PRIMEROS RESULTADOS EN EL ESTUDIO DE LOS EFECTOS DE LA CONGELACIÓN DE SEMEN DE GALLO EN TRES RAZAS CATALANAS (FIRST RESULTS ABOUT THE STUDY OF THREE CATALAN POULTRY BREEDS SEMEN CRYOPRESERVATION EFFECTS)

COMUNICACIÓN
PRIMEROS RESULTADOS EN EL ESTUDIO DE LOS EFECTOS
DE LA CONGELACIÓN DE SEMEN DE GALLO
1EN TRES RAZAS CATALANAS
FIRST RESULTS ABOUT THE STUDY OF THREE CATALAN POULTRY BREEDS
1SEMEN CRYOPRESERVATION EFFECTS
2Fontgibell, A. y A. Francesch
2IRTA. Centre de Mas Bové. Unitat de Genètica Avícola. Apartat 415. 43280 Reus. España.
amadeu@masbove.irta.es.
PALABRAS CLAVE ADICIONALES ADDITIONAL KEYWORDS
Razas de gallinas autóctonas. Semen congelado Local poultry breeds. Semen cryopreservation in
en nitrógeno líquido. Crioprotectores. Fertilidad. liquid nitrogen. Fertility. Hatchability.
Incubabilidad.
RESUMEN
Se estudió el efecto de la congelación de incubabilidad procedentes de huevos puestos en
semen de gallo en tres razas catalanas: los diez días posteriores a la inseminación. Para
Penedesenca, Empordanesa y Prat. Se emplea el estudio de la fertilidad se realizó un análisis de
ron tres crioprotectores separadamente: glicerol la varianza considerando los factores: raza,
(GLY), dimetilacetamida (DMA) y dimetilsulfóxido crioprotector y día posterior a la inseminación.
(DMSO). Obtenido el semen se diluía en una Para la incubabilidad se consideró raza y
proporción 1:3 iniciándose el proceso de conge crioprotector.
lación en nitrógeno líquido. Una muestra sin De forma general e independientemente de
crioprotector fue inseminada recién obtenida. la raza, la fertilidad fue más alta en el segundo
Practicada la descongelación, se inseminaban día posterior a la inseminación cuando se conge
inmediatamente las muestras que contenían DMA laba, no diferenciándose significativamente la
y DMSO; en las que contenían GLY, éste se obtenida utilizando DMSO (21,88 p.100) de la
separaba de la muestra mediante diluciones obtenida utilizando GLY (14,59 p.100), pero
sucesivas, centrifugándose luego a 2000 r.p.m. a ambas lo hicieron de la obtenida utilizando DMA
5°C, durante 15 min. que no presentó ningún pico y se mantuvo aproxi
Se inseminaron un total de 152 gallinas de madamente entre el 1 p.100 y el 5 p.100 como los
cada raza en 19 repeticiones del proceso de otros dos a partir del 4º día. La fertilidad de los
congelación. Se obtuvieron datos de fertilidad e controles ha sido mayor en el tercer día (93,25
p.100). En cuanto a la incubabilidad de los hue
vos fértiles no se pudieron mostrar diferencias1Estudio financiado por el INIA mediante el proyec
significativas utilizando semen fresco (71,79to SC95 051.
2Autor destinatario de la correspondencia. p.100) respecto al semen congelado, pero en
Arch. Zootec. 47: 335 341. 1998.FONTGIBELL Y FRANCESCH
este caso con los tres crioprotectores se obtuvie was lower with the three cryoprotectants: 37.49
ron incubabilidades mas bajas: 37,49 p.100 con percent with DMA, 54.22 percent with DMSO and
DMA, 54,22 p.100 con DMSO y 56,58 p.100 con 56.58 percent with GLY.
GLY.
INTRODUCCIÓN
SUMMARY
Desde hace quince años el IRTA ha
Effects of to freeze semen in three catalan venido desarrollando un programa de
poultry breeds: Penedesenca, Empordanesa y conservación y mejora genética de ra
Prat were studied using three cryoprotectants zas de gallinas autóctonas catalanas
separately: Glycerol (GLY), Dimethylacetamide (véase Francesch, 1997 a y b, para una
(DMA) and Dimethylsulfoxide (DMSO). Semen revisión).
was diluted in 1:3 proportion and frozen in liquid El número efectivo de reproduc
nitrogen. A sample without cryoprotectant was tores constituye un factor limitante en
inseminated immediately. After thawing, the
todo programa de conservación gené
samples with DMA and DMSO were inmediately
tica y más en aquellas especies, como
inseminated and the samples with GLY before
las gallinas, en las que en apareamien
insemination were gradually diluted, and
to el número de machos es menor que
centrifuged at 2000 r.p.m.and 5°C during 15 min
el de hembras. Aumentarlo significa
to reduce GLY concentration.
mantener muchos machos hasta el
They were inseminated a total of 152 hens of
momento de la reposición, en nuestro
each breed in 19 repetitions of the freezing
caso bianual. Por otra parte, en unprocess. Fertility and fertile hatchability of eggs
programa de mejora genética de galli laid from the second day to tenth day inclusive
nas también se tienen que mantenerfollowing the insemination were calculated. For
muchos machos en espera de su eva the fertility study an analisis of variance was
carried out with the factors: breed, cryoprotectant luación genética. De todo ello se deri
and day posterior of the insemination. For the va el interés en la congelación de se
hatchability the factors were breed and men cara a disponer de un banco de
cryoprotectant. material genético en conservación y
Results showed in the three breeds that the reducir la población de gallos, a la vez
high fertility was obtained in the second day que prevenimos la pérdida accidental
posterior to the insemination with frozen semen, de excelentes reproductores. En defi
the fertility obtained with DMSO (21.88 percent)
nitiva puede suponer un ahorro econó
was not significantly different to that obtained
mico (comida, espacio, mano de obra)
with GLY (14.59 percent) but both were
y una garantía en el mantenimiento de
significantly diferent to the fertility obtained with
variabilidad genética.
DMA which did not show any pick and stayed
El objetivo de este trabajo, por tan
approximately between the 1 percent and the 5
to, se centró en poner a punto técnicas
percent like the other two from the fourth day. The
de congelación de semen de gallo (Lakefertility obtained in the controls were higher in the
y Ravie 1984, Sexton, 1975) y probarthird day (93.25 percent). The hatchability of the
los resultados en tres razas autóctonasfertile eggs did not show significantly differences
in the use of fresh semen (71.79 percent) respect catalanas al estudiar la fertilidad y la
frozen semen, but in this case the hatchability incubabilidad de los huevos fértiles.
Archivos de zootecnia vol. 47, núm. 178 179, p. 336.CONGELACIÓN DE SEMEN DE GALLO EN RAZAS CATALANAS
MATERIAL Y MÉTODOS GLY se reducía la concentración de
éste mediante diluciones sucesivas y
Se utilizaron 12 machos y 125 hem centrifugación a 2000 r.p.m. y 5°C
bras de 60 semanas de edad de cada durante 15 minutos de acuerdo con la
una de las razas Penedesenca Negra, metodología de Lake et al . (1981). Las
Empordanesa Roja y Prat Leonada. muestras se trasladaban a la nave de
Los animales estaban ubicados en una inseminación manteniendo la tempe
nave de ambiente controlado, con un ratura en 5°C.
programa de iluminación de 14 horas Se inseminaron un total de 152 ga
de luz diarias. La dieta suministrada llinas de cada raza en las 19 repeticio
ad libitum era de 2850 kcal ME/kg y nes del proceso. La recogida de hue
un 17 p.100 de proteína bruta tanto vos fértiles se iniciaba el segundo día
para los machos como para las hem después de la inseminación y seguía
bras. durante los siete días consecutivos.
El semen se obtenía por masaje Los huevos se almacenaban a 15°C y
dorso abdominal (Francesch, 1995) y 70 p.100 de humedad relativa.
se trasladaba a una cámara a 5°C. Se Se realizó un análisis de varianza
preparaban 18 muestras; dos muestras para el estudio de la fertilidad y la
para cada raza con cada uno de cuatroincubabilidad de los huevos fértiles.
disolventes diferenciados según el Para la fertilidad se consideró el mo
crioprotector: Dimetil acetamida delo Y = + R+ T+ D + (R*T )+
ijk i j k ij
(DMA), Dimetil sulfóxido (DMSO), ( R*D )+ ( T*D ) + ( R*T*D )+ e
ik jk ijk ijk
Glicerol (GLY) y CONTROL (sin y para la incubabilidad el modelo fue
crioprotector) (Composición según Y = + R + T+ ( R*T ) + e; donde
ijk i j ij ij
Lake et al., 1984). La proporción se R era la raza, T el tratamiento y D el
i j k
men/disolvente fue 1:3, quedando la día de puesta del huevo, con siete ni
concentración de las muestras en veles (2º a 8º día posterior a la insemi
1,11M (8,07 p.100 (v/v)) de GLY, nación). Para analizarlos se utilizó el
1,128M (9,27 p.100 (v/v)) de DMA y Modelo Lineal General del paquete
0,569M (4,0 p.100 (v/v)) de DMSO. estadístico SAS (SAS Institute, 1988).
Las muestras control se inseminaron La separación de medias (LS MEANS)
inmediatamente y el resto pasó por el se realizó con un test de la t Student.
procedimiento de congelación hasta la Para analizar los porcentajes se les
introducción a Nitrógeno líquido (mé aplicó una transformación a arcoseno.
todo descrito por Lake et al., 1981). La hipótesis alternativa era aceptada
Después de 24 horas, se realizaba la para un nivel de significación a <0,05.
descongelación de las muestras en un
baño de alcohol a 5°C (Lake et al.,