ANÁLISIS GENÉTICOS EN LA RAZA PONI VASCO-POTTOKA. RESULTADOS PRELIMINARES (GENETIC ANALYSIS IN THE BASQUE PONY-POTTOKA BREED. PRELIMINARY RESULTS)

Pascual

Description

Resumen
En los últimos meses, el Laboratorio de Citogenética y Genética Molecular de la Facultad de Veterinaria de Zaragoza, junto con el Servicio de Ganadería de la Diputación Foral de Bizkaia, han emprendido la tarea de la caracterización genética del Poni Vasco o Pottoka. Para ello se ha realizado la puesta a punto de las técnicas citogenéticas que permiten el estudio del cariotipo individual, con el fin de detectar posibles anomalías cromosómicas en esta raza autóctona, capaces de reducir considerablemente la fertilidad. Asimismo, se ha comenzado el análisis de polimorfismos genéticos en proteínas plasmáticas (Albúmina, Proteína de transporte de la vitamina D, Proteína Xk, Transferrina y Post-transferrina). Por otro lado, en el momento actual se ha iniciado el análisis de la variabilidad genética de esta raza mediante marcadores microsatélites. El estudio de marcadores genéticos, tanto proteicos como microsatélites, permite la identificación individual, la realización de pruebas de exclusión de la paternidad y la caracterización y comparación de poblaciones, a fin de reconstruir las relaciones entre ellas, que se reflejan en los llamados árboles y distancias filogenéticas.
Abstract
During the last months, the Laboratory of Citogenetics and Molecular Genetics of the Veterinary Faculty of Zaragoza and the Service of Livestock Farming of the Provincial Government of Biscay, have begun the studies for the genetic characterisation of the Basque Pony or Pottoka. In this way we have tuned the genetic techniques up that allow the study of the individual karyotype, in order to detect possible chromosomal alterations able to reduce the fertility considerably in this local equine breed. Therefore, the analysis of genetic polimorfisms in plasmatic proteins (Albumin, D Blinding Protein, Xk Protein, Transferrin and Post-Transferrin) has been started. On the other hand, an effective methodology is developing now, to detect genetic polimorfisms through DNA microsatellites. The study of genetic markers, either classic or microsatellites, allows the individual identification, the realisation of paternity exclusion tests and the characterisation and comparison among populations, in order to rebuild their relationships that are translated in pedigree-trees and phylogenetic distances.

Sujets

• Caballo
• Microsatelites
• PCR
• Horse
• Transferrin

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• Publié par: erevistas
• Publié le: 01 janvier 1998
• Nombre de lectures: 13
• Langue: Español

Extrait

COMUNICACIÓN
ANÁLISIS GENÉTICOS EN LA RAZA PONI VASCO POTTOKA.
RESULTADOS PRELIMINARES
GENETIC ANALYSIS IN THE BASQUE PONY POTTOKA BREED.
PRELIMINARY RESULTS
2 1 1 2Pascual Moro, I., T. Tejedor, L.V. Monteagudo Ibáñez , J.I. Intxausti del Casal y
1M.V. Arruga Laviña
1Laboratorio de Citogenética y Genética Molecular. Facultad de Veterinaria. C/ Miguel Servet, 177. 50013
Zaragoza. España.
2Servicio de Ganadería. Diputación Foral de Bizkaia. Lehendakari Agirre Etorbidea, 9, 2. 48014 Bilbao.
España.
PALABRAS CLAVE ADICIONALES ADDITIONAL KEYWORDS
Caballo. Estudios citogenéticos. Transferrinas. Horse. Cytogenetic studies. Transferrin.
Microsatélites. PCR. Microstellites. PCR.
RESUMEN
En los últimos meses, el Laboratorio de Cito exclusión de la paternidad y la caracterización y
genética y Genética Molecular de la Facultad de comparación de poblaciones, a fin de reconstruir
Veterinaria de Zaragoza, junto con el Servicio de las relaciones entre ellas, que se reflejan en los
Ganadería de la Diputación Foral de Bizkaia, han llamados árboles y distancias filogenéticas.
emprendido la tarea de la caracterización gené
tica del Poni Vasco o Pottoka. Para ello se ha
realizado la puesta a punto de las técnicas cito SUMMARY
genéticas que permiten el estudio del cariotipo
individual, con el fin de detectar posibles anoma During the last months, the Laboratory of
lías cromosómicas en esta raza autóctona, ca Citogenetics and Molecular Genetics of the
paces de reducir considerablemente la fertilidad. Veterinary Faculty of Zaragoza and the Service
Asimismo, se ha comenzado el análisis de poli of Livestock Farming of the Provincial Government
morfismos genéticos en proteínas plasmáticas of Biscay, have begun the studies for the genetic
(Albúmina, Proteína de transporte de la vitamina characterisation of the Basque Pony or Pottoka.
D, Proteína Xk, Transferrina y Post transferrina). In this way we have tuned the genetic techniques
Por otro lado, en el momento actual se ha inicia up that allow the study of the individual karyotype,
do el análisis de la variabilidad genética de esta in order to detect possible chromosomal
raza mediante marcadores microsatélites. El alterations able to reduce the fertility considerably
estudio de marcadores genéticos, tanto protei in this local equine breed. Therefore, the analysis
cos como microsatélites, permite la identifica of genetic polimorfisms in plasmatic proteins
ción individual, la realización de pruebas de (Albumin, D Blinding Protein, Xk Protein,
Arch. Zootec. 47: 181 188. 1998.PASCUAL MORO ET AL.
Transferrin and Post Transferrin) has been Al existir varias razas que pueden
started. On the other hand, an effective resultar difíciles de diferenciar morfo
methodology is developing now, to detect genetic lógicamente (todos los ponis de la ver
polimorfisms through DNA microsatellites. The tiente cantábrica), es fácil comprender
study of genetic markers, either classic or que es necesario establecer criterios
microsatellites, allows the individual identification, seguros para identificar inequívoca
the realisation of paternity exclusion tests and the mente la raza autóctona.
characterisation and comparison among Solo de esta forma se podrá esta
populations, in order to rebuild their relationships blecer una defensa y conservación de
that are translated in pedigree trees and las poblaciones autóctonas.
phylogenetic distances. El estudio de la variabilidad a nivel
genético, comprende el nivel morfoló
gico, el cromosómico, el bioquímico y
INTRODUCCIÓN el molecular o ADN. Estos estudios de
caracteres inalterables a lo largo de la
Determinar si un ejemplar pertene
vida del individuo, son, además, inde
ce a una especie u otra, y dentro de la
pendientes de cualquier manipulación
especie que interesa, a una determina
externa ya que ofrecen la ventaja de
da raza pura, no puede realizarse más
que su expresión no se haya sometida
que de una forma primaria a través de
al efecto del ambiente.
los caracteres externos, dada la falta
de estudios y conocimientos sobre ca
racteres genéticos. Así normalmente A. ESTUDIOS CROMOSÓMICOS
suele realizarse por el peso, el color de
la capa, la plástica del animal, etc. Cada especie de ser vivo tiene un
Sin embargo, en estos momentos es número y una morfología de los cro
urgente la identificación genética de mosomas propia. Es por ello que resul
cada una de las especies, así como, el tan de interés de cara a estudios de
estudio de la variabilidad genética que alteraciones cromosómicas que pro
puedan presentar entre ellas y entre ducen un descenso en la fertilidad, e
poblaciones distintas, con vistas a pre incluso, una incompatibilidad con la
servar su patrimonio genético. vida.
Un paso previo a cualquier progra
ma que pretenda preservar un patrimo MATERIAL Y MÉTODOS
nio genético, consiste en la caracteri Los cultivos celulares se han culti
zación de la variabilidad genética en vado mediante la técnica descrita por
las distintas poblaciones. Esta carac Burrells y Wells (1977) siguiendo las
terización permite establecer las dife condiciones para el cultivo de linfoci
rencias o similitudes genéticas entre tos a 72 horas. La obtención de meta
las mismas y, por tanto, basándose en fases se ha conseguido añadiendo col
dicho conocimiento, evitar aquellas chicina 50 minutos antes del sacrificio
medidas que contribuyan a la erosión (Eldridge, 1985) y utilizando un cho
que hipotónico. La tinción se realizógenética de la raza, como el cruza-
con Giemsa después de una fijación enmiento con animales de otras razas.
Archivos de zootecnia vol. 47, núm. 178 179, p. 182.ANÁLISIS GENÉTICOS EN LA RAZA PONI VASCO POTTOKA
alcohol acético durante 48 horas. Las metacéntricos X en la hembra, que
imágenes se tomaron con un micros son, un cromosoma acrocéntrico muy
copio confocal Zeiss, para su posteriorpequeño, Y, y otro X, en el macho
edición. El cariotipo se realizó de (figura 1). Han sido numerosas las
acuerdo al estándar del ISCNDA de alteraciones descritas en el caballo,
1989. especialmente las trisomías de los cro
mosomas 23, 26, 28 y 30, así como
RESULTADOS anomalías en el par sexual: síndrome
El Poni Vasco tiene 64 cromoso de Turner y diversos quimerismos,
mas (Power, 1990), como corresponde intersexualidad y seudohermafroditis
a su especie ( Equus caballus), en esto mo (Hare et al., 1979). Sin embargo,
no se diferencia de otros caballos do tras analizar un total de 22 animales,
mésticos y si del caballo de Prezwalskino se han observado alteraciones cro
que tiene 66. El caballo doméstico mosómicas de ningún tipo.
tiene 13 pares de cromosomas autosó
micos metacéntricos y submetacéntri
B. POLIMORFISMOS PROTEICOScos, 18 pares de autosomas acrocéntri
cos y dos cromosomas sexuales sub
Se están analizando de forma siste
mática y simultánea cinco tipos de
proteínas séricas, que también pueden
ponerse de manifiesto en el plasma
sanguíneo. Se trata de las proteínas
siguientes, controladas por loci géni
cos distintos: Proteína de transporte
de la vitamina D (GC), Proteína XK
(XK), Transferrina (TF) y Post trans
ferrina (PTF) y Albúmina (AL).
MATERIAL Y MÉTODOS
En estos estudios preliminares se
han analizado 22 animales distintos,
algunos de ellos supuestamente empa
rentados en dos familias.
La sangre es recogida utilizando
Figura 1. Cariotipo de una yegua. Los cro tubos Venoject heparinizados, y se
mosomas aparecen ordenados de mayor a centrifuga para separar plasma y gló
menor, observándose tres grupos de cromo bulos rojos. El plasma se congela has
somas, metacéntricos, submetacéntricos y ta el momento de analizar sus proteí
acrocéntricos. (Karyotype of a mare. The nas. Solo en dos de los animales con
chromosomes appear orderly from bigger to siderados se dispuso de suero.
smaller, being observed three groups of Se utiliza gel de poliacrilamida dis
chromosomes, metacentrics, submeta centrics continuo como soporte de la electrofo
and acrocentrics). resis (Gahne et al., 1977; Gahne y
Archivos de zootecnia vol. 47, núm. 178 179, p. 183.PASCUAL MORO ET AL.
Juneja, 1978; Juneja et al., 1978). La La TF merece una atención espe
tinción con azul de Coomassie R 250 cial. Se ha observado la existencia de
pone de manifiesto las diversas ban un individuo que carece de bandas en
das proteicas. la región correspondiente a esta pro
teína, por lo cual se ha considerado
RESULTADOS como homocigoto para un cierto alelo
La técnica aplicada permite la vi inactivo de TF, lo que genéricamente
sualización de las variantes de las pro se conoce como alelo silente (Yoko
teínas siguientes en