//img.uscri.be/pth/276caf4eaba3e09a6621211ef98743f8635f4099
Cet ouvrage fait partie de la bibliothèque YouScribe
Obtenez un accès à la bibliothèque pour le lire en ligne
En savoir plus

Transmission mère-enfant du virus de l'immunodéficience humaine de type 1 : rôle des anticorps neutralisants et caractéristiques moléculaires des variants transmis., Mother-to-child transmission of the human immunodeficiency virus type 1 : role of neutralizing antibodies and molecular characteristics of the transmitted variants.

De
213 pages
Sous la direction de Francis Barin, Pranee Leechanachai
Thèse soutenue le 22 septembre 2008: Chiang Mai University (Thailand), Tours
Ce travail a confirmé le rôle protecteur de certains anticorps neutralisants dans la TME du VIH-1, a permis de suggérer que certaines souches seraient de bons indicateurs d’anticorps neutralisants associés à la protection, et a confirmé le rôle de la région V2 de l’enveloppe virale en tant que cible des anticorps neutralisants. Les caractéristiques moléculaires des virus transmis dans le contexte de la TME confortent les données en faveur de la transmission à l’enfant d’une population virale restreinte génétiquement. Une gp 120 plus compacte et une moindre glycosylation ne sont pas des caractéristiques des virus transmis de la mère à l’enfant. Cependant, deux sites de N-glycosylation semblent être sélectionnés chez les virus transmis. L’identification de deux cas de TME liés à des variants issus de recombinaisons entre variants maternels a confirmé la présence d’un « hot spot » dans la région C2 du gène env, et a révélé pour la première fois un second « hot spot » dans la région C3.
-Hiv - 1
-Quasi-espèce
-Transmission mère-enfant
-Glycanes
-Anticorps neutralisants
-Recombinaisons
-Enveloppe
A lower risk of MTCT was associated with higher NAb titers against the CRF01_AE strain, MBA, in Thailand. The results suggest that some primary isolates may be useful indicators for identifying protective antibodies, and confirm the role of the V2 region in neutralization. We found that only viruses of a restricted subset were transmitted to the infant. We did not find that shorter gp120 or fewer PNGS were characteristics of viruses transmitted from mother to infant. However, a limited number of PNGS, particularly at positions N301 and N384, may confer an advantage on the virus to be transmitted. Moreover, we identified two cases that suggest that recombination probably contributed to adaptation of HIV-1 to its environment to be successfully transmitted from mothers to their infants. In addition, our data allow both to confirm, in natural in vivo conditions, a hot spot for recombination in the C2 region of HIV-1 envelope gene, and to suggest another hot spot in the C3 region.
-Hiv -1
-Mother to child transmission
-Neutralizing antibodies
Source: http://www.theses.fr/2008TOUR3302/document
Voir plus Voir moins


UNIVERSITÉ FRANÇOIS – RABELAIS DE TOURS
CHIANG MAI UNIVERSITY


ÉCOLE DOCTORALE « SANTÉ, SCIENCES, TECHNOLOGIES »
INSERM ERI 19 – « Virus, Pseudovirus : Morphogenèse et Antigénicité »

THÈSE
présentée par :
Tanawan SAMLEERAT

soutenue le : 22 septembre 2008


pour obtenir le grade de : Docteur de l’université François - Rabelais
Discipline/ Spécialité : VIROLOGIE

Transmission mère-enfant du virus de l’immunodéficience
humaine de type 1 : rôle des anticorps neutralisants et
caractéristiques moléculaires des variants transmis.
Mother-to-child transmission of the human immunodeficiency virus
type 1: role of neutralizing antibodies and molecular characteristics
of the transmitted variants.

THÈSE EN CO-TUTELLE dirigée par :
BARIN Francis Professeur, Université François – Rabelais, Tours.
LEECHANACHAI Pranee Assistant-Professor, Chiang Mai University, Chiang Mai

RAPPORTEURS :
CHAIX Marie-Laure MCU-PH, HDR, Université René Descartes, Paris V.
SUTTHENT Ruengpung Professor, Mahidol University, Bangkok

JURY :
LALLEMANT Marc Directeur de Recherches, IRD URI 174, Chiang Mai
SIRISANTHANA Thira Professor, Chiang Mai University, Chiang Mai












I dedicate this thesis to my wonderful parents,
SOMSAK SAMLEERAT
and LADDA SAMLEERAT.
I hope that this achievement will complete the dream that you had for me all those
many years ago when you chose to give me the best education you could.













2

ACKNOWLEDGEMENT

This thesis is the end of my long journey to obtain a double degree from Chiang
Mai University (Thailand) and Université François Rabelais (Tours, France). I have not
traveled alone during this journey. A great number of people made this journey possible
with their support and encouragement. It is a pleasure to convey my gratitude to all of
them in this acknowledgment.
In the first place, I would like to express my gratitude to my thesis advisor,
Assistant Professor Dr. Pranee Leechanachai, Faculty of Associated Medical Sciences,
Chiang Mai University, for her supervision, advice, and guidance from the very early
stage of my graduate education as well as giving me wonderful experiences in molecular
biology. Her wide knowledge and her logical way of thinking are of great value for me.
She gave me the confidence and support to start my PhD study, and provided
opportunities such as PhD scholarships from the Franco-Thai Collaboration Program and
Collaborative Research Network (CRN). Finally, she accepted me as a lecturer at the
Division of Clinical Microbiology, Department of Medical Technology, Faculty of
Associated Medical Sciences, Chiang Mai University.
I would like to express my deep and sincere gratitude to my thesis director,
Professor Dr. Francis Barin, François Rabelais University, for his supervision, advice,
and crucial contribution, which made him a backbone of this research and thus to this
thesis. His great efforts to explain things clearly and simply and his personal guidance
have provided me with a good basic knowledge of HIV immunology and virology, and
confidence to present my works to the public. The door of his office was always open
whenever I faced any problems and even to answer to my “unintelligent” questions about
research. He has quickly become the model of researcher and scientist I would like to be.
I also specially thank him for taking such a good care of my life during this long journey
in France. I am indebted to him more than he knows.
I am also indebted to Assistant Professor Dr. Wasna Sirirungsi, Faculty of
Associated Medical Sciences, Chiang Mai University, for her valuable advice on living
and working abroad, and for her help in obtaining financial support from the Franco-Thai
Collaboration Program.
I gratefully acknowledge the Program for HIV Prevention and Treatment
(PHPT)/IRD URI 174, for supporting me with essential assistance in providing the patient
specimens and clinical data of this study. I would like to thank Dr. Marc Lallemant, the
PHPT director, for the opportunity to work with Professor Francis Barin and the excellent
advice during the preparation and correction of this thesis. I am also thankful that he
accepted to be member of the thesis committee. I would like to thank Dr Gonzague
Jourdain for his essential comments over several years and the statistical analysis he
conducted during this thesis. His expertise in statistical analysis has been very helpful for
3

all my work. I warmly thank Dr. Nicole Ngo-Giang-Huong, for her valuable advice and
friendly help. Her extensive discussions around my works and interesting idea have been
very helpful for this thesis. Many thanks to you, Nicole, for pressing me during my lazy
days when I was writing the thesis. I wish to thank Dr. Sophie Le Coeur and Dr. Tim
Cressey for their interesting comments about my thesis work. I also wish to thank the
PHPT lab staff for their friendship and for always preparing great quality specimens for
my experiments.
I gratefully thank Professor Dr. Thira Sirisanthana, the director of Research
Institute for Health Sciences, Chiang Mai University; Professor Dr. Ruengpung Sutthent,
the director of National HIV Repository and Bioinformatic Center, Mahidol University;
and Dr. Marie-Laure Chaix, CHU Necker-Enfants Malades, Université René Descartes,
Paris V, France, for having kindly accepted to be members of the thesis committee.
Today I especially remember my big family, the staff at INSERM ESPRI ERI 19
(Morphogénèse et Antigènicité du V.I.H et des Virus des Hépatites), Faculté de
Médecine, François Rabelais University of Tours, France. They were a center of my life
during these 3 years in France and made me feel Tours like a second home. The warm
support of all my friends enabled me to complete this thesis and have a wonderful time
along the way.
“Thanks to all of you for giving me such a beautiful time when working together,
for sharing various thoughts during the Friday breakfast and every coffee break in the
afternoon, for giving me personal French lectures, for all your support when I wanted to
visit châteaux or any place in France, and for teaching me what is “French”... Individual
acknowledgments are delivered to all of you …
Martine Braibant - Million thanks for your friendship, kindly help and always
support me…you are like an oasis of ideas when I had problems with my experiments.
Denys Brand - I will never forget my first day in the elevator with you! And your
children made my weekend in the lab so colorful and memorable, thank you for giving me
your friendship.
Nadine Gaudin - Many thanks for your nice help in secretarial work, for your
early morning greeting and valuable advice, and special thanks for this great souvenir of
rainy “randonnee” in Telethon 2007 (also for cooking many delicious foods for me).
Alain Moreau - My great neighbor!!! Many thanks for enduring my null questions
about Bioinformatics and for your patience when listening all my frustrated stories.
Eric Piver - Special thanks for creating a warm friendship and beautiful memory.
You are my idol of hard worker in the lab.
Romuald Patient - You are a centre of friendship in the lab, turning bad and hot
temper into humor with your incredible imagination…my best friend!!!
4

Laura Esteban Riesco - Many thanks for giving me a great friendship at the lab, at
every party and many places in between…without you, I would have never discovered
new things and learned new skills…you are my friend forever.
Suzie Thenin - Many thanks for being a good friend and a great lab partner to
fulfill this thesis. Also, a special thank for taking care of me during the long seminars of
l’Ecole Doctorale.
Christine Collin - My pretty neighbor!!! Many thanks for your kindness and
sharing such a good time when we talked together.
Catherine Gaudy - You are a wonderful woman…many thanks for your kindly
support to my work.
Christophe Hourioux and Emmanuelle Blanchard - Thank you so much for your
great support and valuable advices.
Emmanuelle Roch - Many thanks for your kindly help and being the first person I
worked with.
Elodie Beaumont - Thanks for helping me as every time as I needed and giving me
a sincere friendship.
Malika Ait-Goughoulte - Thanks for your humor and giving me an actual
friendship.
Marie Lambele - Many thanks for taking care since my first day in the lab until
your last day.
Vincent Caval, Pauline Ferrarris, Virginie Desvignes, Marion Depla, and
Woottichai Khamduang - Thanks a lot! You made my last year in the lab most memorable
with many discussions, laugh, and a lot of smiles…Woot, thanks for staying with me in
the lab even when I worked very late during the night.
Sylvie Brunet, Damien Thierry and all staffs at the Laboratoire de Virologie,
CHRU de Tours - sincerely thanks for your kindness, help, and friendship.
Lastly, I convey special acknowledgement to Alain Goudeau, Philippe Roingeard,
and Jean-Christophe Pagès - Thanks for your warm welcome in the team and all the
excellent advices. You are the best chefs. Your leadership inspires me to be as successful
as you…”
I also would like to thank all staffs of the Division of Clinical Microbiology,
Department of Medical Technology, Faculty of Associated Medical Sciences, Chiang
Mai University, for their support and great welcome me in the team.
I would like to address my loving thanks to my parents, which deserve a special
mention for their inseparable support and prayers. My Father, Somsak Samleerat is the
person who put the fundament of my scientist character, showing me the basic
experiments in Biology, Physics, and Chemistry since I was a child. My mother, Ladda
Samleerat, is the most important person who inspired my desire of Ph.D. and sincerely
5

raised me with her gentle love. I also want to express my appreciation for my boyfriend,
Pakorn Pengin whose patiently endured a long wait for my return without any condition
during the many years spent abroad. Without their encouragement and understanding it
would have been impossible for me to finish this thesis.
Finally, I would like to thank everybody who was important to the successful
realization of thesis, as well as expressing my apologies to those I could not mention
personally.

Tanawan Samleerat
September, 2008






















6

TRANSMISSION MÈRE-ENFANT DU VIRUS DE
L’IMMUNODÉFICIENCE HUMAINE DE TYPE 1 : RÔLE DES
ANTICORPS NEUTRALISANTS ET CARACTÉRISTIQUES
MOLÉCULAIRES DES VARIANTS TRANSMIS
TANAWAN SAMLEERAT
Ph.D. (BIOMEDICAL SCIENCES), Ph.D. (SCIENCES DE LA VIE ET DE LA SANTÉ)
THESE EN CO-TUTELLE: CHIANGMAI UNIVERSITY (THAILAND) ET UNIVERSITÉ FRANÇOIS
RABELAIS (TOURS, FRANCE)
CO-DIRECTION: Pr FRANCIS BARIN, Pharm D, Ph.D., Pr PRANEE LEECHANACHAI, Ph.D.
RÉSUMÉ
Les anticorps neutralisants d’origine maternelle sont régulièrement associés à la protection du
fœtus ou du nouveau-né dans bon nombre d’infections virales. Les données disponibles dans la
littérature pour ce qui concerne le rôle de ces anticorps neutralisants dans la transmission mère-enfant
(TME) du VIH-1 sont cependant relativement contradictoires, et quelques études moléculaires tendent
à montrer que la TME du VIH-1 est souvent caractérisée par l’acquisition d’une population virale
génétiquement restreinte chez l’enfant, suggérant une pression de sélection de certains variants
maternels.
Au cours de cette thèse réalisée sur une population thaïlandaise, les anticorps neutralisants ont
en effet été recherchés (et quantifiés) vis à vis de 6 isolats primaires de sous-types B (n=3) et
CRF01_AE (n=3) chez 45 mères transmetteuses et 45 mères non-transmetteuses appariées sur la
+charge virale plasmatique, le nombre de lymphocytes CD4 , et la durée de la chimioprophylaxie. Nous
avons notamment montré que la présence et les titres élevés d’anticorps neutralisant l’isolat MBA
(sous-type CRF01_AE) étaient associés un risque moindre de TME du VIH-1. Le séquençage du gène
env de cet isolat a révélé quelques caractéristiques moléculaires, tout particulièrement une large
insertion fortement glycosylée dans la région V2. Cet ensemble de travaux a confirmé le rôle
protecteur de certains anticorps neutralisants dans la TME du VIH-1, a permis de suggérer que
certaines souches seraient de bons indicateurs d’anticorps neutralisants associés à la protection, et a
confirmé le rôle de la région V2 de l’enveloppe virale en tant que cible des anticorps neutralisants.
Nous avons analysé les caractéristiques moléculaires des virus transmis dans le contexte de la
TME au sein d’une population parfaitement caractérisée sur le plan bioclinique, infectée uniquement
par des souches de sous-type CRF01-AE. Dix-sept couples mère-enfant ont été étudiés, 6 enfants
ayant été infectés in utero et 11 enfants en période périnatale. Les séquences du gène env (région
couvrant la quasi-totalité de la gp120) ont été amplifiées et séquencées après clonage. Un total de 353
clones étaient disponibles pour l’analyse moléculaire. Nos résultats confortent les données en faveur
de la transmission à l’enfant d’une population virale restreinte génétiquement malgré la présence d’une
population virale complexe chez la mère, et ceci quelle que soit la période de transmission, in utero ou
intrapartum. Une gp 120 plus compacte et une moindre glycosylation ne sont pas des caractéristiques
des virus transmis de la mère à l’enfant. Cependant, deux sites de N-glycosylation (N301 et N384)
semblent être sélectionnés chez les virus transmis, ce qui pourrait conforter l’implication du « bouclier
glycanique » de la gp120 dans l’avantage sélectif. Ce travail a également permis d’identifier pour la
première fois deux cas de TME liés à des variants issus de recombinaisons entre variants maternels,
suggérant également la contribution de la recombinaison dans la sélection de variants transmissibles.
L’analyse fine de ces recombinaisons a confirmé la présence d’un « hot spot » dans la région C2 du
gène env, et a révélé pour la première fois un second « hot spot » dans la région C3.
En conclusion, les informations obtenues nous ont permis de confirmer le rôle possiblement
protecteur de certains anticorps neutralisants dans le contexte de la transmission mère-enfant du VIH-
1, et d’identifier des événements moléculaires contribuant à la sélection de variants transmissibles
dans ce même contexte. A long terme, la connaissance de telles propriétés pourrait permettre de
contribuer à une démarche rationnelle menant vers l’obtention de vaccins préventifs.
MOT-CLÉS : HIV-1, CRF01_AE, TRANSMISSION MÈRE-ENFANT, ANTICORPS
NEUTRALISANTS, ENVELOPPE, QUASI-ESPÈCE, GLYCANES, RECOMBINAISON.
7

MOTHER-TO-CHILD TRANSMISSION OF THE HUMAN
IMMUNODEFICIENCY VIRUS TYPE 1 : ROLE OF NEUTRALIZING
ANTIBODIES AND MOLECULAR CHARACTERISTICS OF THE
TRANSMITTED VARIANTS
TANAWAN SAMLEERAT
Ph.D. (BIOMEDICAL SCIENCES), Ph.D. (SCIENCES DE LA VIE ET DE LA SANTÉ)
THESIS UNDER THE CO-DIRECTED THESIS CONVENTION BETWEEN CHIANGMAI
UNIVERSITY (THAILAND) AND FRANÇOIS RABELAIS UNIVERSITY OF TOURS (FRANCE).
THESIS ADVISORS : FRANCIS BARIN, Pharm D, Ph.D, PRANEE LEECHANACHAI, Ph.D.
ABSTRACT
Maternal neutralizing antibodies (NAbs) can cross the placental barrier into the fetal
bloodstream, thus protecting the infant against infection with numerous pathogens. Mother-to-
child transmission (MTCT) of HIV-1 is a unique situation where babies are exposed to the virus
in presence of passively transferred antibodies and provides opportunities to study the role of
passively acquired antibodies in preventing HIV infection. Maternal antibodies are among the
selective factors potentially responsible for a genetic bottleneck, and may play a role in limiting
transmission of neutralization sensitive variants. In this study, we aimed at define the role of
maternal NAbs in MTCT of HIV-1 and to characterize the HIV-1 envelope glycoproteins of
viruses preferentially transmitted in MTCT of HIV-1.
Titers of NAbs against six primary isolates of clades B and CRF01_AE were determined
in sera from 45 transmitting mothers and 45 non-transmitting mothers matched for the main
independent factors associated with MTCT in Thailand. A lower risk of MTCT, particularly for
intrapartum transmission, was associated only with higher NAb titers against the CRF01_AE
strain, MBA. The envelope glycoprotein of this strain showed an unusually long V2 domain of 63
amino acids encoding 6 potential N-linked glycosylation sites (PNGS) contributing to a higher
resistance to neutralization by sera of mothers when compared to other CRF01_AE strains,
suggesting that some primary isolates may be useful indicators for identifying protective
antibodies. The characteristics of the HIV-1 envelope gp120 gene were analyzed in a total of 353
sequences from 17 HIV-1-infected mother-infant pairs. We found that even if the mother had a
complex viral population only viruses of a restricted subset were transmitted to the infant,
independently of whether transmission occurs in utero or intrapartum. We did not find that
shorter gp120 or fewer PNGS were characteristics of viruses transmitted from mother to infant.
However, we found that a limited number of PNGS that seem to be conserved in all infant
variants but are not uniformly present in mothers, particularly at positions N301 and N384 ,may
confer an advantage on the virus to be transmitted. Moreover, we identified two cases that suggest
that recombination probably contributed to adaptation of HIV-1 to its environment to be
successfully transmitted from mothers to their infants. This is to our knowledge the first
description of the contributing role of HIV recombination in MTCT. In addition, our data allow
both to confirm, in natural in vivo conditions, a hot spot for recombination in the C2 region of
HIV-1 envelope gene, and to suggest another hot spot in the C3 region. Therefore these studies
could provide insights into the role of maternal NAbs and how these contribute to modulate the
transmitted viruses. They may provide critical insights into the antibody responses that are needed
for effective vaccines and other prophylactic.
KEY WORDS : HIV-1, CRF01_AE, MOTHER-TO-CHILD TRANSMISSION,
NEUTRALIZING ANTIBODIES, ENVELOPE GENE, QUASISPECIES, GLYCANS,
RECOMBINATION
8

















































































































































































































































































































































































































































































































































































































































































































































































































































































































































































การถ ายทอดเช อเอชไอวไทป หน งจากแม ส ล ก: บท บาทของน วทราไลท ซ งแอนต บอด และ
ล กษณะทางโมเลก ลของไวร สท ถกถายทอด
นางสาว ธนวรรณ ส าล รตน
ว ทยาศ าสตรด ษฎ บ ณฑ ต ( ว ทยาศาสตร ช วการแ พทย), Ph.D. (Sciences de la Vie et de la Santé)
ว ทยาน พนธ ภายใต ข อตกลงการร วมให ค าปร กษ าวทยาน พนธ ระหว างมหาว ทยาล ยเ ช ยงใหม ( ประเทศไทย) และ
มหาว ทยาล ยฟร อ งซ วร- คาเบอเลส เดอ ต ร ( ประเทศฝร งเศส)
อาจารย ท ปร กษาว ทยาน พนธ : FRANCIS BARIN, Pharm.D-Ph.D, ปราณ ล ชน ะช ย, Ph.D.
บทค ดย อ
ในระหว างการตงครรภ นน แอนตบอดของแม สามารถผ านข ามรกเข าส ระบบหม นเวยนเลอดของทารกท อยในครรภ ซ งแอนตบอด ท ทารก
ได ร บจ ากแม ในข ณะทอยในครรภ นจะสามารถปองกนทาร กเม อแ รกเก ดจ ากการ ต ดเช อไ ดหล าย ชน ด ด วย เหต น เม อแ ม ท ต ดเ ชอไวรสเอชไอว ถ าย ทอ ด
ไว รสไปส ล ก ล กก จะได ส มผสกบไ วร สในขณะท ม แอนตบอดของแม อย ในร าง กา ยแ ล ว ซ งแอนตบอ ดเหลาน ก น าทจะมบทบาทในการปองกนการ ต ด
เช อเอชไอว จากแม ส ล กได เช นก น แตอย างไรก ตามแอนต บอด จากแม เหลาน ก เป นป จจ ยหนงท ท าใหเกดการค ดเลอกสายพนธ ของไวรสท ถ กถายทอดไป
ย งล ก ซ งสายพ นธ ท ถ กน วทราไลท หร อถกย บย งโดยแอนต บอดของแม จะถ กจ ากดไม ให ถ ายทอดไปย งล ก ในงานว จ ยน ผ ว จ ยได ท าการศกษากลไกของ
น วทราไลท ซ งแอนตบอดของแมในการปองกนการตดเชอเอชไอวจากแม ส ล ก และศกษาลกษณะทางโมเลก ลของไกลโคโปรตนทอยบนเปลอกของ
ไวร สท ถกถ ายทอดไปย งล ก
การศกษาน ได ท าการตรวจว ดปร มาณนวทราไลท ซ งแอนตบอดในซ ร มของแม ท ถ ายทอดเช อเอชไอว ไทป หนงส ล กจ านวน 45 ราย และแม
ท ไม ได ถายทอดเชอไวรสจ าน วน 45 ราย โดยคดเล อดผ ต ดเช อจ ากการ เปร ยบเทยบปร มาณไว รสในพลาสม า, จ านวนของเมดเล อดข าว ชน ด CD4+ ล ม
โฟไซต, และระย ะ เ ว ล า ท ได ร บยาตานไวร ส ซ งลวนเปนปจจยท ม ผลตอการถายทอดเช อเอชไอว จากแม ส ล ก ต อการทดสอบด วยไวรสเพาะเลยงจานวน
6 สายพนธ ซ งประกอบดวยไวรสสปไทป บ จ านวน 3 สายพนธ และ CRF01_AE จ านวน 3 สายพนธ ผลจากการตรวจวดพบวานวทราไลท ซ ง
แอนตบอด ต อไวร ส MBA ( ไวร ส CRF01_AE ซ งเปนสายพนธ ท ระบาดมากอย ใ นประเ ทศไทย) ท ม ปรมาณสงนนจะมความสมพ นธ ก บการลดความ
เสยงตอการถายทอดเช อจา กแม ส ล ก โดยเฉพาะเม อกา ร ถายทอดเก ดข นในช วงระหว างคลอด (intrapartum transmission) ผลจากการหาล าดบนวคลโอ
ไทดของเชอไวร ส CRF01_AE จ านวน 3 สายพนธ น น พบว า MBA ม ความยาวของส วน V2 ของ gp120 มากกว าสายพ นธ อ น ค อม จ านวนกรดอะม โน
เทาก บ 63 และม ต าแหนงของการเตมน าตา ล (N-linked glycosylation) 6 ต าแหน ง ซ งพบวาล กษณ ะดงกลาวม ส วนเ กยว ของ ทาใ หไว ร ส MBA ม ความ
ต านทานต อการน วทราไลท โดยแอนต บอด มากกว าไวร ส CRF01_AE อ กส องส ายพ นธ ท าใหสรปได ว าไวรสเพาะเลยงบางสายพ นธ เทานนทเหมาะก บ
การนามาทดสอบหาปร มาณของน วทราไลท ซ งแอนต บอด
นอกจากน ผ ว จ ยยงได ท าการศ กษา ค ณสมบ ต ทางโมเลก ลของไวร สเอชไอว ท สามารถถายทอดจากแม มายงลกได โดยการหาล าดบนวคลโอ
ไทด ของย น gp120 ซ งเปนย นของไกลโคโปรต นท อย บนเปล อกของไวร ส จ านวนท งส น 353 ล าด บ จากค แม- ล กท ต ดเชอเอชไอว ไทป หนงจานวน 17 ค
ซ งพบวาไวรสทแยกไดจากแม ม ล าดบนวคลโอไทด ท ม ความหลากหลายมากกวาไวรสทแยกไดจากล ก โดยไวรสท ถ กถายทอดไปยงลกนนเป น
ปร ะชา กรส วนนอยของไวรสในแม และไม ม ความแตกตางไม ว ากา รถ ายทอดจะเกดข นร ะหว างตงครรภ (in utero transmission) หร อร ะหว างคลอด
และไม พบวาไวรสท ถ กถายทอดจะม gp120 ส นหรอม ต าแหนงของการเตมนาตาลน อย แ ตอยางใด อยางไรกตามพบวาตาแหนงท ถ กเ ต มนาตาลบาง
ตาแหน ง ได แก N301 และ N384 นน จะพบในไวร สท แยกไ ด จากล กเกอบทงหมด แตจะพบไม มากในไวร สทแยกได จากแม ซ งอาจกล าวได ว าตาแหน ง
ด งกลาวมความส าคญตอไวรสท ถกคดเลอกให ถ ายทอดไปย งล ก ย งไปกว านนผ ว จ ยยงได ค นพบว าม แม- ล กท ต ดเชอเอชไอ ว จ านวน 2 ค จาก 17 ค ทได
ศ กษาข างต น ม การถ ายทอดเช อไวร สเอชไอว ล กผส มจากแม ไปย งล ก ซ งชใหเหนความสามารถท ซ บซ อนของไวร สเอชไอว ท สามารถปร บตวใหเขาก บ
สถานะการณ จนสามารถถ กค ดเลอกใ ห ถ ายทอดไปย งลกได ซ งการค นพบน เปนคร งแรก ท พบว าไวรสลกผสมสามารถถ ายทอดจากแม ไปส ล กได และ
พบว าตาแหน งท เก ดการผสมก นน นอย บร เวณ C2 ซ งเปนตาแหน งท ถ กพบมากจากการศ กษาไวร สในหลอดทดลอง และต าแหน งบร เวณ C3 ของ gp120
ผลของการศ กษาน จะ เป นข อม ลท สามารถอธ บายกลไ กของน วทราไลท ซ งแอนตบอดของแม ในการปองก นการ ต ดเช อจ ากแ ม ส ล ก และ
สามารถอธ บายกลไกของไวร สเอชไอว ไทป หน งในการ ปร บตวให สามารถถ ายทอด จ ากแม ไปส ลกไ ด ซ งข อม ลด งกล าวนจะน าไปส ขนต อ นต อไ ปของ
การศ กษาความเป นไ ปได ทจะ น าแอน ต บอ ด มาใช ในการป องก นการต ดเช อเอชไ อ ว และเป นข อม ลในการพ ฒนาว คซ นทกร ะต นใหเก ดก ารสร าง
แอนต บอด ต อเชอเอ ช ไอว
ค าส าค ญ : เอชไอว, CRF01_AE, การถ าย ทอดเช อจ ากแม ส ล ก, นวทราไลท ซ งแอนตบอ ด, QUASISPECIES, GLYCANS, ไวร สล กผส ม
9

TABLE OF CONTENTS

PAGE
3 ACKNOWLEDGEMENTS
ABSTRACTS
French 7
English 8
Thai 9
LIST OF TABLES 14
LIST OF FIGURES 15
ABBREVATIONS 18

CHAPTER 1 : INTRODUCTION 20
1. INTRODUCTION 21
2. BACKGROUND 23
PART I. Human immunodeficiency virus (HIV) 23
1. History of AIDS and HIV discovery 23
2. Current situation of HIV and AIDS epidemic 24
3. HIV structure, genomic organization and replication 27
cycle 27
3.1 Viral structure 28
3.2 Genomic organization 29
3.3 Replication cycle 35
4. HIV envelope glycoproteins
4.1 Envelope glycoprotein synthesis and 36
glycosylation
4.2 Gp120 structure 36
4.3 Gp41 structure 44
10