LE BCG. ESSAIS DE PROTECTION CONTRE UNE INFECTION PARUB TM..SISOLUCRE

 

Pascale Pescher   le 6 février 2002   RESUME   Les molécules Lip et Apa sont des protéines mannosylées sécrétées par Mycobacterium tuberculosis ou Mycobacterium bovis BCG. La réponse humorale développée uniquement contre Apa est faible et apparaît principalement lorsque les cobayes sont immunisés par le BCG vivant ou tué par lyophilisation et très faiblement lorsque les bacilles sont tués par autoclavage. Par contre, seuls les animaux immunisés par le BCG vivant quelle qu'en soit la voie d'injection sont capables de reconnaître ces molécules dans un test in vivo d'hypersensibilité retardée (HSR). De même, lanalyse in vitro montre que les Ags solubles Lip et Apa stimulent la prolifération des ' cellules ganglionnaires de cobayes immunisés par le BCG vivant. Les autres modes de présentation des molécules tels que le choc osmotique ou l'emploi de billes de latex recouvertes d'Ags se sont révélés inefficaces. Les cellules support de cette réponse proliférative sont presque exclusivement des lymphocytes CD4 +  14 jours, 28 à jours ou 6 mois après l'injection des bactéries. Des cellules T CD8 +  n’apparaissent qu’en faible proportion et de manière transitoire à 28 jours. De plus, ces spécifiques mêmes animaux développent une réponse cytolytique contre Apa. Quatorze jours après l'immunisation par le BCG, les cellules effectrices cytolytiques sont majoritairement des lymphocytes CD4 +  dans une moindre et mesure des lymphocytes CD8 +  alors, qu'après 28 jours, la réponse est exclusivement le fait des cellules T CD4 + nodes tests in vivap relB GCd na so trro(pfélitiraH( o )RSi teiv nerocul stnp  eoses n ellées,osyl sésinummi xuamians ler pas uennéd tcylgapA nos Lie etp Lo. qurs ou cytotoxicité). Par contre, la molécule Apa glycosylée ou non glycosylée est reconnue lorsqu’elle est injectée à des cobayes immunisés par un plasmide codant la protéine Apa. Les immunisations de cobayes avec Apa selon différents protocoles, ou bien avec des plasmides codant la molécule, induisent une réponse humorale et cellulaire sans toutefois protéger les animaux contre une infection ultérieure par M. tuberculosis. De même, l'injection d'un plasmide codant la protéine Pro   (Rv1796) contenant le peptide Lip permet aux cobayes de développer une réponse cellulaire de type HSR mais ne confère aucune protection contre la tuberculose.

   

Liste des abréviations 4

INTRODUCTION 5

1- T OSULRCBEUE : UNE   LONGUE   IHRESTOI   ET   TOUJOURS   UOPAECUB   DE   EMVSCIIT  6 2- D U   GNOSDIAITC   DE   LA   EBCRUTEOSUL   AU   EMITRATTNE  7 3- D E   L ' INFECTION   À   LA   MALADIE  8 4- M ÉCANISMES   D ' ONTIIFNCE   ET   RÉPONSES   MMITINUERIAS  8 4-1 Voies d'entrée deM. tuberculosisdans les cellules phagocytaires 9 4-2 Immunité innée 9 4-3 Immunité cellulaire 10 5- V ANICNOITCA   PAR   LE BCG ET   NOUVEAUX   VACCINS  11

PRESENTATION DU PROJET 15

1- O BJECTIFS  16 2- A ITNSGÈNE   SÉCRÉTÉS : L IP   ET A PA  16 2-1 Lip                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                 16 2-2 Apa                                                                                                                                                                                                                                                                                                                              17 3- M ODÈLE   NEMILATERÉPX  18 3-1 Choix du modèle animal                                                                                                                                                                                                                                                                        18 3-2 Analyse de la réponse immunitairein vivo 19 3-3 Analyse de la réponse cellulairein vitro 20 3-4 Analyse de l'effet de la glycosylation de Lip et Apa sur la réponse immunitaire 21 3-5 Lip ou Apa candidats vaccins 21