MINISTERE DE L'EDUCATION NATIONALE

Sylvain Perruche

Description

Niveau: Supérieur, Master, Bac+5
MINISTERE DE L'EDUCATION NATIONALE ECOLE PRATIQUE DES HAUTES ETUDES Sciences de la Vie et de la Terre MEMOIRE APPROCHE CELLULAIRE ET GENIQUE POUR MODULER LA TOXICITE DE LA GREFFE DE CELLULES SOUCHES HEMATOPOIETIQUES ALLOGENIQUES présenté par Sylvain PERRUCHE pour l'obtention du diplôme de l'Ecole Pratique des Hautes Etudes Soutenu le 18 Octobre 2001 devant la commission d'examen suivante : Mme Geneviève CORDIER- Présidente Mr Jean-François JEANNIN- Rapporteur Mr Philippe SAAS - Examinateur Mme Estelle SEILLES - Examinateur Laboratoire de Thérapeutique Directeur : Mr P. Saas Immunomoléculaire mél : INSERM E 0119, EA 2284 Etablissement Français du Sang de Bourgogne Franche-Comté 1, Bd A. Fleming, 25020 BESANCON CEDEX Laboratoire d'Immunologie et Directeur : Mr JF. Jeannin Immunothérapie des Cancers mél : jfjeanni@u- EPHE Banque de Monographies SVT 1

• host versus graft


• prise de greffe


• tk cultivés


• cellules apoptotiques


• hsv-tk


• injection de cellules


• greffe de cellules souches hématopoïétiques


• production d'autoanticorps igg

Sujets

• Université de Bourgogne
• Fleming
• Perruche
• Institut national de la santé et de la recherche médicale
• Transplant rejection

Informations

• Publié par: profil-afte-2012
• Publié le: 01 octobre 2001
• Nombre de lectures: 68
• Langue: Français

Extrait

 

MINISTERE DE L'EDUCATION NATIONALE     ECOLE PRATIQUE DES HAUTES ETUDES   Sciences de la Vie et de la Terre     MEMOIRE   APPROCHE CELLULAIRE ET GENIQUE POUR MODULER LA TOXICITE DE LA GREFFE DE CELLULES SOUCHES HEMATOPOIETIQUES ALLOGENIQUES     présenté par   Sylvain PERRUCHE     pour l'obtention du diplôme de l'Ecole Pratique des Hautes Etudes     Soutenu le 18 Octobre 2001 devant la commission d'examen suivante :   Mme Geneviève CORDIER- Présidente Mr Jean-François JEANNIN- Rapporteur Mr Philippe SAAS - Examinateur Mme Estelle SEILLES - Examinateur

      Laboratoire de Thérapeutique Directeur : Mr P. Saas Immunomoléculaire mél : [e-mail] INSERM E 0119, EA 2284 Etablissement Français du Sang de Bourgogne Franche-Comté 1, Bd A. Fleming, 25020 BESANCON CEDEX   Laboratoire d'Immunologie et Directeur : Mr JF. Jeannin Immunothérapie des Cancers mél : jfjeanni@u-

bourgogne.fr Université de Bourgogne, Faculté de Médecine 7, Bd J. d'Arc, 21000 DIJON RESUME   L'étude des mécanismes immunologiques impliqués dans la prise d'un greffon de cellules souches hématopoïétiques allogéniques nécessite la mise en place et la validation d'un modèle expérimental. Ce modèle nécessite la validation de deux paramètres essentiels : (1) le conditionnement "pré-greffe" consistant en une irradiation corporelle totale sublétale à 6 Gy, qui permet une reprise hématopoïétique autologue, (2) le nombre de cellules médullaires de 0,3x10 e 6 cellules/souris pour étudier l'effet de lymphocytes T ("frais" ou cultivés) et de 10 e 6 cellules/souris pour étudier le rôle des leucocytes apoptotiques. Les lymphocytes T TK cultivés sont issus de souris transgéniques et cultivés 12 jours afin de mimer le protocole d'obtention de lymphocytes T (LT) humains génétiquement modifiés utilisés en clinique. Les lymphocytes T "frais" TK sont simplement issus de souris transgéniques, sans période de culture. Nous avons confirmé que les lymphocytes T TK cultivés seraient moins alloréactifs que des lymphocytes T TK "frais". Un traitement par ganciclovir (GCV) [permettant d'éliminer spécifiquement les lymphocytes T TK alloréactifs responsables de la survenue de la maladie du greffon contre l'hôte (GvH)] influencerait la prise de greffe induite par les LT cultivés mais pas celle de LT "frais". Le GCV n'élimine pas tous les lymphocytes T TK circulants. L'injection de cellules apoptotiques simultanément au greffon favorise la prise de greffe sans induire de GvH. Nous avons évalué la toxicité potentielle liée à l'injection de cellules apoptotiques car elles pourraient être responsables du déclenchement de pathologies autoimmunes. La prise de greffe facilitée par l'addition de cellules apoptotiques induirait la production d'autoanticorps IgG anti-ADN simple brin, alors que le rejet de greffe est corrélé à une production d'Ac anti-MO du donneur. En revanche, l'injection de cellules apoptotiques n'induit pas de lésions glomérulaires macroscopiques ni de dépôts de complexes immuns au niveau des glomérules (lésions typiques des lupus érythemateux disséminés et associées à la production d'autoanticorps). En conclusion, l'injection de cellules apoptotiques conjointement au greffon médullaire favorise la prise de greffe sans induire de GvH aiguë mais pourrait favoriser l'apparition de certains stigmates d'autoimmunité. Les perspectives de ce travail consisteront à étudier d'autres paramètres d'autoimmunité, comme les anticorps anticardiolipines qui seraient plus sensibles, et évaluer l'effet sur la GvH chronique.      

TABLE DES MATIERES

    INTRODUCTION   1. Greffe de cellules souches hématopoïétiques allogéniques                                    1                                    1.1. Rôles bénéfique et néfaste des lymphocytes T lors de 1  la greffe allogénique de cellules souches hématopoïétiques 1.2. Nouvelles approches pour moduler l'alloréactivité 2 1.2.1- Les immunosuppresseurs chimiques 3 1.2.2- La déplétion des lymphocytes T du greffon 4 1.2.3- L'approche gène "suicide" 5 1.2.3.1-Présentation de l'approche gène "suicide" 5       thymidine kinase 1.2.3.2-Résultats obtenus dans une étude clinique 5 de phases I/II 1.2.3.3- Résultats obtenus dans les modèles 6 expérimentaux 1.2.4 - L'induction d'une hyporéactivité au cours 7 d'une culture mixte lymphocytaire 1.2.5- Le potentiel modulateur de l'alloréactivité 9 des cellules apoptotiques : effet bénéfique sur la prise de greffe

  2. Mécanismes immunologiques impliqués dans la maladie 9 du greffon contre l'hôte, la prise et le rejet du greffon allogénique de cellules souches hématopoïétiques   2.1. Mécanismes immunologiques impliqués dans la prise 9 et le rejet du greffon de cellules souches hématopoïétiques 2.2. Mécanismes immunologiques impliqués dans la maladie 11 du greffon contre l'hôte ou GvH