Thèse de Doctorat de l'Ecole Pratique des Hautes Etudes

Géraldine Descamps

Description

Niveau: Supérieur, Doctorat, Bac+8
Thèse de Doctorat de l'Ecole Pratique des Hautes Etudes Sciences de la Vie et de la Terre Spécialité : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Présentée par Géraldine DESCAMPS Pour obtenir le grade de DOCTEUR DE L'EPHE IMPACT DU CD45 SUR LA VOIE DE SIGNALISATION DE L'IGF-1R DANS LES CELLULES DE MYELOME MULTIPLE Date de soutenance : 9 novembre 2006, devant le jury composé de : Président du jury Mr. B. CANQUE, Professeur de l'EPHE Rapporteur Mme K. VANDERKERKEN, Professeur de l'Université de Bruxelles Rapporteur Mr F. BLANCHARD, Chargé de Recherche INSERM Examinateur Mme C. VENOT, Chercheur à Sanofi-Aventis Examinateur Mme M. AMIOT, Directeur de Recherche à l'INSERM U601 Directeur de thèse Mr S. RICHARD, Professeur de l'EPHE INSERM U601 - Département de Recherches en Cancérologie – 9, quai Moncousu - 44093 NANTES Cedex 01. Directeur scientifique : M. AMIOT : Laboratoire de Génétique Oncologique EPHE - Faculté de Médecine Paris-Sud - 94276 LE KREMLIN-BICETRE. Tuteur pédagogique EPHE : S. RICHARD : Résumé EPHE Banque de Monographies SVT 1

• cd45


• cellule


• kinase de l'igf


• factor


• based activation


• voie de la pi


• igf


• biologie du myélome multiple


• région des chaînes lourdes du gène des immunoglobulines


• protéine tyrosine phosphatase

Sujets

• Descamps
• Institut national de la santé et de la recherche médicale
• Blanchard
• Richard
• Cellule
• Factor

Informations

• Publié par: profil-feym-2012
• Publié le: 01 novembre 2006
• Nombre de lectures: 58
• Langue: Français

Extrait

Thèse de Doctorat
de l’Ecole Pratique des Hautes Etudes

Sciences de la Vie et de la Terre
Spécialité : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie

Présentée par

Géraldine DESCAMPS


Pour obtenir le grade de
DOCTEUR DE L’EPHE



IMPACT DU CD45 SUR LA VOIE DE
SIGNALISATION DE L’IGF-1R DANS LES
CELLULES DE MYELOME MULTIPLE


Date de soutenance : 9 novembre 2006, devant le jury composé de :


Président du jury Mr. B. CANQUE, Professeur de l’EPHE
Rapporteur Mme K. VANDERKERKEN, Professeur de l’Université de Bruxelles Mr F. BLANCHARD, Chargé de Recherche INSERM
Examinateur Mme C. VENOT, Chercheur à Sanofi-Aventis
Examinateur Mme M. AMIOT, Directeur de Recherche à l’INSERM U601
Directeur de thèse Mr S. RICHARD, Professeur de l’EPHE


INSERM U601 - Département de Recherches en Cancérologie – 9, quai Moncousu - 44093 NANTES Cedex 01. Directeur
scientifique : M. AMIOT : [e-mail]
Laboratoire de Génétique Oncologique EPHE - Faculté de Médecine Paris-Sud - 94276 LE KREMLIN-BICETRE. Tuteur
pédagogique EPHE : S. RICHARD : [e-mail]

Résumé


EPHE Banque de Monographies SVT 1IMPACT DU CD45 SUR LA VOIE DE SIGNALISATION DE L’IGF-1R DANS LES
CELLULES DE MYELOME MULTIPLE


Le Myélome Multiple (MM) se définit comme une expansion plasmocytaire maligne,
atteignant principalement la moelle osseuse. Un des facteurs essentiels de leur survie et de leur
prolifération est l’interleukine-6. A ce jour, une autre cytokine prend de l’importance dans la survie et
la croissance des cellules myélomateuses : l’IGF-1 (insulin-like growth factor). Deux voies distinctes
sont activées par l’IGF-1 : la voie MAPK et la voie PI-3K.
Le CD45 est une phosphatase transmembranaire perdue au cours de la différenciation B
+ faible/negnormale. Dans le MM, 20% des cellules sont CD45 et 80% des cellules sont CD45 .
faible/negL’expression du CD45 dans le compartiment CD45 est négative chez 30% des patients au
diagnostic. Ces derniers sont caractérisés par une moyenne de prolifération élevée dans chaque
-compartiment CD45 et ont un mauvais pronostic : les cellules CD45 sont plus résistantes à
-l’apoptose et continuent à proliférer. En effet, les cellules de MM CD45 sont non seulement capables
faiblede proliférer mais sont souvent plus proliférantes que les cellules de MM CD45 . Dans la lignée
U266, il a été démontré que le CD45 inhibe la transduction du signal et que l’expression du CD45 est
augmentée par l’IL-6. De nombreuses études ont démontré qu’il pouvait y avoir une relation directe
ou indirecte entre la phosphatase CD45 et l’IGF-1R. Notre étude a pour but d’éclaircir ce lien dans
les cellules de MM.
Nous avons mis en évidence que toutes les lignées de MM expriment l’IGF-1R. Nous avons
-démontré que la prolifération des cellules de MM CD45 est dépendante de l’IGF-1 et de la voie PI-
3K/Akt alors que cette voie n’a que très peu d’influence sur la prolifération des cellules de MM
+CD45 , dépendante de l’IL-6. Nous avons pour la première fois démontré que le CD45 et l’IGF-1R
étaient physiquement associés dans les cellules de MM.
Le développement d’agents anti-cancéreux est une piste thérapeutique prometteuse pour le
MM, toujours incurable par les traitements conventionnels. Nous avons démontré que l’AVE1642, un
-anticorps humanisé anti-IGF-1R, inhibe la prolifération des cellules de MM CD45 en bloquant leur
+cycle en G1, sans induire d’apoptose. Cet anticorps n’a que très peu d’effet sur les cellules CD45 .
+L’augmentation de l’expression de l’IGF-1R dans une lignée CD45 n’est pas suffisante pour rendre
ces cellules sensibles à l’AVE1642 démontrant l’importance de la balance kinase/phosphatase dans la
prolifération des cellules de MM. Nous avons démontré que le CD45 est responsable de l’insensibilité
des cellules de MM à l’AVE1642. Nous avons également démontré que l’AVE1642 potentialise les
-effets du bortezomib, utilisé dans le traitement conventionnel du MM, sur les cellules de MM CD45 .
-Une lignée CD45 résistante au bortezomib devient sensible à cet inhibiteur du protéasome en
-présence de l’AVE1642. La sensibilité des cellules de MM CD45 à l’AVE1642 permet de diminuer
les doses de bortezomib qui, à une concentration supérieure à 10nM est toxique chez les patients. Ces
travaux offrent de nouvelles perspectives thérapeutiques pour le MM. Grâce à la combinaison de
l’AVE1642 et du bortezomib, une véritable approche individualisée du malade est développée puisque
-le traitement serait bénéfique pour le patient CD45 dont le MM est le plus agressif.




Table des matières.

Liste des abréviations.
EPHE Banque de Monographies SVT 2Biologie du Myélome Multiple
I- Généralités
I-1. Origine du Myélome Multiple
I-2. Oncogenèse
I-3. Les traitements du Myélome
I-3-1. Généralités
I-3-2. Le bortezomib
II- Interaction des cellules tumorales avec leur environnement
II-1. Facteurs de croissance et cytokines dans le MM
II-1-1. L’Interleukine-6 (IL-6)
II-1-2. Autres cytokines de la famille IL-6, et IL-10
II-1-3. L’Insulin-like Growth Factor-1 (IGF-1)
II-1-4. Le Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF)
II-1-5. Famille du Tumor Necrosis Factor a (TNF-a)
II-1-5-1. Le TNF-a
II-1-5-2. Le couple CD40/CD40 ligand
II-1-5-3. Le B-cell activating factor BAFF et a proliferation-inducing ligand APRIL
II-1-6. Le basic fibroblast growth factor (bFGF)
II-1-7. Les facteurs inhibant la prolifération des cellules de MM
II-1-7-1. L’interféron g (IFN-g) et l’interféron b (IFN-b)
II-1-7-2. La protéine Fas/APO-1/CD95
II-1-8. L’interféron a (IFN-a)
II-2. Les voies de signalisation dans le Myélome Multiple
II-2-1. Activation de la voie JAK/STAT
II-2-2. de la voie Ras/MAPK
II-2-3. Activation de la voie PI-3K/Akt
II-2-4. de la voie NF-kB
III- La phosphatase CD45 dans le Myélome Multiple
III-1. Généralités
III-1-1. Structure du gène de la phosphatase CD45
III-1-2. Fonctions du CD45
III-1-2-1. Le CD45 dans le développement des L , signaling et fonctionT
III-1-2-2. Modulation des PTK de la famille src par le CD45
III-1-2-3. Le CD45 dans les LB
III-2. Expression du CD45
III-3. Le CD45, régulateur positif de la prolifération IL-6 des cellules de
MM
III-4. Le CD45 comme facteur pronostic du MM
EPHE Banque de Monographies SVT 3IV- Le couple IGF-1/IGF-1R dans le Myélome Multiple
IV-1. Propriétés et rôles des ligands de la famille IGF
IV-2. L’Insulin-like growth factor-1 receptor IGF-1R
IV-2-1. Structure et fonction de l’IGF-1R
IV-2-1-1. Structure du gène de l’IGF-1R
IV-2-1-2. L’ARN messager
IV-2-1-3. Le Promoteur du gène de l’IGF-1R
IV-2-1-4. La structure de l’IGF-1R
IV-2-2. Signalisation de l’IGF-1R
IV-3. Le couple IGF-1/IGF-1R dans le Myélome
IV-4. L’IGF-1R comme cible thérapeutique
IV-4-1. Les anticorps anti-IGF-1R
IV-4-2. Les molécules inhibitrices de l’activité tyrosine kinase de l’IGF-1R
IV-4-3. Les peptides antagonistes de l’IGF-1
IV-4-4. Cibler l’internalisation et le recyclage de l’IGF-1R
IV-4-5. Les stratégies antisens
IV-4-6. Les mutants IGF-1R dominants négatifs
V. Conclusion
Liste des abréviations.

aa : acides aminés
Ac : anticorps
ADN : acide désoxyribonucléique
APRIL : a proliferating-inducing ligand
ARN : acide ribonucléique
ARNm : ARN messager
BAFF : B-cell activating factor
BCMA : B-cell maturation antigen
BCR : B cell receptor
bFGF : basic fibroblast growth factor
CNTF : ciliary neutrophic factor
Del13 : délétion du chromosome 13
Erk : extracellular signal-related kinase
FISH : hybridation in situ en fluorescence
FGFR3 : fibroblast growth factor receptor 3
ICAM-1 : intracellular adhesion molecule-1
IFN-a, -b, -g : interféron-a, -b, -g
IGF-1 : Insulin-like Growth Factor-1
IGF-1R : récepteur de l’IGF-1
IGFBP : insulin-like growth factor binding protein
Ig : immunoglobuline
IgH : région des chaînes lourdes du gène des immunoglobulines
IL- : interleukine-
EPHE Banque de Monographies SVT 4IL-6 : interleukine-6
IL-6R : récepteur de l’interleukine-6
ITAMs : immunoreceptor tyrosine-based activation motifs
ITIMs :-based inhibitory motif
IR : insulin receptor
JAK : Janus kinase
JNK : c-Jun NH -terminal kinase2
LFA-1 : lymphocyte function-associated antigen-1
LIF : leukemia inhibitory factor
L : lymphocyte BB
L : TT
MAPK : mitogen activated protein kinase
MCP-1 : monocyte c