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Description

Niveau: Supérieur, Doctorat, Bac+8
Ecole Pratique des Hautes Etudes Doctorat de l'Ecole Pratique des Hautes Etudes Sciences de la Vie et de la Terre PAILLOT Romain DÉVELOPPEMENT ET APPLICATION DE MÉTHODES DE MESURE ET CARACTÉRISATION DE L'IMMUNITÉ À MÉDIATION CELLULAIRE INDUITE PAR LES VIRUS RESPIRATOIRES ÉQUINS. Thèse dirigée par le Dr Geneviève CORDIER et le Dr Janet DALY Soutenue le 20 Févier 2007 Jury : M. J.L. Cadoré Mme G. Cordier M. J.C. Gluckman M. D. Hannant Mme J.H. Kydd M. J.M. Minke M. J. Slater Encadrement & Laboratoire d'accueil: Dr Janet Daly (), Dr Julia Kydd, Pr Duncan Hannant. Department of Infectious Disease, Centre for Preventive Medicine. ANIMAL HEALTH TRUST, Lanwades Park, Kentford, Newmarket. Suffolk CB8 7UU, United Kingdom. Directeur E.P.H.E.: Dr Geneviève Cordier. Laboratoire E.P.H.E ‘interactions cellulaires, rétrovirus et cancer'. IFR 128 Biosciences Lyon-Gerland UMR 754 INRA-ENVL-UCBL ‘Rétrovirus et pathologie comparée'. 50 avenue Tony Garnier, Lyon, France. EPHE Banque de Monographies SVT 1

  • ehv

  • eiv

  • caractérisation de la synthèse d'ifng spécifique d'ehv

  • réponse immunitaire

  • vaccination

  • virus-specific antibody responses

  • réponse cellulaire chez le cheval


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Nombre de lectures 78
Langue Français

Exrait

Ecole Pratique des Hautes Etudes



Doctorat de l’Ecole Pratique des Hautes Etudes

Sciences de la Vie et de la Terre





PAILLOT Romain




DÉVELOPPEMENT ET APPLICATION DE MÉTHODES DE MESURE ET
CARACTÉRISATION DE L’IMMUNITÉ À MÉDIATION CELLULAIRE INDUITE PAR
LES VIRUS RESPIRATOIRES ÉQUINS.




Thèse dirigée par le Dr Geneviève CORDIER et le Dr Janet DALY

Soutenue le 20 Févier 2007

Jury :

M. J.L. Cadoré
Mme G. Cordier
M. J.C. Gluckman
M. D. Hannant
Mme J.H. Kydd
M. J.M. Minke
M. J. Slater




Encadrement & Laboratoire d’accueil: Dr Janet Daly (Janet.Shaw@liverpool.ac.uk), Dr Julia
Kydd, Pr Duncan Hannant.
Department of Infectious Disease, Centre for Preventive Medicine. ANIMAL HEALTH TRUST, Lanwades
Park, Kentford, Newmarket. Suffolk CB8 7UU, United Kingdom.

Directeur E.P.H.E.: Dr Geneviève Cordier. genevieve.cordier@univ-lyon1.fr
Laboratoire E.P.H.E ‘interactions cellulaires, rétrovirus et cancer’. IFR 128 Biosciences Lyon-Gerland
UMR 754 INRA-ENVL-UCBL ‘Rétrovirus et pathologie comparée’. 50 avenue Tony Garnier, Lyon,
France.
EPHE Banque de Monographies SVT 1RÉSUMÉ

Titre: Développement et application de méthodes de mesure et caractérisation de l’immunité à
médiation cellulaire induite par les virus respiratoires équins.

Résumé
Le virus influenza équin (EIV) est une des principales causes de maladies respiratoires chez le cheval. Le
virus herpes équin de type 1 (EHV-1) infecte également le système respiratoire, l’infection peut se traduire
par des signes neurologiques et est à l’origine d’une majorité des avortements infectieux. La protection
induite par les vaccins conventionnels contre ces 2 virus s’appuie sur une réponse humorale. La nouvelle
génération de vaccin essaye de stimuler une réponse immunitaire humorale et cellulaire similaire à celle
induite par ces virus au cours de l’infection. Bien que les méthodes de mesure de la réponse humorale
soient en place depuis de nombreuses années, le développement de méthodes pour évaluer la réponse
immunitaire à médiation cellulaire a pris beaucoup de retard par rapport à l’avancée des stratégies
vaccinales chez le cheval. Cette étude décrit le et la caractérisation d’une méthode de
mesure de la réponse IFNg produite par les lymphocytes T. Ce nouveau marqueur a été évalué et utilisé
pour décrire la stimulation de la réponse cellulaire chez différentes populations de chevaux, après infection
par EHV-1 ou vaccination avec des vaccins conventionels ou expérimentaux à base de poxvirus
recombinants. Ce marqueur a également été adapté à l’étude de la réponse immunitaire après infection par
le virus EIV, parallèlement à l’amélioration d’une méthode de mesure de l’activité cytotoxique spécifique
d’EIV. En conclusion, la mesure de la synthèse d’IFNg est utile pour évaluer la réponse cellulaire chez le
cheval et peut être appliquée à l’évaluation de la nouvelle génération de vaccins contre EIV et EHV-1.

Title: The development and application of new assays to measure and characterise cell-mediated
immunity to equine respiratory viruses.

Abstract
Equine influenza virus (EIV) is a leading cause of respiratory disease in horses. Equine herpesvirus-1
(EHV-1) primarily infects the respiratory tract but is also known to cause neurological disease and is a
major cause of abortion. In both cases, protection afforded by conventional whole inactivated virus vaccines,
based principally on virus-specific antibody response, has limitations. The new generation of vaccines try to
mimic natural infection more closely by stimulating both humoral and cellular immune responses. Although
methods to detect and quantify virus-specific antibody responses are well established, the development of
reliable assays for the easy measurement of cell-mediated immunity (CMI), particularly virus-specific
cytotoxic T lymphocyte (CTL) responses, has lagged behind vaccine development in the horse. This study
describes the development and characterisation of a method to measure virus-specific IFNg synthesising
cells. This new marker was compared with EHV-1-specific CTL activity and then applied to describe
stimulation of CMI in several horse populations after infection with EHV-1 or vaccination with either
whole inactivated EHV-1 vaccine or recombinant poxviruses encoding for an EHV-1 protein. This marker
was also successfully adapted to study the immune response to EIV. In addition, a previously reported
version of the EIV-specific bulk CTL assay was improved, characterised and applied to demonstrate the
development of CTL activity after experimental EIV infection. In conclusion, IFNg synthesis was shown to
be a useful measure of CMI in horses, which complements the CTL assay and can be applied to the new
generation of vaccines against EIV and EHV-1.

Mots clés: Immunité à médiation cellulaire, IFNg, cheval, EHV-1, EIV, infection, vaccination
Keywords: Cell-mediated immunity, IFNg, horse, EHV-1, EIV, infection, vaccination

TABLES DES MATIÈRES

RÉSUMÉ...................................................................................................................................... 2
EPHE Banque de Monographies SVT 2PRÉFACE......................................................................................
REMERCIEMENTS.......................................................................
PUBLICATIONS ET COMMUNICATIONS.....................................
TABLES DES MATIÈRES............................................................................................................ 3
LISTE DES ABRÉVIATIONS....................................................................................................... 8
LISTES DES TABLEAUX..............................................................
LISTES DES FIGURES.................................................................
LISTE DES ANNEXES..................................................................
CHAPITRE 1 :...............................................................................
BIBLIOGRAPHIE........................................................................................................................ 9
A INTRODUCTION GÉNÉRALE................................................................................................. 9
B IMMUNITÉ CONTRE LES VIRUS RESPIRATOIRES.................................................................. 10
B.1 Réponse immunitaire innée.......................................................................................... 10
B.2 adaptative ou spécifique................................................................. 11
B.2.1 Présentation des antigènes viraux11
B.2.2 Activation des cellules Th spécifiques de l’antigène...................................................................................... 12
B.2.3 Coordination de la réponse antivirale par les lymphocytes Th armés........................................................ 12
B.2.4 Réponse humorale à base d’anticorps.................................................................................................................. 13
B.2.5 Immunité à médiation cellulaire............................................................................................................................ 13
C VIRUS HERPES ÉQUIN DE TYPE 1 (EHV-1)............................................................................ 15
C.1 Structure du virus EHV-1............................................................................................ 15
C.2 Infection cellulaire et replication virale.......................................................................... 16
C.3 Propagation du virus et maladie................................................................................... 17
C.3.1 Infection du système respiratoire.......................................................................................................................... 17
C.3.2 Virémie cellulaire et ganglions lymphatiques du système respiratoire..................................................... 17
C.3.3 Avortement, maladie néonatale et périnatale..................................................................................................... 18
C.3.4 Signes neurologiques et autres formes de la maladie...................................................................................... 18
C.3.5 Latence.......................................................................................................................................................................... 19
C.3.6 Les souches de virus EHV-1 et la diversité des signes cliniques...................................................

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