Institute for Molecular Animal Breeding and Biotechnology, Gene Center Faculty of Veterinary Medicine of the Ludwig-Maximilians University, Munich Prof. Dr. Eckhard Wof Impaired Fertility in Transgenic Mice Overexpressing Betacellulin Thesis for the attainment of the title of Doctor in Veterinary Medicine from the Faculty of Veterinary Medicine of the Ludwig-Maximilians University, Munich by Ana Angélica Gratao from Ipameri, Brazil Munich, 2007 Aus dem Institut für Tierzucht der Tierärztlichen Fakultät der Universität München Lehrstuhl für Molekulare Tierzucht und Biotechnologie, Genzentrum Univ.-Prof. Dr. Eckhard Wof Fruchtbarkeitsstörungen bei transgenen Mäusen, die Betacellulin überexprimieren Inaugural-Dissertation zur Erlangung der tiermedizinischen Doktorwürde der Tierärztlichen Fakultät der Ludwig-Maximilians-Universität München von Ana Angélica Gratao aus Ipameri, Brasilien München, 2007 Gedruckt mit Genehmigung der Tierärztlichen Fakultät der Ludwig-Maximilians-Universität München Dekan: Univ.-Prof. Dr. E. P. Märtlbauer Referent: Prof. Dr. Wolf Korreferent(en): PD. Dr. Neubauer Tag der Promotion: 9. Februar 2007 Meinem Ehemann, Rudah Brentano Assef I CONTENTS Page CONTENTS I ABBREVIATIONS III 1.
Institute for Molecular Animal Breeding and Biotechnology, Gene Center Faculty of Veterinary Medicine of the Ludwig-Maximilians University, Munich Prof. Dr. Eckhard Wof Impaired Fertility in Transgenic Mice Overexpressing Betacellulin Thesis for the attainment of the title of Doctor in Veterinary Medicine from the Faculty of Veterinary Medicine of the Ludwig-Maximilians University, Munich by Ana Angélica Gratao from Ipameri, Brazil Munich, 2007
Aus dem Institut für Tierzucht der Tierärztlichen Fakultät der Universität München Lehrstuhl für Molekulare Tierzucht und Biotechnologie, Genzentrum Univ.-Prof. Dr. Eckhard Wof Fruchtbarkeitsstörungen bei transgenen Mäusen, die Betacellulin überexprimierenInaugural-Dissertation zur Erlangung der tiermedizinischen Doktorwürde der Tierärztlichen Fakultät der Ludwig-Maximilians-Universität München von Ana Angélica Gratao aus Ipameri, Brasilien München, 2007
Gedruckt mit Genehmigung der Tierärztlichen Fakultät der Ludwig-Maximilians-Universität München
Dekan: Univ.-Prof. Dr. E. P. Märtlbauer Referent: Prof. Dr. Wolf Korreferent(en): PD. Dr. Neubauer
Tag der Promotion: 9. Februar 2007
Meinem
Ehemann,
Rudah
Bren
tano
Assef
I
CONTENTS CONTENTS ABBREVIATIONS1. INTRODUCTION AND OBJECTIVES 2. REVIEW OF THE LITERATURE 2.1 Growth Factors 2.1.1 The Epidermal Growth Factor Receptor Ligands 2.1.2 Betacellulin 2.2 Female Reproduction 2.2.1 Sexual Maturity 2.2.2 Oocyte maturation and Ovulation 2.2.3 Implantation 2.2.3.1 Role of EGFR family members in implantation 2.3 Male Reproduction 3. ANIMALS, MATERIALS AND METHODS 3.1. Animal Breeding 3.2 Mouse genotyping 3.3 Analysis of Body and Organs Weight 3.4 Fertility Analysis 3.5 Evaluation of female puberty onset and estrous cycle tracking 3.6 Embryo Implantation studies 3.7 Ovulation and Fertilization analysis 3.8 Cumulus oocyte complex isolation and culture3.9 Sperm isolation andin vitrofertilization 3.10 Sperm analysis 3.11 Histological and Immunohistochemical studies 3.12 Statistical analysis 4. RESULTS 4.1 Analysis of Body and Organs Weight 4.2 Fertility measurements