L'inhibition de la voie Phosphoinositide-3 kinase (PI3K)/AKT induit un signal apoptotique via la redistribution du récepteur de mort CD95 dans les radeaux lipidiques

Mathieu Pizon

Description

Sous la direction de Patrick Legembre
Thèse soutenue le 22 juin 2010: Bordeaux 2
Le CD95 appartient à la famille du TNF-R. Il est capable de déclencher un signal apoptotique et joue un rôle prépondérant dans le maintien de l’homéostasie du système immunitaire et dans l’élimination de cellules infectées ou transformées. Suite à la fixation de son ligand le CD95L ou d’un anticorps agoniste, le CD95 recrute la protéine FADD, qui à son tour agrège les caspases initiatrices (i.e., caspase -8 et -10). Le complexe formé par le CD95, FADD et les caspases -8/10 est appelé DISC, pour Deah Inducing Signaling Complex. Une fois le DISC formé, l’agrégation des caspases initiatrices entraîne leur activation, et la mort de la cellule par apoptose. Ce signal médié par CD95, peut être modulé par la distribution ou l’exclusion du récepteur vis à vis des microdomaines membranaires ou radeaux lipidiques. Ces domaines de la membrane plasmique sont des structures membranaires enrichies en sphingolipides et cholestérol. La relocalisation de CD95 dans ces radeaux lipidiques permet d’amplifier le signal de mort. L’activation de la voie phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/Akt, est connue pour sa capacité à protéger les cellules tumorales du signal apoptotique médié par CD95, et à induire des mouvements latéraux de CD95 à la membrane. Nos travaux montrent que l’inhibition de la voie PI3K/Akt induit i) la relocalisation du CD95 dans les microdomaines et ii) l’induction du signal apoptotique CD95 indépendamment de la présence du ligand CD95L. Ainsi, nous mettons en évidence que la voie PI3K/Akt est capable d’augmenter le seuil d’activation du signal CD95 en agissant en amont de la formation du DISC ou de l’interaction CD95/CD95L, en maintenant le récepteur exclu des microdomaines.
-Apoptose
-Cd95
-Pi3k
-Akt
-Microdomaines
CD95 belongs to the TNF-R superfamily, and it triggers an apoptotic signal. CD95 plays a key role in homeostasis of the immune system and in the elimination of infected and transformed cells. Upon CD95L binding, CD95 recruits FADD, which in turn aggregates initiator caspases (i.e., caspase-8 and -10). The complex CD95, FADD and caspase-8/10 is called DISC for Death Inducing Signaling Complex. At the DISC level, caspase aggregation leads to their activation and death of the cells through apoptosis. The CD95-mediated apoptotic signal is modulated by microdomains, or lipid rafts, which are plasma membrane sub-domains enriched in sphygolipids and cholesterol. Thereby, partition of CD95 into lipid rafts promotes the apoptotic signal. Activation of the phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/Akt signaling pathway is known to prevent the CD95-mediated apoptotic signal in malignant cells, and to control lateral mobility of CD95 at the plasma membrane. Herein, we showed that inhibition of PI3K signal induced i) the distribution of CD95 into lipid rafts and ii) the subsequent induction of the CD95-mediated apoptotic signal through a CD95L independent manner. In conclusion, we pinpointed that PI3K/Akt signaling pathway inhibits the CD95 signal by acting upstream DISC formation and even upstream the CD95-CD95L interaction through the exclusion of the death receptor from the microdomains.
-Apoptosis
-Microdomains
Source: http://www.theses.fr/2010BOR21710/document

Sujets

• Apoptose

Informations

• Publié par: Thesee
• Nombre de lectures: 223
• Langue: Français
• Poids de l'ouvrage: 5 Mo

Extrait

Université Victor Segalen Bordeaux 2
Année 2010 Thèse n°1710
THÈSE

pour le

DOCTORAT DE L’UNIVERSITÉ BORDEAUX 2
Mention : Sciences de la vie et de la Santé
Option : Microbiologie
Présentée et soutenue publiquement
Le 22 Juin 2010
par


Mathieu PIZON
Né le 13 Novembre 1982 à La Rochelle

L'inhibition de la voie Phosphoinositide-3 kinase (PI3K)/AKT
induit un signal apoptotique via la redistribution du récepteur de
mort CD95 dans les radeaux lipidiques


Membres du Jury
r
M BALTZ Théo, Professeur, Université Bordeaux II Président
rM MICHEAU Olivier, Chargé de recherche INSERM, Université de Bourgogne Rapporteur
r
M SEGUI Bruno, Maître de conférences, Université Paul Sabatier, Toulouse III Rapporteur
meM THERET Nathalie, Directrice de Recherche INSERM, Université de Rennes I Examinatrice
r
M JUIN Philippe, Directeur de Recherche INSERM, Université de Nantes Examinateur
rM LEGEMBRE Patrick, Chargé de recherche INSERM, Université de Bordeaux II Directeur de thèse Université Victor Segalen Bordeaux 2
Année 2010 Thèse n°1710
THÈSE

pour le

DOCTORAT DE L’UNIVERSITÉ BORDEAUX 2
Mention : Sciences de la vie et de la Santé
Option : Microbiologie
Présentée et soutenue publiquement
Le 22 Juin 2010
par


Mathieu PIZON
Né le 13 Novembre 1982 à La Rochelle

L'inhibition de la voie Phosphoinositide-3 kinase (PI3K)/AKT
induit un signal apoptotique via la redistribution du récepteur de
mort CD95 dans les radeaux lipidiques


Membres du Jury
r
M BALTZ Théo, Professeur, Université Bordeaux II Président
rM MICHEAU Olivier, Chargé de recherche INSERM, Université de Bourgogne Rapporteur
r
M SEGUI Bruno, Maître de conférences, Université Paul Sabatier, Toulouse III Rapporteur
meM THERET Nathalie, Directrice de Recherche INSERM, Université de Rennes I Examinatrice
r
M JUIN Philippe, Directeur de Recherche INSERM, Université de Nantes Examinateur
rM LEGEMBRE Patrick, Chargé de recherche INSERM, Université de Bordeaux II Directeur de thèse










« Pa kapab' lé mor san éséyé »
Proverbe de l’Ile de la Réunion
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Remerciements

Je souhaite tout d’abord adresser tous mes remerciements aux membres du jury :
rA M le Professeur Théo Baltz pour avoir accepté de présider ce jury, vous m’avez donné goût
à l’Immunologie, et je vous en suis plus que reconnaissant. Merci pour vos conseils
également, après avoir pris quelques murs avec Patrick, j’ai arrêté plus ou moins de
« foncer »…
r rA M Olivier Micheau et M Bruno Ségui, d’avoir accepté de prendre le temps de juger ce
travail.
me rA M Nathalie Theret et M Philippe Juin, pour avoir accepté d’être les examinateurs de ma
thèse.

Je remercie mon directeur de thèse, Patrick Legembre, de m’avoir accueilli dans son équipe,
de m’avoir formé depuis ma Maîtrise, et de m’avoir soutenu (même de façon sauvage) tout au
long de ce parcours. Je salue sa disponibilité, ses compétences scientifiques et sa rigueur, qui
m’ont permis de me dépasser sur le plan scientifique, mais également humain. Merci !

Un grand merci au Professeur Jean-François Moreau, pour les conversations scientifiques et
autres, que nous avons pu partager. Merci pour votre disponibilité, votre écoute, et votre
soutien dans différents domaines.

Je tiens également à remercier le Professeur Patrick Blanco, pour son soutien inconditionnel
pour mes futurs projets, sa disponibilité et son écoute. Si un jour je peux rendre la pareille…

Merci à l’ensemble des membres du laboratoire pour leur accueil, leur soutien, leur
disponibilité et pour certains leur humour, en particulier :
Sophie, pour tes connaissances, nos crises de rire/folie sous la hotte, nos chansons, le rhum de
ton mari… ce fut un plaisir de travailler avec toi toutes ces années ! Mais souviens-toi : « Call
me Lawwwwwrence »
Ben, pour toute l’aide que tu m’as apporté durant cette thèse, pour le complément de
formation que tu m’as donné, nos différentes discussions scientifiques et autres… Tu m’as
énormément aidé, merci !!!!!!!!
Gwen, pour les moments de rigolades pendant le passage de tes 42 plaques 96 puits pendant le
week end, et le sopalin Trollesque…
2
Julie, Charlotte et Franck, pour vos conseils et votre disponibilité et votre gentillesse.
Vincent (Ex-Mister cytométrie), François (dit l’ancêtre), pour nos discussions scientifiques et
autres...
Sonia, Omar, Flo, Walid, Cécile, Isa, Aurélie, Bichon, Christel, Giulia, et Séverine pour votre
bonne humeur, votre fraîcheur et votre gentillesse.
Annie, merci pour ton soutien secrétariesque, mais surtout pour nos discussions…
Je tiens à remercier Patrick Moreau et Michel Castroviejo pour l’aide scientifique qu’ils m’ont
apporté pendant une partie de mon travail.
Merci à tous mes amis, pour leur patience, malgré mon absence depuis 4ans, leur soutien, et
tout simplement leur amitié.
A ma famille en France, Mamie Juju, Mamie Denise et Papi Louis, Jean-Baptiste, Alain,
Annie, Véronique.
A mon band dalon la Réunion : Nico, Manu, Rudolphe (et son ti famille), Magamachin (gout’
a nou mexicanos !), mi pens a zot souven, zot y mank a moin, mé nou retrouv dan pe de
ten !!!
Egalement ma famille Réunionnaise, Tatie Suzie, Jean-Claude, Tatie « Mme Lorion »
Gislaine (en espérant que ça aille mieux), Tatie « Marraine » Lorion et Nanet, Nicole et Fred,
et Elodie (va bosser !!!), et Tonton Paul.
A mes amis Ostéopathes, qui m’ont supporté, soutenu malgré les absences, et pour tous ces
supers moments partagés… merci à Adri, Tonj, Soso, Rico, Marie, le Vinz, Annie, Loulou,
Ben et Mel, Drick-C et le Prothésiste dentaire Titi !
Aux Gwada, Olivier et Julien (« it’s a kind of magic… »)
A Olivier, pour son soutien pendant toutes ces années a la fac… “OOOOoooooh”
A Helene, et son pti Djeb, pour leur generosité et leur amitié.
Au bon vieux Pedro l’escroc, et Julie-Anne pour leur amitié de 10 ans.
A Jame, pour nos discussions philosophiques sur les girafes, et son amitié.
A Cardichon, pour le soutien mutuel, courage…
Aux amitiés plus récentes, Anne, Raff, Audrey, Cathy, Marion, Arnaud, pour votre
gentillesse, votre bonne humeur, et les victoires au billard !
Merci à COOOoooooooooopine et son doudou (Aurelie et Alex), pour votre soutien, votre
écoute, les chinois, les films pas toujours top, la geekerie, et les soirées mémorables !

3

INTRODUCTION ........................................................................................................................... 11
1. L’Apoptose ........................................... 12
1.1. Définition ............................................................................. 12
1.2. Caractéristiques morphologiques et voies d’induction ........ 12
1.2.1. La voie extrinsèque ..................................................... 14
1.2.2. La voie intrinsèque ...................................................................................... 14
1.3. Apoptose et physiologie 15
1.3.1. Développement ........................................................... 15
1.3.2. Système Immunitaire .................................................................................. 16
1.4. Apoptose et pathologies ....................... 18
1.5. Les autres morts cellulaires programmées ........................................................... 18
2. Le système apoptotique CD95/CD95L ................................................................. 20
2.1. La famille des récepteurs apoptotiques ................................ 20
2.2. Le récepteur CD95............................................................... 21
2.2.1. Structure ...................................... 21
2.2.1.1. Le gène ................................................................................................... 21
2.2.1.2. La protéine ............................................................. 22
2.2.1.3. Relation structure/fonction ..... 23
2.2.2. Expression .........................................................