DynamicsofthepreproteintranslocaseofthemitochondrialoutermembraneVonderFakultätfürGeo undBiowissenschaftenderUniversitätStuttgartzurErlangungderWürdeeinesDoktorsderNaturwissenschaften(Dr. rer. nat)genehmigteAbhandlungvorgelegtvonMelissaAnnPoynorausEmmeloord,NLHauptberichter: Prof. Dr. S.NußbergerNebenberichter: PD.Dr. R.EckertTagdermündlichenPrüfung: 28.01.2008BiologischesInstitut,AbteilungBiophysikDezember2007Ich erkläre hiermit, dass ich die vorliegende Arbeit selbstständig verfasst habeundkeineanderenalsdieangegebenenQuellenundHilfsmittelbenutzthabe.Stuttgart,den17.12.2007ForEthelPoynorContents1 Zusammenfassung 52 Summary 73 Introduction 93.1 Mitochondria–aspecializedcompartmentsurroundedbyabarrier 93.2 Proteintranslocationintomitochondria . . . . . . . . . . . . . . . . 113.3 TheTOMcomplex . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 153.3.1 ComponentsoftheTOMcomplex . . . . . . . . . . . . . . . 163.3.2 Structural and electrophysiological properties of the poreformedbytheTOMmachinery . . . . . . . . . . . . . . . . . 193.3.3 TranslocationmechanismoftheTOMmachinery . . . . . . 203.4 Aimofthisstudy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 214 MaterialandMethods 234.1 Generalequipment . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 234.2 Neurosporacrassaculture . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 234.2.1 N.crassastrainsandgrowthmedia . . . . . . . . . . . . . . . 244.2.2 N.