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UNIVERSIDAD DE SALAMANCA

Departamento de Fisiología y Farmacología


EFECTO DE N-ACETILCISTEÍNA Y
GLUCOCORTICOIDES SOBRE LA EXPRESIÓN DE
MOLÉCULAS DE ADHESIÓN Y QUIMIOCINAS
DURANTE LA PANCREATITIS AGUDA EDEMATOSA Y
NECROTIZANTE



Sara Yubero Benito

Salamanca, Marzo 2010

UNIVERSIDAD DE SALAMANCA
DEPARTAMENTO DE FISIOLOGÍA Y FARMACOLOGÍA



D. RAFAEL JIMÉNEZ FERNÁNDEZ, Director del Departamento de Fisiología y
Farmacología, de la Universidad de Salamanca,


CERTIFICA:

Que la presente Tesis Doctoral, elaborada por Dña. Sara Yubero Benito para
optar al grado de Doctor en Biología, con el título “Efecto de N-Acetilcisteína y
Glucocorticoides sobre la expresión de moléculas de adhesión y quimiocinas durante la
pancreatitis aguda edematosa y necrotizante”, ha sido realizada bajo la dirección de los
Drs. Dña. Isabel de Dios Bayón y D. Manuel A. Manso Martín, en el Departamento de
Fisiología y Farmacología de la Universidad de Salamanca.


Y para que así conste, expide y firma el presente en Salamanca, a 10 de Marzo
de dos mil diez.





Fdo. Rafael Jiménez Fernández

UNIVERSIDAD DE SALAMANCA
DEPARTAMENTO DE FISIOLOGÍA Y FARMACOLOGÍA


Dña. ISABEL de DIOS BAYÓN y D. MANUEL A. MANSO MARTÍN, Profesores
Titulares de Fisiología del Departamento de Fisiología y Farmacología, de la
Universidad de Salamanca,


CERTIFICAN:

Que la presente Tesis Doctoral, presentada por Dña. Sara Yubero Benito, con el
título de “Efecto de N-Acetilcisteína y Glucocorticoides sobre la expresión de
moléculas de adhesión y quimiocinas durante la pancreatitis aguda edematosa y
necrotizante”, ha sido realizada bajo su dirección, en el Departamento de Fisiología y
Farmacología de la Universidad de Salamanca, y entendiendo que se halla finalizada y
que reúne los requisitos de originalidad, autorizan su presentación a fin de que pueda ser
juzgada por el Tribunal correspondiente.

Y para que conste a los efectos oportunos, firman el presente en Salamanca,
a 10 de Marzo de dos mil diez.





Fdo. Isabel de Dios Bayón Fdo. Manuel A. Manso Martín
















Este trabajo ha sido realizado con cargo a
Proyectos de Investigación subvencionados
por el Fondo de Investigación Sanitaria
(FIS PI05/0025) y por el ISCIII (PI08/0035), con
la ayuda de una Beca de Formación de Personal
Investigador (FPI) concedida por la Junta de
Castilla-León, y por un contrato de personal
investigador en prácticas de la Universidad de
Salamanca.




























Agradecimientos



Esta Tesis Doctoral no hubiera podido ser realizada sin la colaboración técnica
y apoyo de un gran número de personas a las que quiero mostrar mi agradecimiento.
A mis directores Maribel y Manolo, por darme la oportunidad de iniciarme en
la investigación, dedicando su tiempo en mi formación científica que sin duda será
crucial para mi futuro. Gracias por la paciencia y confianza que me habéis mostrado
durante estos años, ha sido todo un placer formar parte de esta “pequeña familia”, me
llevo una gran amistad.
A mi compañera Laura, por los buenos y los no tan buenos momentos que hemos
compartido. Por su paciencia y ayuda sin la cual este trabajo no hubiera llegado a su
fin, parte de esta tesis es también tuya. A Andrés, por estar siempre pendiente de
nuestro trabajo, compartiendo esos pequeños ratitos de café. A nuestro técnico Javi,
siempre dispuesto a echar una mano haciendo con su simpatía más ameno el trabajo de
los miércoles.
Al servicio de Citometría de Flujo de la Universidad de Salamanca, a Martín,
por haberme ayudado en mi inicio en el mundo de la citometría. Al departamento de
Biología Celular y Patología, en especial a Eduardo Weruaga y a Javier Sánchez, por
su gran ayuda para elaborar y preparar minuciosamente los trabajos de histología.
Quiero dedicar esta tesis a Dani, por saber animarme y comprenderme en todo
momento, gracias por estar a mi lado. También a mis hermanos y “sobris”, porque a
pesar de la distancia son una parte imprescindible de mi vida, soy afortunada por tener
esta gran familia.
Finalmente y de forma muy especial, quiero dedicar este trabajo a mis padres,
porque gracias a ellos he podido llegar hasta aquí. Gracias por vuestro apoyo y cariño,
es todo un orgullo ser vuestra hija, esta tesis es para vosotros.




















A mis padres



































Abreviaturas





Ach Acetilcolina
ADN Ácido Desoxirribonucleico
ANOVA Análisis de la Varianza
AP-1 “Activator Protein 1”
ARDS “Acute Respiratoy Distress Syndrome”
ARN Ácido Ribonucleico
ARNm Ácido Ribonucleico Mensajero
ATP Adenosín-trifosfato
CARS “Compensatory Anti-inflamatory Response Syndrome”
CAT Catalasa
CCK Colecistoquinina
CD “Cluster of Differentiation”
CDE Dieta deficiente en colina y suplementada con etionina
CINC “Cytokine-Induced Neutrophil Chemoattractant”
CRP Proteína C Reactiva
Cys Cisteína
DMSO Dimetil sulfóxido
DNTP Desoxirribonucleótido trifosfato
DSP Fosfatasa de especifidad dual
DTNB 5,5´-ditio-bis (2-ácido nitrobenzoico)
DTT Ditiotreitol
Dx Dexametasona
EDTA Etilendiamina-ácido tretraacético
EGF “Epidermal Growth Factor”
ELISA “Enzyme-Linked Immunosorbent Assay”
ERK 3/4 “Extracellular signal Regulated Kinase 3 y 4”
ERK 5 “Extracellular signal Regulated Kinase 5”
ERK1/2 “Extracellular signal Regulated Kinase 1 y 2”
ESL-1 Ligando-1 E-selectina
Fl Fluorescencia naranja 2
Fl Fluorescencia roja 3
FSC “Forward light Scatter”
GC Glucocorticoide GDOC Ácido Glycodeoxicólico
GPx Glutatión Peroxidasa
GR Receptor de glucocorticoides
GRE Elemento de respuesta a glucocorticoides
GSH Glutatión reducido
H O Peróxido de hidrógeno 2 2
HAT Histona acetil transferasa
HCl Ácido Clorhídrico
HDTAB Hexadeciltrimetilamoniobromuro
HEPES Ácido N-(2-hidroxietil) piperazin-N´-(2-etanosulfónico)
HOCl Ácido hipocloroso
ICAM-1 “Intercellular Adhesión Molecule 1”
ICE “Interleukin-1 Converting Enzyme”
IgG Inmunoglobulina G
IKK IB kinasa
IL-1 Interleucina 1
IL-10 Interleucina 10
IL-10R Receptor de Interleucina 10
IL-12 Interleucina 12
IL-13 Interleucina 13
IL-1β Interleucina 1 Beta
IL-4 Interleucina 4
IL-6 Interleucina 6
IL-8 Interleucina 8
INF- Interferon gamma
iNOS Óxido nítrico sintasa inducible
IκB “Inhibitor of kappa B”
JAK “Janus Kinase”
JNK/SAPK “Jun N-terminal Kinase or Stress-Activated Protein Kinase”
KDa KiloDalton
LDH Lactato deshidrogenasa
LFA-1 “Leukocyte Function-Associated Antigen-1”

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