MINISTÈRE DE L'ÉDUCATION NATIONALE DE LA RECHERCHE ET DE LA TECHNOLOGIE

Nolwenn Dubois

Description

Niveau: Supérieur

• mémoire

MINISTÈRE DE L'ÉDUCATION NATIONALE DE LA RECHERCHE ET DE LA TECHNOLOGIE ÉCOLE PRATIQUE DES HAUTES ETUDES Sciences de la Vie et de la Terre MEMOIRE Présenté par Nolwenn DUBOIS Pour l'obtention du diplôme de l'Ecole Pratique des Hautes Etudes OPTIMISATION DE L'ANALYSE DES ACIDES GRAS PAR CHROMATOGRAPHIE EN PHASE GAZEUSE (CPG) : Application à l'étude de lipides naturels complexes Soutenu le 9novembre 2005 : Devant le jury suivant : -Monsieur Marc CHEVREUIL - Président de jury et rapporteur -Monsieur Alain VAN WORMHOUDT - Examinateur -Monsieur Gilles BARNATHAN - Examinateur - Monsieur Jean-Pascal BERGE – Examinateur Laboratoire Evolution Moléculaire et Adaptation Directeur : Dr A. Van Wormhoudt Station de Biologie Marine BP 225 29182 CONCARNEAU Laboratoire de Sciences et Techniques Alimentaires Marines Directeur : Dr J.L. Vallet IFREMER, Centre de Nantes Maître de stage : Jean-Pascal BERGÉ BP 21105 44311 NANTES Cedex 3 RÉSUMÉ EPHE Banque de Monographies SVT 1

• lipide


• lipidiques issues de matrices marines


• gras polyinsaturés


• acide gras


• position sur la chaîne grasse


• matrices marines


• chromatographie sur couche mince


• chromatographie en phase gazeuse

Sujets

• Mémoire
• Dubois

Informations

• Publié par: chaeh
• Publié le: 01 novembre 2005
• Nombre de lectures: 106
• Langue: Français

Extrait

         

MINISTÈRE DE L’ÉDUCATION NATIONALE DE LA RECHERCHE ET DE LA TECHNOLOGIE   ÉCOLE PRATIQUE DES HAUTES ETUDES Sciences de la Vie et de la Terre

MEMOIRE

Présenté par   Nolwenn DUBOIS   Pour l’obtention du diplôme de l’Ecole Pratique des Hautes Etudes

    OPTIMISATION DE L’ANALYSE DES ACIDES GRAS PAR CHROMATOGRAPHIE EN PHASE GAZEUSE (CPG) : Application à l’étude de lipides naturels complexes       Soutenu le 9novembre 2005 :     Devant le jury suivant :   -Monsieur Marc CHEVREUIL -Président de jury et rapporteur -Monsieur Alain VAN WORMHOUDT -Examinateur -Monsieur Gilles BARNATHAN -Examinateur - Monsieur Jean-Pascal BERGE –Examinateur   Laboratoire Evolution Moléculaire et Adaptation Directeur : Dr A. Van Wormhoudt Station de Biologie Marine [e-mail] BP 225 29182 CONCARNEAU     Laboratoire de Sciences et Techniques Alimentaires Marines Directeur : Dr J.L. Vallet IFREMER, Centre de Nantes Maître de stage : Jean-Pascal BERGÉ BP 21105 [e-mail] 44311 NANTES Cedex 3 RÉSUMÉ

  L’analyse et la purification des lipides en laboratoire sont en constante évolution grâce au perfectionnement de techniques anciennes et à la découverte de nouveaux procédés. Ces nouvelles méthodes misent au profit de la recherche et du développement permettent de trouver de nouvelles voies de valorisation pour des matrices inutilisées jusqu’alors. Les objectifs de ce travail sont d’une part, d’optimiser les techniques existantes de séparation et d’identification de composés lipidiques issues de matrices marines, et, d’autre part, de caractériser et valoriser certaines de ces matrices marines.   Ce travail a permis de réaliser la comparaison de la réponse de deux types de dérivés différents, les esters méthyliques d’acides gras (EMAG) et les picolinyl esters, lors de leur analyse par chromatographie en phase gazeuse. Au cours de cette étude, nous avons également pu déterminer les différentes caractéristiques, ainsi que les limites des deux modes de détection couplés au chromatographe. La ionisation de flamme est apparue comme un procédé moins puissant que la spectrométrie de masse. En effet, les spectres de masse constitués par des fragmentations caractéristiques des molécules, au cours de l’impact électronique, permettent dans la grande majorité des cas d’identifier les composés analysés. Dans certains cas (tel que l’analyse des composés fortement polyinsaturés ou ramifiés avec les EMAG), il est impossible de conclure sur la nature de la molécule. Deux solutions sont alors possibles. D’autres dérivés, comme les picolinyl esters, peuvent alors être utilisés. Ces derniers du fait de la présence d’un cycle contenant une fonction azotée dans leur structure, présentent une bien meilleure réponse par spectrométrie de masse. Ils permettent d’identifier avec certitude tous les composés qu’ils soient saturés, ramifiés, ou hydroxylés. Dans le cas ou un doute subsiste, les valeurs des LCE et des LCF permettent d’aider à conclure sur la nature de tel ou tel composé. La valeur de ces dernières est caractéristique du nombred’insaturations, de ramification, mais également de leur position sur la chaîne grasse, et de leur nature.   Enfin, le travail réalisé sur des échantillons fournis par un industriel, ainsi que sur des foies de raies, nous a permis de valider les méthodes et les conclusions auxquelles nous avons abouti au cours de la première partie de ce travail. L’extrait lipidique des foies de raies s’est révélé être très riche en composés d’intérêt. Parmi ces derniers, nous avons identifié des acides gras polyinsaturés (DHA et EPA), de grosses quantités de cholestérol marin, et surtout l’existence d’éthers de glycérols. Ces derniers présents avec une grande variété de types structuraux ont été analysés, puis testés afin d’évaluer leur activité antitumorale.     Mots clés : Lipides, acides gras, chromatographie en phase gazeuse, spectrométrie de masse, esters picolinyques, esters méthyliques d’acides gras, coproduits, éthers de glycérols. Table des matières       LISTE DES ABREVIATIONS INTRODUCTION GÉNÉRALE GENERALITES I         Rappels sur les lipides greffés avec des acides gras   I.1          Définition I.2          Les acides gras I.3          Les lipides simples I.3.1       Les glycérides ou acylglycérols