Abteilung für Nephrologie der II. Medizinischen Klinik und Poliklinik Technische Universität München Klinikum rechts der Isar (Leiter: Univ. Prof. Dr. U Heemann) Effects of TGF-β1 in ischemia / reperfusion injury and chronic allograft nephropathy Nengtai Ouyang Vollständiger Abdruck der von der Fakultät für Medizin der Technischen Universität München zur Erlangung des akademischen Grades eines Doktors der Medizin genehmigten Dissertation. Vorsitzender: Univ. Prof. Dr. D Neumeier Prüfer der Dissertation: 1. Univ. Prof. Dr. U Heemann 2. Priv.-Doz. Dr. M. J. Stangl Die Dissertation wurde am 03. 09. 2003 bei der Technischen Universität München eingereicht und durch die Fakultät für Medizin am 05.05. 2004 angenommen. 1Contents 1. Introduction ……………………………………………….………………..….…… 4 1.1. Present status and problems of renal transplantation ………………………..4 1.2. The concept of chronic rejection or chronic allograft nephropathy ...…..….. 5 1.3. The characteristics of CAN …………………………………………….……6 1.4. Influences of ischemia/reperfusion injury in CAN …………………….……8 1.5. Effects of cytokines and growth factors in CAN …………………………..10 1.6. The regulation of steroids on the expression of growth factors in CAN …..11 1.7. Aim of present study ……………………………………………………….12 2. Materials and methods …………………………………………………………….14 2.1.
Abteilung für Nephrologie der II. Medizinischen Klinik und Poliklinik
Technische Universität München
Klinikum rechts der Isar
(Leiter: Univ. Prof. Dr. U Heemann) Effects of TGF-β 1 in ischemia / reperfusion injury and chronic allograft nephropathy Nengtai Ouyang
Vollständiger Abdruck der von der Fakultät für Medizin der Technischen Universität München zur Erlangung des akademischen Grades eines Doktors der Medizin genehmigten Dissertation.
Vorsitzender: Univ. Prof. Dr. D Neumeier
Prüfer der Dissertation:
1. Univ. Prof. Dr. U Heemann
2. Priv.-Doz. Dr. M. J. Stangl
Die Dissertation wurde am 03. 09. 2003 bei der Technischen Universität München
eingereicht und durch die Fakultät für Medizin
am 05.05. 2004 angenommen.
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Contents 1. Introduction .... 4 1.1. Present status and problems of renal transplantation ..4 1.2. The concept of chronic rejection or chronic allograft nephropathy ....... 5 1.3. The characteristics of CAN .6 1.4. Influences of ischemia/reperfusion injury in CAN .8 1.5. Effects of cytokines and growth factors in CAN ..10 1.6. The regulation of steroids on the expression of growth factors in CAN ..11 1.7. Aim of present study .12 2. Materials and methods .14 2.1. Part I: Expression of TGF β 1 and tubular apoptosis in I/R kidney ..14 2.1.1. Animals 14 2.1.2. Surgery and experimental protocol ..14 2.1.3. Histology ..15 2.1.4. In situ hybridization .15 2.1.5. Immunohistology .16 2.1.6. TUNEL assay ...17 2.1.7. Statistical analysis ....17 2.2. Part II: Expression of TGF-β 1 regulated by steroids in CAN ..18 2.2.1. Animals ....18 2.2.2. Kidney transplantation .18 2.2.3. Experimental design 19 2.2.4. Functional measurements 19 2.2.5. Histology .19 2.2.6. Immunohistochemistry 20
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2.2.7. RNase protection assay ..21 2.2.8. Statistical analysis ..21 3. Results ..22 3.1. Part I: Expression of TGF β 1 and tubular apoptosis in I/R kidney .22 3.1.1. Histology 22 3.1.2. TGF-β 1 pression ex .22 3.1.3. Apoptosis of tubular epithelia 23 3.2. Part II: Expression of TGF-β 1 regulated by steroids in CAN 24