INFLUENCIA DE LA CRIOPRESERVACIÓN SOBRE LA MOTILIDAD, VIABILIDAD Y FERTILIDAD DE ESPERMATOZOIDES DE LLAMA ( LAMA GLAMA) (INFLUENCE OF CRYOPRESERVATION ON THE MOTILITY, VIABILITY AND FERTILITY OF LLAMA ( LAMA GLAMA) SPERMATOZOA)

Aller J.F.

Description

Resumen
Los objetivos del presente trabajo fueron evaluar el efecto de la criopreservación sobre la motilidad y viabilidad de espermatozoides de llama y obtener gestaciones por medio de la inseminación artificial (IA) con semen congelado en hembras nacidas y adaptadas a la región de la Puna argentina. El trabajo se llevó a cabo en el Campo Experimental de Altura (CEA) del INTA de Abra Pampa (Provincia de Jujuy, Argentina) ubicado a una altitud de 3484 metros sobre el nivel del mar. Los parámetros espermáticos evaluados en el semen fresco y congelado/descongelado fueron la motilidad, viabilidad y fertilidad mediante un test de IA a campo. El porcentaje promedio (± d.e.) de espermatozoides mótiles y viables disminuyó significativamente (p<0,05) de 54, 3 ± 10,5 y 68,5 ± 12,3 p.100 en muestras de semen fresco a 20,4 ± 7,5 y 32,4 ± 10,5 p.100, respectivamente, en muestras congeladas/descongeladas. Un total de 38 hembras fueron tratadas con GnRH para inducir ovulación, sin previa observación ecográfica de la presencia de un folículo ovárico. La IA con semen congelado se realizó 24 horas después de la inducción de la ovulación. Las hembras de un grupo control (n=23) fueron inseminadas con semen fresco diluído. La tasa de gestación obtenida por IA con semen fresco (21,7 p.100) fue significativamente más alta (p<0,14) que la obtenida con semen congelado (7,9 p.100). Tres hembras resultaron preñadas por IA con semen congelado y esta es la primera comunicación en la Argentina. Se concluye que la criopreservación disminuye la calidad seminal llevando a una baja tasa de preñez.
Abstract
The objectives of the present work were to evaluate the effect of cryopreservation on the motility and viability llama spermatozoa and to obtain gestations by means of artificial insemination (AI) with frozen semen in females born and adapted at the argentinean Puna. This work was carried out at the Experimental Field of Altitude (INTA Abra Pampa, Argentina), wich is located at 3484 m above sea level. Motility, viability and fertility by means of AI field test were evaluated on fresh and frozen/thawed semen. The average percentage (± s.d.) of motile and viable spermatozoa declined significantly (p<0.05) from 54.3 ± 10.5 y 68.5 ± 12.3 p.100 in fresh samples to 20.4 ± 7.5 y 32.4 ± 10.5 p.100, respectively, in frozen-thawed samples. A total of 38 females were treated with GnRH to induce ovulation, without previous ovarian ultrasonography. The AI with frozen semen was carried out 24 h after ovulation induction. Twenty three females (control group) were artificially inseminated with diluted fresh semen. The pregnancy rate obtained by means AI with fresh semen (21.7 p.100) was significantly higher (p<0.14) than the pregnancy rate with frozen semen (7.9 p.100). Three females inseminated with frozen semen became pregnant and this is the first communication in Argentina. It is concluded that the cryopreservation decrease the seminal quality and therefore decrease the pregnancy rate.

Sujets

• Lama (género)
• Inseminación artificial
• Lama (genus)
• Artificial insemination

Informations

• Publié par: erevistas
• Publié le: 01 janvier 2003
• Nombre de lectures: 40
• Langue: Español

Extrait

INFLUENCIA DE LA CRIOPRESERVACIÓN SOBRE LA MOTILIDAD,
VIABILIDAD Y FERTILIDAD DE ESPERMATOZOIDES DE LLAMA
(LAMA GLAMA)
INFLUENCE OF CRYOPRESERVATION ON THE MOTILITY, VIABILITY AND FERTILITY
OF LLAMA ( ) SPERMATOZOA
1 2 2 1,3Aller, J.F., G.E. Rebuffi, A.K. Cancino y R.H. Alberio
1Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria EEA Balcarce. C.C. 276 (7620) Balcarce. Argentina.
2Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria CEA Abra Pampa. C.C. 9 (4640) Jujuy. Argentina.
3Facultad de Ciencias Agrarias. Universidad Nacional de Mar del Plata. Argentina.
PALABRAS CLAVE ADICIONALES ADDITIONAL KEYWORDS
Camélidos sudamericanos. Criopreservación de South American camelids. Cryopreservation of
semen. Inseminación artificial. semen. Artificial insemination.
RESUMEN
Los objetivos del presente trabajo fueron de un folículo ovárico. La IA con semen conge
evaluar el efecto de la criopreservación sobre la lado se realizó 24 horas después de la inducción
motilidad y viabilidad de espermatozoides de de la ovulación. Las hembras de un grupo control
llama y obtener gestaciones por medio de la (n=23) fueron inseminadas con semen fresco
inseminación artificial (IA) con semen congelado diluído. La tasa de gestación obtenida por IA con
en hembras nacidas y adaptadas a la región de semen fresco (21,7 p.100) fue significativamen
la Puna argentina. El trabajo se llevó a cabo en elte más alta (p<0,14) que la obtenida con semen
Campo Experimental de Altura (CEA) del INTA de congelado (7,9 p.100). Tres hembras resultaron
Abra Pampa (Provincia de Jujuy, Argentina) ubi preñadas por IA con semen congelado y esta es
cado a una altitud de 3484 metros sobre el nivel la primera comunicación en la Argentina. Se
del mar. Los parámetros espermáticos evalua concluye que la criopreservación disminuye la
dos en el semen fresco y congelado/desconge calidad seminal llevando a una baja tasa de
lado fueron la motilidad, viabilidad y fertilidad preñez.
mediante un test de IA a campo. El porcentaje
promedio (± d.e.) de espermatozoides mótiles y
viables disminuyó significativamente (p<0,05) de SUMMARY
54, 3 ± 10,5 y 68,5 ± 12,3 p.100 en muestras de
semen fresco a 20,4 ± 7,5 y 32,4 ± 10,5 p.100, The objectives of the present work were to
respectivamente, en muestras congeladas/des evaluate the effect of cryopreservation on the
congeladas. Un total de 38 hembras fueron tra motility and viability llama spermatozoa and to
tadas con GnRH para inducir ovulación, sin obtain gestations by means of artificial
previa observación ecográfica de la presencia insemination (AI) with frozen semen in females
Arch. Zootec. 52: 15 23. 2003.ALLER, REBUFFI, CANCINO Y ALBERIO
born and adapted at the argentinean Puna. This sido utilizados para la recolección de
work was carried out at the Experimental Field of semen en camélidos sudamericanos,
Altitude (INTA Abra Pampa, Argentina), wich is tales como fundas vaginales (Mogrovejo,
located at 3484 m above sea level. Motility, 1952), electroeyaculación(Fernández
viability and fertility by means of AI field test were Baca y Calderón, 1966) y vagina arti
evaluated on fresh and frozen/thawed semen. ficial con un maniquí (Sumar, 1991).
The average percentage (± s.d.) of motile and De todas las metodologías, la vagina
viable spermatozoa declined significantly (p<0.05) artificial es la técnica más utilizada en
from 54.3 ± 10.5 y 68.5 ± 12.3 p.100 in fresh el presente (Garnica et al ., 1993) favo
samples to 20.4 ± 7.5 y 32.4 ± 10.5 p.100,
recida por la utilización de hembras
respectively, in frozen thawed samples. A total
naturalmente receptivas (Aller et al.,
of 38 females were treated with GnRH to induce
1997a). A pesar que los primeros in
ovulation, without previous ovarian ultrasono
formes de IA provienen de la década
graphy. The AI with frozen semen was carried
del 60 (Fernández Baca y Novoa,
out 24 h after ovulation induction. Twenty three
1968), la técnica no ha sido suficiente
females (control group) were artificially
mente desarrollada hasta el presente
inseminated with diluted fresh semen. The
como para ser utilizada a mayor esca
pregnancy rate obtained by means AI with fresh
la, pero algunos ensayos con semensemen (21.7 p.100) was significantly higher
fresco han demostrado obtener una(p<0.14) than the pregnancy rate with frozen
aceptable tasa de gestación (De lasemen (7.9 p.100). Three females inseminated
Vega y Pérez, 1996; Aller et al ., 1997b;with frozen semen became pregnant and this is
Bravo et al., 1997; 1999).the first communication in Argentina. It is
Trabajos previos demostraron queconcluded that the cryopreservation decrease
the seminal quality and therefore decrease the la motilidad espermática varió de 10 a
pregnancy rate. 30 p.100 después de la descongelación
(McEvoy et al.,1992; Valdivia et al.,
1999; Burgel et al ., 1999). En cambio,
INTRODUCCIÓN muy poca información se encuentra
disponible sobre inseminación artificial
La inseminación artificial (IA) es a campo con semen congelado (Bravo
una técnica reproductiva ampliamente et al ., 1996). En este ensayo se obtuvo
utilizada en diversas especies domésti un 26,3 p.100 de gestación.
cas, por la cual el semen previamente Por lo tanto, los objetivos de este
procesado es depositado por el hombre trabajo fueron evaluar los efectos de la
en el aparato reproductor de la hembracongelación sobre la motilidad y viabi
en el momento oportuno. Escasos tra lidad espermática y obtener gesta
bajos de IA han sido publicados hasta ciones por medio de la inseminación
el presente en camélidos sudamerica artificial con semen congelado en lla
nos, debido quizás a la falta de una mas nacidas y adaptadas a las condi
metodología fiable de recolección de ciones climáticas y nutricionales del
semen y a las características seminales altiplano argentino, zona donde tradi
de alta viscosidad, baja motilidad y cionalmente se cría esta especie que
baja concentración espermática representa una de las fuentes de car
(Fowler, 1989). Diversos métodos han ne, cuero y fibra para la industria local.
Archivos de zootecnia vol. 52, núm. 197, p. 16.CRIOPRESERVACIÓN Y ESPERMATOZOIDES DE LLAMA ( LAMA GLAMA )
MATERIAL Y MÉTODOS con bolsa de polietileno en su interior
(Aller et al, 1997a) a una temperatura
LUGAR DE TRABAJO interna de 38ºC y una hembra natural
El ensayo se realizó en febrero y mente receptiva para la estimulación
marzo de 2001 en el Campo Experi del macho.
mental de Altura (CEA) del INTA de
Abra Pampa (Provincia de Jujuy, Ar RECOLECCIÓN Y EVALUACIÓN MICROSCÓ-
gentina) ubicado en el departamento PICA DEL SEMEN ( PERÍODO EXPERIMENTAL)
de Cochinoca (22º 49' latitud sur y 65º La recolección de semen se llevó a
47' longitud oeste) a una altitud de cabo con una frecuencia de 2 veces/
3484 metros sobre el nivel del mar. semana, en cada uno de los cuatro
Esta región presenta un régimen de machos, durante los dos meses del
lluvia de 300 350 mm anuales en la período experimental. De cada
temporada estival y el resto del año noeyaculado se determinó el volumen,
se registran precipitaciones. Las tem pH, motilidad individual y concentra
peraturas varían entre –20ºC y 14ºC ción espermática, dentro de los 15 mi
en invierno y entre 5ºC y 30ºC en nutos posteriores a la recolección. El
verano. El pasto natural está represen volumen fue directamente medido al
tado principalmente por la chillahua pasar el eyaculado a un tubo graduado
(Festuca scirpifolia), totorilla (Juncus y la motilidad individual fue estimada
balticus), pasto vicuña (Deyeuxia subjetivamente (p.100) al colocar 10
nardifolia), grama puneña (Distichlis microlitros de semen sin diluir entre
humilis) y achicoria ( Hipochoeris sp), porta y cubreobjeto sobre una platina
entre otras. térmica precalentada a 37ºC. La mues
tra fue observada a 400x. El pH fue
SELECCIÓN DE MACHOS ( PERÍODO PRE- determinado utilizando tiras de papel
EXPERIMENTAL) con un rango de ± 0,5. La concentra
Diez machos adultos (5 a 8 años deción espermática fue evaluada utili
edad) fueron adiestrados para la reco zando el hemocitómetro de Neubauer.
lección de semen durante 15 días. De La viabilidad espermática (vivos/tota
estos, seis animales demostraron alta les) fue medida por la técnica de colo
líbido y aceptaron la vagina artificial. ración de eosina nigrosina (coloración
Durante otro período de 15 días, a vital). Una gota de 30 microlitros de
estos seis machos se les realizó reco semen fue mezclada con 30 microlitros
lección de semen con una frecuencia del colorante sobre un portaobjetos
de 3 veces/semana hasta seleccionar precalentado a 37ºC y luego de 45
los machos que presentaron caracte segundos se realizó el frotis y se secó
rísticas seminales mínimas